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浙江好创在北美质谱会发布五款新品

2018/07/17 09:34

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一年一度的北美质谱年会由于68号,在美国加州圣地亚哥结束了,浙江好创生物技术有限公司自从2012年以来,每年都参加次世界质谱盛会。今年浙江好创生物技术有限公司隆重推出4款电喷雾离子源和一项超高压纳升液相色谱仪相连接技术产品。

1、全封闭气氛可调电喷雾离子源

采用康达效应设计离子传输管和发射针,通过计算机数据模拟得到ESI源腔内的气动流场分布结果,如上左图所示。

影响ESI离子源性能的4大因素:(1ESI腔体气动流场;(2Taylor 锥稳定性;(3)分子离子的形成过程;(4)离子源的工作寿命。

    1ESI腔体气动流场:由于采用康达效应,计算机流场模拟,发现在离离子传输管(加热毛细管)的入口处,不远的地方有一个流场驻点,并且气流分布非常均匀稳定。并且流场的分布不受气压的影响,只与离子传输管和发射针的形状有关,所以只要保证两者的加工和装配精度,就可以保证气流场的稳定和均匀性。

    2Taylor 锥稳定性:泰勒锥(Taylor Cone)是一个动态过程,它是由液体在静电场的作用下形成的。所以气流将直接影响泰勒锥的稳定性,甚至无法形成泰勒锥。渐渐变化的发射针外表面,使得气流紧贴着发射针的外表面以层流的方式前进,阻止了液体的返流,从而大大降低了发射尖端结碳的可能性,同时将发射针的尖端位于流场驻点(台风中心),液体形成的泰勒锥,不受任何气流的影响,从而保证了泰勒锥的稳定。

3)分子离子的形成过程:离开泰勒锥的液体,以离子束团的方式存在,如何将离子束团中的溶解消除的同时,将尽量多的分子离子传输到质谱分析器中,是离子源设计的一个重要环节。

上图左方所示可见,在离子传输管(加热毛细管)内部的气流,是以旋转层流的方式向质量分析器前进的,高速旋转的气流与离子束团碰撞,加快了溶剂的蒸发,同时高速旋转的气流对扇形发射的离子团进行聚焦,阻止分子离子与离子传输管管壁碰撞,从而提高了离子传输效率。同时这一过程是在低真空状态下进行的,所以更有助于溶剂的蒸发。

4)离子源的使用寿命:离子源的使用寿命主要受两个因素影响。其中之一是发射针堵塞,另一个是离子传输管内表面积碳。特殊工艺制造的发射针(喷针)保证内径不变,(而不是传统的锥形),从而使喷针不易被液体中的杂质堵塞,同时由于(2)的作用,喷针不易结碳,所以喷针很不容易被堵塞;由于康达效应,高速旋转的气流对离子传输管内壁有自清洁作用,从而大大提高了离子源的工作寿命。

2、分离柱后,二硫键碎裂电喷雾离子源

二硫键是一种常见的蛋白质翻译后修饰,对稳定蛋白质的空间结构,保持及调节其生物活性有着非常重要的作用。确定二硫键在蛋白质中的位置是全面解析含有二硫键蛋白质化学结构的必要条件。

目前分析二硫键在蛋白质中的位置的方法是,比较蛋白质在二硫键打开之前和二硫键打开之后,用胰蛋白酶,酶解蛋白质所得到的肽段的差异。必须先用还原剂,如二硫苏糖醇,三(2-羧乙基)膦等,打开二硫键,然后用,烷化剂,如碘乙酰胺,将不稳定的SH基团烷化,使每个半胱氨酸的质量增加了57 道尔顿。经过这两步处理的蛋白质,其二次结构已被打开,有利于进一步的胰蛋白酶酶解。由于二硫键打开后的两个肽段通常在色谱中有不同的保留时间, 而二硫键未打开的两个肽段,其保留时间也不同,所以两种情况下肽段的比较要在全色谱时间内进行,大大增加了计算的难度。

10、中空毛细管发射针,20、紫外光反射器,30、紫外灯,40、中空毛细管发射针支架,50、辅助气体通道,60、离子束团,70、真空导入毛细管,80、质谱仪入口,90、离子化室。

 含有二硫键的医药小分子或生物大分子通过液相色谱仪分离后流入(10)中空毛细管发射针,由于中空毛细管发射针由透紫外光材料制成,发射针内的含有二硫键的多肽生物大分子被(30)紫外灯发出的紫外光照射,同时(20)紫外光反射器将向外辐射的紫外光反射并聚焦到圆心,也就是(10)中空毛细管发射针,增强了此处的紫外光强度,提高二硫键的碎裂效率。紫外光将其部分二硫键碎裂,二硫键碎裂和没碎裂的多肽生物大分子,经过发射针尖端,发生电喷雾离子化,形成(60)离子束团,辅助气体通过(60)辅助气体通道,进入(90)离子化室,提高离子化效率,从而提高离子束团的离子密度和离子信号的信噪比。

实验用的样品:样品分子式为:C107H185N27O43S2,分子量为:2601.9230,这一样品分子C,由多肽分子A(分子量1066.2360)和多肽分子B(分子量1537.7030),由一个二硫键铰链而成,分子结构如上左图所示,

上右图的上方为样品分子在紫外灯关闭时的离子谱图,打开紫外灯后得到中间的离子谱图,图中可见样品分子C,由多肽分子A和多肽分子B在同一张谱图中出现。图的下方为加了辅助气体以后,信号强度由3.04E7上升到5.30E7,说明辅助气体有增强信号的作用。

 

3、三氟乙酸兼容电喷雾离子源

众所周知,色谱流动相中加入三氟乙酸,可以大大改善色谱仪的峰型,提高色谱仪的分辨率,以及峰容量。但是由于三氟乙酸对离子化的抑制作用,使得质谱仪的离子信号大大下降,所以在液质联用领域,基本不用三氟乙酸。但是对于复杂的原蛋白质分析有极需三氟乙酸来分离复杂的蛋白质。

上左图,可见采用酸性(丙酸)气体辅助电喷雾离子化的策略消除了流动相中TFA引起的离子抑制效应,而且平均信号强度也比FA流动相高3倍。右图为复杂原蛋白的分析结果,可见丙酸的辅助,将信号提高了7-10倍。

4Thermo EasySpray 辅助气体可控电喷雾离子源

Thermo 原厂 EasySpray 的离子化室的气氛是敞开与大气的,由于发射针尖处的的外表面处理的不是非常完善,在辐射尖端经常会出现结液现象,而引起离子源的断喷状况,严重时会出现反射尖端的出口端会结碳,如右图所示。采用左图所示的辅助气体可控部件,将不会出现这一现象。离子源的稳定性和离子信号信噪比都将得到提升。

5、超高压纳升液相色谱仪连接器

众所周知,对于超高压纳升色谱仪的免工具接头 (Thermo Scientific™ nanoViper™ Fingertight Fittings) 非常昂贵,又是一次性使用。

如上图专利设计的,超高压纳升液相色谱仪连接套件,可以将普通的Fused Silica 玻璃毛细管与超高压纳升液相色谱仪相连,组成超高压纳升液相色谱质谱仪连用系统,连接极其方便,无需专业技术人员,就可完成。

 

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