守护夏日食品安全|椰酵假单胞菌最新鉴定方案

椰酵假单胞菌，也称唐菖蒲伯克霍尔德氏菌/椰毒假单胞菌米面亚种，该菌在自然界中分布广泛，特别在潮湿、温暖的环境中容易滋生。夏秋季气温高、湿度大，有利于肠道致病菌和霉菌的生长繁殖，也是椰酵假单胞菌食物中毒的高发期。

椰毒假单胞菌米面亚种能够产生一种毒素——米酵菌酸，该毒素是引起此类食物中毒的关键。我国食源性疾病监测结果表明，米酵菌酸是细菌性食物中毒导致死亡的首要致病因子，2010年至2020年，我国已发生米酵菌酸毒素中毒14起，84人中毒，37人死亡。

鉴于唐菖蒲伯克霍尔德氏菌污染并产生米酵菌酸引发食物中毒致死风险，我国先后制修订多项相关标准，如GB 5009.189-2023《食品安全国家标准 食品中米酵菌酸的测定》和WS/T 12-1996《椰毒假单胞菌酵米面亚种食物中毒诊断标准及处理原则》。

GB 5009.189-2023《食品安全国家标准 食品中米酵菌酸的测定》

目前我国对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的检验标准主要为GB 4789.29-2020《食品安全国家标准 食品微生物学检验 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌（椰毒假单胞菌酵米面亚种）检验》国家标准法，该方法为微生物纯培养法，依据形态和生理生化测定给出判断。

GB 4789.29-2020《食品安全国家标准 食品微生物学检验 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌（椰毒假单胞菌酵米面亚种）检验》

杭州大微唐菖蒲伯克霍尔德氏菌鉴定方案：

准备样品标本：自食品中采集的标本须首先经过预增菌后再针对不同标本还要同时接种于目标菌株适宜的选择性平板，根据细菌的生长情况，挑选可疑菌落纯化，得到其纯培养，作为生化鉴定的样本。

第一步：革兰氏染色、镜检

进行菌株形态特征鉴定，从而捕获其表型特征，确定待检菌株属于球菌或是杆菌、革兰氏阳性菌或是阴性菌。

DW-GS100型 全自动革兰氏染色仪

产品优势：

染色标准：创新的雾化喷嘴，每次实际使用量一致；

用户安全：封闭系统，无人为接触试剂，低毒性结晶紫；

无菌保证：玻片分别使用新鲜试剂，无交叉污染；

经济环保：低试剂消耗，产生更少废液。

第二步：选择试剂板

通过菌株形态学特征及革兰氏阴阳性特征进行试剂板的选择。

第三步：比浊、加样、培养

通过细菌麦氏浊度仪或麦氏比浊管将样品制成一定浓度的菌悬液，然后将其滴加至鉴定试剂板中并在适宜条件下进行培养。

DW-MF30型 细菌麦氏浊度仪

产品优势：

操作简单：可直接显示麦氏单位浊度值，测量时间≤1秒；

示数稳定：准确测量细菌浓度，结果准确且重复性高；

测量范围：0.3-15.0 McF麦氏浊度单位，范围更广。

第四步：鉴定分析

生化鉴定：系统通过生化反应原理（包括酶底物反应/糖利用反应/同化反应/氨基酸实验等）捕获微生物生化表型特征，利用数值编码鉴定原理，对其进行鉴定。

DW-M80 型 自动微生物生化鉴定系统

产品优势：

数据库庞大：菌种表型信息库2000种以上，可鉴定食源性致病菌和临床致病菌500种以上，并支持自建库；

结果可靠：细菌生化鉴定一致性95%以上，药敏试验结果符合率95%以上；

灵活运用：配置智能化鉴定专家系统，自动识别异常细菌表型；一块试剂板可完成鉴定、药敏双试验。

在生化鉴定之外，杭州大微还有飞行质谱微生物快速鉴定系统供选择。仪器通过MALDI-TOF质谱仪测得待测微生物的蛋白质指纹图谱，并和数据库中的标准指纹图谱进行比对，完成快速鉴定。与传统微生物鉴定技术相比，具有操作简单、快速、通量高、灵敏度高、准确度好、试剂耗品经济等优势。

DW-MS 5500型 飞行质谱微生物快速鉴定系统

产品优势：

鉴定速度：1个菌落样本，仅需10分钟；

鉴定范围：＞7400菌株（4000+物种），涵盖厌氧菌、真菌、高致病菌等，不断更新；

操作简单：挑选单菌落涂抹至靶板，然后加基质液上机检测即可。