食品中粗脂肪含量的测定（索氏抽提法）

食品中粗脂肪含量的测定（索氏抽提法）

1、目的与要求

1.1  学习索氏抽提法测定脂肪的原理与方法。

1.2  掌握索氏抽提法基本操作要点及影响因素。

2、原理

    利用脂肪能溶于有机溶剂的性质，在索氏提取器中将样品用无水或石油mi等溶剂反复萃取，提取样品中的脂肪后，蒸去溶剂,所得的物质即为脂肪或称粗脂肪。

3、仪器与试剂

3.1  索氏提取器。

3.2  电热恒温鼓风干燥箱。

3.3  干燥器。

3.4  恒温水浴箱。

3.5  滤纸筒。

3.6  无水（不含过氧化物）或石油mi（沸程30℃～60℃）

4、测定步骤

4.1  样品处理

4.1.1  固体样品: 准确称取均匀样品2g～5g（精确至0.01mg），装入滤纸筒内。

4.1.2  液体或半固体: 准确称取均匀样品5g～10g（精确至0.01mg），置于蒸发皿中,加入海砂约20g,搅匀后于沸水浴上蒸干,然后在95℃～105℃下干燥。研细后全部转入滤纸筒内，用沾有的脱脂棉擦净所用器皿，并将棉花也放入滤纸筒内。

4.2  索氏提取器的清洗

 将索氏提取器各部位充分洗涤并用蒸馏水清洗后烘干。脂肪烧瓶在103℃±2℃的烘箱内干燥至恒重（前后两次称量差不超过2mg）。

4.3  样品测定

4.3.1  将滤纸筒放入索氏提取器的抽提筒内，连接已干燥至恒重的脂肪烧瓶，由抽提器冷凝管上端加入或石油mi至瓶内容积的2/3处，通入冷凝水，将底瓶浸没在水浴中加热，用一小团脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口。

4.3.2  抽提温度的控制：水浴温度应控制在使提取液在每6min～8min回流一次为宜。

4.3.3  抽提时间的控制:  抽提时间视试样中粗脂肪含量而定，一般样品提取6h～12h，坚果样品提取约16h。提取结束时，用毛玻璃板接取一滴提取液，如无油斑则表明提取完毕。

4.3.4  提取完毕。取下脂肪烧瓶，回收或石油mi。待烧瓶内仅剩下1～2mL时，在水浴上赶尽残留的溶剂，于95℃～105℃下干燥2h后，置于干燥器中冷却至室温，称量。继续干燥30min后冷却称量，反复干燥至恒重（前后两次称量差不超过±2mg）。

5、结果计算

5.1  数据记录表

5.2  计算公式

X（％）=m1-m0/m*100

式中：X—样品中粗脂肪的质量百分数，单位(％)。

      m—-样品的质量, 单位(g)；

      m₀ —脂肪烧瓶的质量, 单位(g)；

m₁ —脂肪和脂肪烧瓶的质量, 单位(g)。

6、注意事项

6.1  抽提剂是易燃，易爆物质，应注意通风并且不能有火源。

6.2  样品滤纸筒的高度不能超过虹吸管，否则上部脂肪不能提尽而造成误差。

6.3  样品和mi浸出物在烘箱中干燥时，时间不能过长，以防止不饱和的脂肪酸受热氧化而增加质量。

6.4  若放置时间过长，会产生过氧化物。过氧化物不稳定，当蒸馏或干燥时会发生爆炸，故使用前应严格检查，并除去过氧化物。

6.4.1  检查方法：取5mL于试管中，加KI(100g/L)溶液1mL，充分振摇1min。静置分层。若有过氧化物则放出游离碘，水层是黄色（或加4滴5 g/L淀粉指示剂显蓝色），则该需处理后使用。

6.4.2  去除过氧化物的方法：将倒入蒸馏瓶中加一段无锈铁丝或铝丝，收集重蒸馏。

6.5  反复加热可能会因脂类氧化而增重，质量增加时，以增重前的质量为恒重。

7、思考题

7.1  简述索氏抽提器的提取原理及应用范围？

7.2  潮湿的样品可否采直接提取？为什么？

7.3  使用作脂肪提取溶剂时，应注意的事项有哪些？为什么？