细菌必须经过培养之后才能进行物种鉴定,这是一直以来我们的认知。法国马赛地中海感染研究所的研究可能会改变我们的看法。
尿样是临床实验室中处理最多的样品之一。以作者所在的马赛大学医院为例,细菌学实验室每年能收到大约62050份尿样,约占所有分析生物样品的17%(中国医院的尿样肯定比这个数字多得多)。而事实上,尿路感染在细菌感染中很普遍。快速鉴定引起尿路感染的病原体十分重要,可以避免感染性休克等致命并发症。
由于细菌需要培养后才能进行鉴定,常规方法需要24至48小时才能准确识别存在于尿样中的病原体。在这个时差内,患者通常会接受不必要的广谱治疗,显然,这会影响微生物群和细菌耐药性。减少接收样本和诊断之间的延迟时间,可以帮助患者更快地使用上恰当的药物,从而防止细菌耐药的发生。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)目前已经成为临床实验室病原体鉴定的重要工具,它能对细菌进行快速而可靠的鉴定,有潜力成为尿液病原体直接鉴定的工具。
研究团队使用被感染的尿液样本创建了MALDI-TOF质谱参考数据库,建立了使用该数据库来直接识别尿液中病原体的新方法。该方法使用少量样品(1mL)和低细菌计数,即可快速鉴定多种尿路病原体,且无需事先培养。
研究人员收集了1000个感染尿样的MALDI-TOF质谱,用于创建参考数据库。并将使用参考数据库的鉴定结果与标准数据库进行比较,对参考数据库进行评估。
结果显示,使用参考数据库可以正确诊断500个受感染的单杆菌样本中的近90%,而使用标准数据库可以正确诊断50%。对肠杆菌科、金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、铜绿假单胞菌、粪肠球菌和屎肠球菌的鉴定有了很大的提高,但对表皮葡萄球菌的鉴定却没有得到很大的改善。
显而易见地,创建适合特定类型临床样本的数据库对于提高病原体鉴定的准确率和速度具有非常重要的意义。
总之,研究人员开发的方法能够快速鉴定尿液中的病原菌,方案可以用于需要快速诊断的特定患者群体,例如肾移植患者或新生儿。
目前,临床上所用的病原鉴定方法仍然需要先培养,然后进行微生物质谱鉴定。虽然病原体直接鉴定距离真正临床应用还有很远的距离,但是这项研究给临床病原体鉴定带来了新思路。融智生物QuanTOF新一代宽谱定量飞行时间质谱平台,集核糖体蛋白与核酸(RNA、DNA)检测于一机,新一代的MALDI-TOF MS(QuanTOF)不仅能鉴定细菌、真菌,对于病毒鉴定也游刃有余,同样可以为临床病原体鉴定提供新的思路。
QuanTOF新一代宽谱定量飞行时间质谱平台
参考文献:
Direct identification of pathogens in urine using a specific MALDI-TOF spectra database. doi:10.1128/JCM.01678-18
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