众所周知，抗氧化剂的应用较为广泛，尤其是在化工、食品以及生命科学等领域。近些年来，抗氧化剂更是由于它可以在人体健康的问题上发挥举足轻重的作用而进一步走入大家的视线，引起更多人的注意。而在抗氧化剂的活性原理研究、表征抗氧化参数的测量、天然抗氧化剂和合成抗氧化剂的化学活性研究等方面，都广泛的应用了EPR技术。早期的研究大多数是采用了类如定性和半定量的方法对自然的抗氧化剂进行活性方面的研究，这主要是由于自然的抗氧化剂成分相对来说比较固定。但是随着研究的深度不断增加，研究者们更加在意抗氧化剂中表征抗氧化性的一些参数，而EPR技术可以很好的解决这一问题。目前被大多研究者承认的表征抗氧化剂活性的参数主要为:（1）过氧自由基从抗氧化剂中夺氢反应的难易程度。（2）夺氢反应之后抗氧化剂自由基的稳定性。EPR技术可以直接测出表征抗氧化剂抗氧化能力的很多相关参数：氢原子转移(HAT)是抗氧化剂的主要作用机理。HAT机理表明，抗氧化剂与氧化底物同氧化过程中产生的过氧自由基发生竞争反应，从而阻断了自氧化链反应的传递来达到抗氧化的作用。而EPR技术正是能够通过脂质过氧化反应的HAT抑制机理来测定抗氧化剂活性。 而在脂质的自氧化反应过程中，氢过氧化物(LOOH)是脂过氧化反应的主要产物，也是热解或催化降解产生活泼自由基的主要来源。由于其化学计量因子n与抑制速率常数kinh的测定是通过检测氧气的消耗量来求得的，所以氧气消耗量的精确测量非常重要。氧分子是顺磁性物质，在溶解状态下以三线态分子的形式存在。由于氧分子的猝灭时间较短，很难准确的检测到具体含量，而EPR技术则可以很好的解决这一问题。通过使用EPR可以直接且准确地测量溶液中氧气浓度的变化来表征氧气消耗量。天然抗氧化剂活性的研究通常都会通过EPR的定性法或半定量对照的方法，也就是直接通过EPR技术来测量自由基信号的变化，通过自由基信号可以直观看出自由基浓度，以此来得到抗氧化剂清除自由基的能力。虽然天然抗氧化剂的使用受到了国内外的广泛重视，但是近些年来相关领域的研究人员也陆陆续续地发现了一个问题，就是它们的抗氧化性能一般都不如合成抗氧化剂。考虑到天然抗氧化剂使用的局限性，长期以来，化学家一直在尝试着设计合成结构新颖而有应用前景的抗氧化剂。其中以日本东京大学的Niki领导的研究小组和以意大利Bologna大学的Pedulli、美国Vanderbilt大学的Porter和Pratt以及加拿大NRC的Ingold共同领导的国际药物化学研究小组所做的工作最为出色。而EPR波谱技术则是他们在抗氧化剂活性研究中所采用的更有效的工具和手段之一。EPR波谱技术的应用使人们对抗氧化剂的研究不断深入，目前已从简单定性地测定抗氧化剂清除自由基效率上发展到定量测定表征抗氧化剂活性的相关物理化学参数上，并在此基础上系统研究了影响抗氧化活性的取代基效应、溶剂效应以及抗氧化机理，安全高效抗氧化剂的设计与合成也已初见成果。近年来，随着量子化学的快速发展及其在化学各个领域的应用，建立在EPR测量参数基础上的理论计算成为新型抗氧化剂设计合成的有力手段。EPR是由不配对电子的磁矩发源的一种磁共振技术，可从定性和定量方面检测物质原子或分子中所含的不配对电子，并探索其周围环境的结构特性。对自由基而言，轨道磁矩几乎不起作用，总磁矩的绝大部分（99%以上）的贡献来自电子自旋，所以电子顺磁共振亦称“电子自旋共振”（ESR）。在此研究中的EPR实验结果均使用了EPR检测技术（德国Bruker ESR 5000）去证实。此外，锘海可为您提供便捷的检测服务。申请EPRdemo，请联系：13818273779或021-37827858。 ESR 5000文献原文：Antioxidant Activity Studies Using Electron Paramagnetic Resonance Methods  Cai Yu1 Wang Yongjian2 Wang Jian1 Song Chan1 Yu Ao 1＊＊ ( 1. Central Laboratory，College of Chemistry，Nankai University，Tianjin 300071，China; 2. Key Laboratory of Bioactive Materials，Ministry of Education，College of Life Sciences， Nankai University，Tianjin 300071，China)

