NMT作为生命科学底层核心技术,是建立活体创新科研平台的必备技术。2005年~2020年,NMT已扎根中国15年。2020年,中国NMT销往瑞士苏黎世大学,正式打开欧洲市场。 |
基本信息
主题:Ca2+激活的14-3-3蛋白在盐胁迫中充当分子开关
期刊:Nature Communications
研究使用平台:NMT植物耐盐创新平台
标题:Calcium-activated 14-3-3 proteins as a molecular switch in salt stress tolerance
作者:中国农业大学杨永青、郭岩、杨志佳
检测离子/分子指标
Na+
检测样品
拟南芥根,距根尖300 μm根表上的点
中文摘要
离子/分子流实验处理方法
7日龄拟南芥幼苗100 mM NaCl处理24 h
离子/分子流实验结果
之前的研究结果表明PKS5能磷酸化SOS2并调节SOS2激酶活性,接下来需要确定PKS5是否影响拟南芥的耐盐性。利用NMT技术,在100 mM NaCl处理12 h后,检测了7日龄BigM、pks5-3和pks5-4幼苗根系分生区Na+流速。盐胁迫根系呈现明显的净Na+外排,但pks5-3和pks5-4的外排速率明显低于BigM(图1c, d)。
SOS2的过表达并不能改善pks5-4盐敏感表型,然而,pks5-4的盐敏感表型是通过SOS2S294A的表达所改善。然后本研究检测了杂交株系中的Na+流速,发现SOS2S294A的表达改善了pks5-4的Na+流速,而SOS2的表达却没有(图1g, h)。因此,PKS5以依赖SOS2Ser294磷酸化的方式负调节拟南芥的耐盐性。
图1. SOS2Ser294突变可改善pks5-4的盐敏感表型
其他实验结果
PKS5可以与SOS2在Ser294位点相互作用并磷酸化SOS2。
PKS5通过磷酸化SOS2负调控SOS2激酶活性。
PKS5通过14-3-3s抑制酵母中的SOS通路。
PKS5依赖性的SOS2Ser294磷酸化抑制SOS2激酶的活性。
PKS5以依赖SOS2Ser294磷酸化的方式负调控拟南芥的耐盐性。
盐胁迫增强了14-3-3蛋白与PKS5的相互作用。
盐胁迫下,14-3-3蛋白抑制PKS5的活性。
14-3-3λ和14-3-3κ通过抑制PKS5活性调节PMH+-ATPase活性。
14-3-3λ和κ至少部分通过抑制PKS5激酶活性来调节拟南芥对碱性胁迫响应。
不同浓度的钙参与调控14-3-3-介导的SOS2和PKS5的激活和抑制。
结论
有无盐分的情况下,14-3-3蛋白结合并抑制SOS2或PKS5,这些蛋白-蛋白相互作用与14-3-3钙结合亲和力增强有关,这对植物适应盐胁迫的能力至关重要。
离子流实验使用的测试液
0.1 mM CaCl2, 0.1mM KCl, 0.5 mM NaCl, 0.3mM MES, pH 6.0
文章原文:https://doi.org/10.1038/s41467-019-09181-2
更多
DS3000应用|微卫星不稳定性(MSI)分析在一胰腺癌切除术临床案例术后长期肿瘤基因型追踪分析中的应用
厂商
2021.06.04
全力以"复" | 超值服务产品助力用户复工复产
新品
2022.06.13
案例研究 日立的服务对兰卡斯特大学的核反应堆设计研究产生重大影响
厂商
2023.03.16
赛多利斯推出创新 Picus® 2 ,定义互联电动移液器
新品
2024.07.22