伯乐Bio-Rad TC20自动细胞计数仪

TC20秉承了TC10的核心设计理念与主要特点，具体如下：

1. 采用先进的图像分析方法（区别于传统的库尔特计数原理）,计数结果准确、稳定

2. 多维自动聚焦技术

3. 哺乳动物细胞总数及活细胞计数

4. 一步操作，30秒内实现真正的全自动细胞计数

另外，之前用于TC10的耗材与外围设备与TC20兼容，产品名称与货号也与原来保持一致：Counting kit （包含slides与trypan blue），Counting slides，Trypan blue dye， Thermal label printer & labels和Verification kit。
TC20全自动细胞计数仪的新功能
虽然TC20在外观上与TC10几乎一模一样，但由于采用了全新的镜头以及更加强大的分析算法，相比TC10在性能上有了如下主要的提升：

1. TC20活细胞计数直径范围：6～50微米，而TC10活细胞计数直径范围：10～50微米。可对干细胞、从血液、组织等获得的各种原代细胞如淋巴细胞、外周血单个核细胞（PBMCs）等进行准确地计数，这是TC10无法实现的

2. 细胞直径分选功能：在处理诸如原代细胞等复杂样品时，可通过设定细胞直径范围对目标细胞进行计数

3. PC应用软件——TC20 Data Analyzer，用户可将原始计数数据从TC20上导出，并在PC机上利用TC20 Data Analyzer软件进行后续分析。该软件可从Bio-Rad网站上免费下载

4. 用户可对每个样品独立命名，进行大量样品计数时，也可采用自动命名工具节省时间

5. 可自动将原始数据导出到U盘，其中包含柱状图、样品名称等信息

TC20全自动细胞计数仪的直径分选功能
TC20有2种计数模式：一种是和TC10一样的全自动模式；另一种就是直径分选功能，该功能可实现对细胞进行有选择性的计数。可根据用户输入的细胞直径范围对该大小范围内的细胞进行计数。该模式特别适用于对含有多种细胞类型的复杂样品进行计数、分析，如干细胞、原代细胞等。 
    
如要使用细胞直径分选功能，必须激活User defined gates选项。激活该选项后，会在计数前显示柱状图，随后输入细胞直径的范围。TC20只会对设定范围大小内的细胞进行分析，大小范围超出设定范围的细胞则不被分析。如上图示。
TC20可保存之前设定的细胞直径范围，用于后续的实验。
用户还可激活图像预览功能，在设定直径范围内的细胞在预览图上显示为黄色。当调整直径范围大小时，预览图会随设置的不同进行更新。
如果对一种全新的细胞种类进行计数，可将直径范围设置在较大值，在PC上利用TC20 Data Analyzer进行后续分析，确定该细胞种类较好的计数直径范围。如下图。

如果没有激活细胞直径分选功能，那么TC20采用默认的方式对所有细胞进行计数。得到的计数结果有可能反映了样品中数量较多的那种细胞，而非用户真正想研究的细胞类型。

TC20全自动细胞计数仪的应用
   根据细胞计数在整个技术路线中的应用，大致包括如下方向：

1. 诱导多功能干细胞(iPS or iPSC)与人胚胎干细胞（hESC）的相关研究

2. 外周血单个核细胞（PBMCs）计数，因为PBMC往往小于10微米

3. 原代细胞计数。原代细胞往往来源于组织，种类多样，如脂肪细胞、肝细胞、角质形成细胞和心肌细胞等

4. 细胞培养中确定培养细胞的浓度

5. 在流式细胞前确定细胞浓度，若浓度过高会导致流式细胞仪的堵塞

6. 毒理学研究——对细胞进行一定条件的理化刺激前后进行总细胞/活细胞的计数，评估刺激条件的效果

7. 病毒学研究——通过对感染细胞的计数分析评估病毒的感染强度