锘海团建 —— 人生的乐趣在于勇攀高峰仲秋的季节，风中已带凉意，趁着秋风起，冬未至，来一场高峰的攀登吧！黄山归来不看岳,五岳归来不看山！是的，我们来到了黄山！秋天的黄山，不显荒凉，是更美的风景！Day 1 踏着轻快的脚步，偶遇了逍遥的松鼠（实验室的小姐姐们好想带回去做研究），第一天的我们，自后山前行，途径了始信峰，路过了黑虎松，最终以西海饭店作为当晚的驻扎地！Day 2五点多，大门口集合，向着狮子峰进发，虽然有着厚厚的云层，但朝日的余光刺破云层那一刻，还是激动万分！短暂的休憩过后，经过排云亭，走过悬崖上的峭壁，我们来到了西海大峡谷。跟着小火车，看过各种怪石后，重头戏就到了，黄山的最高峰——莲花峰！看过黄山的秀丽风景，经历了三万多步后，我们到达了今晚的营地—温泉酒店，泡去两天的疲惫，迎接明天的休闲之旅。Day3游览“画里乡村”宏村，旨在感受特色徽派建筑，双溪映碧，亭前古树。 The End三天两夜的旅程很快结束，远离都市喧嚣，赏奇松怪石、听溪流潺潺、品农家本味，尽享恬静怡悦；也加强了同事间的沟通，增进了彼此的友爱与感情，让锘海员工体会到“家”的温暖。生活不止要快乐与享受，还要工作与奋斗！人生的乐趣在于勇攀高峰！锘海的乐趣也在于勇攀行业高峰！短暂的停留过后，让我们继续上路，努力前行！

早在两年前，Tal Dvir课题组就曾在Advanced Science杂志发表重磅论文[1]，成功打印出具有生命活性的心肌贴片以及心脏类器官模型。当时Tal Dvir课题组从病人体内提取出网膜组织，将其一部分去细胞后制备内源性水凝胶，作为打印墨水的基材；将另一部分重编程（Reprogramming），使其重新分化（Differentiation）成心肌细胞和内皮细胞。搭配上述的内源性水凝胶和牺牲材料明胶，成功制备出心肌细胞和血管成型细胞两种生物墨水，并在regenHU的生物3D打印机上成功打印出心肌贴片和心脏类器官。该技术可帮助具有心脏缺陷的病人替换缺陷组织，减轻病情甚至使病人康复。图1：3D Printing of Personalized Thick andPerfusable Cardiac Patches and Hearts一文的实验思路近日，Tal Dvir课题组更进一步，又在Advanced Science杂志上发表了一篇生物3D打印心肌贴片的文章[2]。在该文章中，作者创新性地在心肌贴片上植入柔软可拉伸的电路，使得人为向心肌贴片提供电信号成为可能。为了达到该目标，作者同时使用三种不同的墨水：心肌细胞墨水、导电材料墨水和绝缘材料墨水。心肌细胞墨水与上一篇文献类似，将心肌细胞悬浮于含细胞外基质（Extracellular Matrix，ECM）的水凝胶中。导电材料墨水则是将石墨薄片（Graphite Flakes）悬浮于液态聚二甲硅氧烷（Polydimethylsiloxane，PDMS）中，石墨薄片提供导电性，PDMS则提供类似水凝胶的基材质地。绝缘材料墨水为PDMS本身。为了使疏水的PDMS与亲水的水凝胶能够更好地结合，作者在PDMS中加入了表面活性剂Span 80。 空有材料还不够，其导电性能必须达到要求。课题组为了获得较佳电导率，测试了不同浓度的石墨薄片PDMS悬浮液。由测试可知，当石墨薄片的浓度在45%时达到最高电导率，超过0.3 S/cm（图2）——这一数值尽管与铜丝仍有一定距离，但石墨薄片的可塑性使得在该文献中成为较好的选择。另外，为了适应心肌细胞收缩时带来的形变，打印出来的电路必须经受住一定次数和程度的形变。通过力学测试可获知，悬浮有石墨薄片的导电材料墨水在成型后能够达到40%以上的延展性，并且能够承受至少1000次的反复拉伸和弯曲（图3）。图2：不同石墨薄片浓度下导电墨水的电导率比较图3：a）导电墨水打印成八字试块（Dog-bone-shaped Samples）测试力学性能；b）绝缘墨水（PDMS）与导电墨水（Graphite in PDMS）的力学性能对比，绝缘墨水的延展性更好，但承受的大拉力不如导电墨水；c）1000次拉力测试中的最后10个循环的延展性和阻力值；d）1000次弯曲测试中的最后10个循环的延展性和阻力值得益于这种柔软可拉伸的电路，医护人员可以从人体外部提供适当的电信号，引导心肌细胞执行相应的功能，甚至可以通过给予脉冲式的电流，使该心肌贴片担任起搏器的功能，医生可以远程让心脏重新开始收缩。