Visikol植物透明化试剂和水合氯醛
在关于植物透明化的文献记录中,最常用的清除剂之一是酸化水合氯醛(Lersten, 1967)。水合氯醛的高折射率(约1.4280)特性使其成为一种理想的透明化试剂,具有良好的渗透力及溶解植物样品内细胞内含物的能力。水合氯醛用作水溶液,往往需要添加甘油以防止结晶,两者结合常用于临时制片观察不同种类的植物结构(见表1)。但是水合氯醛具有强麻醉作用,在美国水合氯醛属于附表IV物质,由DEA控制,大大限制了用于科研的机会。2020年,世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单新整理参考,水合氯醛仍在2A类致癌物清单中。而在实际配置透明剂时一般使用水合氯醛粉末剂,需在生物通风橱中操作,存在一定的安全隐患。
来源 | 标题 | 样本 |
McBryde, 1936 | A Method ofDemonstrating Rust Hyphase and Haustoria in Unsectioned Leaf Tissue | 菜豆,八角莲,伏牛花 |
Arnott, 1959 | Leaf Clearings | 丁香,穗子,茶树 |
Lersten, 1967 | An AnnotatedBibliography of Botanical Clearing Methods | 苔藓(全株) |
Shobe and Lersten,1967 | A Technique forClearing and Staining Gymnosperm Leaves | 裸子植物,水杉 |
Herr, 1971 | A New Clearing-SquashTechnique for the Study of Ovule Development in Angiosperms | 被子植物,桂皮,丁香蓼 |
Gardner, 1975 | A Overview ofBotanical Clearing Techniques | 综述 |
Lersten, 1986 | Modified ClearingMethod to Show Sieve Tubes in Minor Veins of Leaves | 大豆,其他双子叶植物 |
Jackson and Snowdon,1990 | Atlas of Microscopyof Medicinal Plants | 草本植物 |
Herr, 1993 | Clearing Techniquesfor the Study of Vascular Plant Tissues in Whole Structures and Thick Sections | 紫藤,卷柏 |
Liang and Herr, 1994 | Use of theFour-and-a-Half Clearing Technique to Study Gymnosperm Embryology: Cunninghamialanceolata | 杉木 |
论文原名:Increasing seed size and quality by manipulating BIG SEEDS1 inlegume species
译名:在豆科植物中通过BIG SEEDS1基因调控提高种子大小和重量
期刊:PNAS
案例应用介绍:植物器官,如种子,是人类和动物的主要食物来源。种子大小是作物在驯化过程中所选择的主要农艺性状之一。豆类种子是膳食蛋白和油脂的主要来源。文章报道了在豆科植物中BIG SEEDS1(BS1)基因在控制种子大小和重量的作用。BS1编码一种植物特有的转录调控因子,在控制植物器官的大小方面发挥关键作用,包括种子、种子荚和叶子。重要的是,通过下调大豆BS1基因,显著增加了种子的大小、重量和氨基酸含量。研究结果为提高豆科植物的产量和种子品质提供了策略。
为了了解BS1如何控制种子大小,文章首先在野生型(WT,A17)和突变株(mtbs1-1)的豆科苜蓿种子中观察了胚胎形成过程。经过Visikol试剂对两者种子进行透明化处理后,显微成像分析清晰地显示,从早期胚胎阶段到鱼雷形胚胎阶段,mtbs1-1中的胚胎和胚乳与A17中的没有区别(图2)。结果表明BS1不影响早期胚胎的发生。这一发现与形态学观察一致,即仅在发育后期mtbs1-1突变体的种子比WT大。可见在显微成像方面,通过Visikol试剂对植物完整种子进行透明化处理,为形态学观察结果提供有力证据上起到了好的作用。
图2. 野生型(A17)和突变株(mtbs1-1)的豆科苜蓿种子中的胚胎发育:野生型(A17,图2A上排)和突变株(mtbs1-1,图2A下排)胚胎发育的显微成像结果。SC,种皮;En,胚乳:E,胚;S,胚柄;DPA,花后天数。野生型(A17)种子的球形胚期(图B左)和心形胚期(图C左);突变株(mtbs1-1)种子的球形胚期(图B右)和心形胚期(图C右)胚胎发育的显微成像结果。胚(图A-C中红色线区域)和胚乳的测量结果(图D)。
Visikol? for Plant Biology?试剂是专为植物样本设计,可替代水合氯醛,快速、易用,样本无需固定前处理,与免疫组化兼容。锘海代理的Visikol产品系列家族(见图3)覆盖了动物完整组织,3D细胞培养模型,动物胎儿(骨骼可视化)以及植物样本,快速、易用,为满足不同科研成像需求提供了有力、便捷的工具。
锘海生物科学仪器(上海)股份有限公司为您提供完整器官的组织透明化、免疫染色、3D荧光成像、数据分析科研一体化服务,旨在通过准确、快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。
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