图4：带有电极的心肌贴片（比例尺：2 mm） [1] Nadav N, Assaf S, Reuven E, et al. 3D Printing of Personalized Thick and Perfusable Cardiac Patches and Hearts[J]. Advanced Science, 2019, 6, 1900344[2] Asulin M, Michael I, Shapira A, et al. One Step 3D Printing of Heart Patches with Built-In Electronics for Performance Regulation[J]. Advanced Science, 2021, 8, 2004205.REGENHU生物3D打印机具有高精度、高稳定性、打印方式广泛、应用面广等特点，欢迎大家咨询！联系电话021-37827858 或 13818273779（微信同号）。REGENHU生物3D打印机 R-GEN100 的样机已经到锘海啦！欢迎各位老师前来测样！点击以下链接，查看往期回顾生物3D打印应用 | 缓释复合成分药片生物3D打印应用 | 打印高载药量速释片剂生物3D打印应用 | 构建体外肝毒性模型生物3D器官打印——人工角膜生物3D器官打印——肠道体外模型生物3D器官打印——喉部软骨

基于透明化技术的三维重建，结合荧光标记示踪技术可直观地观察并分析不同生物组织内细胞和细胞网络地类型、位置、数量和活动的信息。但是，目前在短时间内完成对透明化组织样品的均匀染色仍是一件很困难的事情，也是国际上已经发表的透明化技术相关成果存在的共同问题。因此，如何在保护内源性荧光信号的前提下，快速完成对组织样品的免疫标记仍是迫切需要解决的技术难题。免疫标记的抗体或染料可以通过自由扩散、外界压力及电场的方式进入组织内部与目标抗原或结构相结合。通过自由扩散的方式抗体或染料抵达组织内部速度太慢，借助压力或电场虽然可以加快抗体或染料到达组织内部的速度，但是会损坏样本。Kim等人通过利用随机电泳技术可以在不损坏样本的前提下，较短时间内实现样本快速、高效和均匀染色。目前随机电泳技术已经在大样本免疫染色中得到了应用。通过利用随机电泳的方法对样本进行染色，不仅大大地缩短了染色时间，而且样本染色会比较均匀。通常一只小鼠脑利用自由抗体自由扩散的方式进行染色需要约2个星期的时间才能完成染色，而且还会出现染色不均匀的情况。而利用SmartLabel仪器进行染色仅需要2-3天的时间就可完成，且染色结果也比较均匀（见图1）。图1. （A）Horizontal sections show uniform and complete staining of the whole brain with all three probes. (Scale bar, 1 mm.) (B) Passive staining controls shows poor penetration of the probes into the tissue. (Scale bar, 1 mm.) (C and D) Three-dimensional rendering of the hippocampus region of the passively stained brain (C; 2.2 × 1.9 × 5.1 mm3 ) and stochastic electrotransport-stained brain (D; 2.2 × 1.9 × 5.0 mm3 ). (E and F) Optical sections of stochastic electrotransport-stained brain (E) and passive staining control (F) at various depths. (Scale bar, 200 μm.)虽然普通的电泳方法也可实现快速的将抗体或染料标记在样本上，但由于普通电泳电泳力的方向是同一个方向的，会存在样本变形的风险，而随机电泳技术由于样本是在电场中不断旋转的，所以对于样本而言，电场力的方向则是多方向的，样本进行免疫标记的时候则可以有效规避这种变形的风险（见图2）。图2. High electric fields required to drive molecular probes into the tissue cause noticeable damage to the tissue during electrophoresis, but not during stochastic electrotransport. Red arrow points to the deformed region. SmartLabel仪器就是利用随机电泳技术设计而成的一款可以进行快速，无损的免疫染色的一款商业产品（锘海代理）。在利用该仪器进行免疫标记的时候，样品和染色液放在一个纳米半透膜制成的样品杯中，可以有效消除组织污染和抗体及染料的损失，大大地节省了抗体和染料的用量。然后将样品杯放在有电场的样本品仓中，且样品杯在样品仓中会匀速缓慢旋转，从而保证样品所受到的电泳力是均匀的。SmartLabel仪器见图3。锘海一站式科研服务，让科研变得更简单！锘海生命科学为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。了解更多相关信息请联系 021-37827858、13818273779（微信同号）

在上一期的核酸脂质纳米粒主题文章中，我们列举了后处理的步骤及细节，其中一项关键内容——超滤除溶剂——使用的就是市面上较为常见的超滤管。但看似相同的超滤管实际上有多种规格，通常以相对分子质量（Dal或kD）来标示，如10 kD、50 kD、100 kD等。数字越大，代表了滤膜的孔径越大，截留下来的物质分子量也相应更大。在我们销售微流控仪器时，就经常会接到客户的提问：究竟多少规格的超滤管适合自己制作的核酸脂质纳米粒呢？同时，我们也发现，尽管有些客户包裹的是相似长度的核酸，使用的超滤管规格却完全不同。因此在这篇文章中，我们将通过计算来确定使用的超滤管规格。一般而言，为了保证我们需要的物质能够几乎完全被截留，选用的规格大小在目标物质的分子量的1/3甚至1/4较为合适（这是在蛋白组学、生物化学等领域的一个经验值，也可根据实际产物进行调整）。规格过大会导致大部分目标产物流失；规格过小则会导致超滤时间急剧增大，这对于在有机溶剂中不稳定的核酸脂质纳米粒而言是非常致命的。确定了规格大小和目标物质分子量之间的比例后，下一步需要确定目标物质的相对分子质量。在这里，首先需要明确相对分子质量（Mr）单位Dal与物质的摩尔质量（M）单位g/mol之间的关系。相对分子质量是该分子的质量与“一个12C原子质量的1/12”的比值；摩尔质量则是单位物质的量的物质所具有的质量——看似非常绕，但实际上两者的数值是相等的。例如胆固醇的摩尔质量为386.65 g/mol，而一个胆固醇分子的相对分子质量也为386.65 Dal，不同就是摩尔质量是一个宏观整体的概念，而相对分子质量则需要确定对象的具体情况，对于核酸而言就是要确认组成核酸的碱基数量。在氮磷比计算一文中，我们提到碱基的平均摩尔质量为330 g/mol，所以一个碱基的相对分子质量为330 Dal。假设我们的mRNA具有n个碱基，则其相对分子质量为330n Dal，如果我们希望这个值为超滤管规格的3倍，则意味着超滤管的规格不得大于110n Dal，由此我们就可以得到下方一个简单的表格。由此我们可以看到，其关系非常直接明了。在实际使用过程中，超滤管通常不会超过100 kD，因此，只要我们的核酸碱基超过909个，便可以使用100 kD的超滤管。当然，为了保险起见，也可以使用50 kD超滤管。需要注意的是，以上均以mRNA为例。如果为短链siRNA，通常在一个纳米粒中会有多个的siRNA链，因而在计算的时候要乘以相对应的数量。随着纳米技术的不断发展，纳米药物在医药领域的应用越来越广泛，尤其在疫苗的研发、基因治疗，肿瘤靶向等方面显现了不可替代的优势。锘海生物为科研工作者和企业提供全面的纳米药物制备、生产及检测服务，囊括了纳米药物研发过程中，从处方筛选到制剂表征的全线过程。为客户简化流程，节约时间成本，同时提供高质量的数据分析与技术支持服务。纳米药物制备系统应用范围了解更多纳米药物制备系统相关信息请联系021-37827858 或 13818273779（微信同号）

论坛背景：一场新冠疫情让mRNA技术突飞猛进，大有颠覆传统疫苗之势。与此同时，核酸药物获批上市的速度也呈加速趋势。由于兼具靶向特异性强、设计简单、候选靶点丰富等诸多优势，核酸药物的研发已成为全球炙手可热的领域。 NID 2021核酸药物产业发展论坛于9月23-24在苏州万怡酒店顺利召开。此次论坛集聚30+核酸药物领域明星企业与新型公司，共同探讨核心技术，分享新成果，开启产业化征程。会议日程：锘海展台：锘海提供纳米药物递送系统、生产与分析检测服务。mRNA核酸药物及疫苗研发、GMP生产整体解决方案。通过微流控芯片技术制造纳米颗粒包裹体，多种生物材料可选，可包裹药物、mRNA、siRNA、CRISPR、DNA、蛋白等。技术工程师携仪器现场展示简便的操作流程。纳米药物制备系统:应用范围:了解更多纳米药物制备系统相关信息请联系021-37827858 或 13818273779（微信同号）

锘海生物科学仪器（上海）有限公司是一家致力于“生命科学服务，医疗器械创新”的高新技术企业，卓力打造完整的生命科学研发、制造、服务生态体系。我们积极推进科学技术转化，其中，锘海LS18光片照明显微镜采用 “平铺光片技术”完美地解决了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，满足高通量、准确定位的荧光成像分析需求，广泛应用于神经科学、脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学、组织病理诊断等各个领域；在大组织3D荧光成像中，处于全球光片显微镜的家较前地位。锘海本着“一锘千金”客户至上的原则为客户提供高质量、高品质的产品和服务，并凭着锘海研发部门的潜心探索、砥志研思，自主建立了从“透明化样品制备”到“光片显微镜成像”及“3D大数据重构和分析”等多个先进的CRO技术服务平台。良好的服务态度赢得了众多科研工作者的信赖与支持，在大组织3D荧光成像领域享有极高的声誉。为感谢广大客户对锘海的支持，并鼓励大家使用国产品牌仪器发表高质量的文章，特此推出“发SCI文章，赢奖励金计划”，欢迎广大科研工作者积极参与。凡在发表文章中采用锘海平铺光片显微镜进行图像采集，并在文中标注的老师，均可参与此项活动，不限在锘海进行3D荧光成像CRO服务老师，所有已购买锘海LS18光片显微镜客户或采用此仪器进行发表的工作者均可参与此项活动。1、无影响因子及国内期刊，奖励￥300元京东卡或现金；2、影响因子 0 ，奖励￥500元京东卡或现金；3、影响因子 5≤IF＜10，奖励￥1000元京东卡或现金；4、影响因子 10≤IF＜25，奖励￥2500元京东卡或现金；5、影响因子 25≤IF＜35，奖励￥3500元京东卡或现金；6、影响因子 IF≥35，奖励￥5000元京东卡或现金；1、兑奖须知：兑奖时，请您提供电子版或扫描版已公发表的论文，并在文中显著标注 Nuohai LS18引用部分。2、在论文发表后，请及时联系我公司工作人员。3、我司将对信息进行审核（7个工作日）。4、代金券和现金发放。5、详情请致电锘海生物科学仪器（上海）有限公司咨询电话：021-37827858/13818273779(微信同号）1、此项活动需采用锘海生物自主研发的平铺光片显微镜进行数据采集和文章发表的老师。2、文章中必须明确注明如以下信息或等同信息：Nuohai LS18 light sheet microscopy（Nuohai Life Science(Shanghai)Co.,Ltd）。3、申请奖励时，需提供在线发表的文章链接和PDF全文。4、每篇文章只能申请一次奖励，由文章权利人领取和分配，多个文章权利人的，由首位权利人领取和分配。*本次活动解释权归锘海生物科学（上海）有限公司所有。

大会介绍2021年9月16-19日，中国神经科学学会第十四届全国学术会议暨第七届第二次全国会员代表大会在重庆悦来国际会议中心举行。本次会议共50个专题研讨会，302位口头报告，800篇Poster摘要，7个卫星会议，共12个会场同时召开。会议首次采用线上和线下相结合的方式，线下参会代表高达3200人；会议还得到了97家企业的大力支持。本次年会规模约2400人，线上报名超500人。锘海展台锘海作为中国神经科学学会理事单位致力于打造完整的生命科学研发、制造、服务生态体系，助力神经科学发展。在特装T3展位展示自主研发的平铺光片显微镜3D大组织高分辨快速成像效果、智能组织透明化/染色电泳仪和新研发的组织透明化试剂盒等多款产品、技术资料和服务项目。锘海技术工程师在现场展示智能透明化电泳仪操作，针对组织透明化技术进行交流，现场咨询络绎不绝，抽奖环节更是热闹又精彩！锘海产品系列：此外，锘海生命科学亦建立起一站式服务平台，为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。了解更多锘海产品相关信息请联系021-37827858、13818273779（微信同号）

自2013年CLARITY组织透明化方法诞生以来，完整生物大组织的透明、荧光标记和三维成像已成为生命科学领域一个热门的议题。许多科研工作者致力于探索和改进各种透明化方法：如3DISCO（2012）、iDISCO（2014）、PEGASOS（2018）等油性透明化方法，SeeDB（2013）、CUBIC（2014）、UbasM（2017）等水性透明化方法，PACT（2014）、SWITCH（2015）、SHIELD（2018）等基于水凝胶的透明化方法，以期获得一套全组织高分辨率（至少细胞级分辨率）成像的解决方案，专门用于探索神经、血管等大尺度结构在完整脑、心、肝、脾、肺、肾、肿瘤、骨骼中的3D定位和测量。组织透明化已经成为一种强大的技术，越来越多的实验室开始选择将其引入具体的科研项目中。由于有众多文献可供参考，因此前期的组织透明化可以从试剂原料选择到操作细节步骤都是有据可循，但是唯独到了最后透明化匹配阶段，却举步维艰：样本需要再继续透吗？这种状态样本透好了吗？透好的样本到底该是怎样的？图示情况左：换个角度看样本，还需要继续再透吗？情况中：已经走完全部流程，样本透明程度难以界定。情况右：透好后样本形态不全，透好的样本到底该是怎样的？提供透明化实验方法的文献仅仅是提供图示参考，并未有专门介绍如何判断透明化样本状态的方法或工具，因此样本经过透明化处理后，很难对其透明化程度进行准确判断，甚至需要成像完成后再反过来推测是否透明化存在问题。因此如果不借助合适的辅助工具，新手实验者在缺乏经验情况下，不仅难于判断样本透明化程度，更难去依据样本状态去优化实验条件，即使是经验丰富的实验人员，也很难做到即快速又准确。锘海新研发的透明化组织底透台（货号：NH210901，图1）是基于透明化方法研发中，为实现快速、简便、准确判断样本透明化程度（图2），可为样本透明化过程提供客观且美观的存档记录的需求出发（图3），潜心优化设计的一款用于判断样本透明化程度的底透台。该底透台可产生强度均匀的背光，为样本提供均匀一致的光照；光照强度可调，可适用于不同亮度工作环境；A4尺寸面板，可覆盖各种透明化样本尺寸；左侧大面积为带有精确刻度的方格，可方便准确判断样本大小；右侧小面积留白，可为样本内气泡定位、样本修块等提供全白背光辅助。图1. 锘海透明化组织底透台图2. 以小鼠脑为例透明化过程在底透台上的记录图3. 样本透明化前后使用底透台对比效果*注：以上透明化图片版权归锘海生命科学所有，图片盗用将追究责任。锘海透明化组织底透台首秀将在重庆·2021中国神经科学年会 （ 9 月 16 日－19 日）拉开帷幕，欢迎各位老师来T3展台一睹真容，参观试用！特惠福利：累积购买10个锘海组织透明化试剂盒（Cat#：NH210701）即可送锘海透明化组织底透台一台！了解更多锘海透明化组织底透台相关信息请联系021-37827858 或 13818273779（微信同号）

中国神经科学学会第十四届全国学术会议暨第七届第二次全国会员代表大会将于 2021 年 9 月 16 日－19 日（周四-周日），在重庆·悦来国际会议中心召开，预计参会人数 3500 人左右，主要有神经科学学会会员以及从事神经科学研究的科技工作者和研究学者参与。锘海作为中国神经科学学会理事单位将致力于打造完整的生命科学研发、制造、服务生态体系。此次年会将在特装T3展位展示智能透明化电泳仪和自主研发组织透明化试剂盒等多款产品、技术资料和服务项目。锘海技术工程师将现场展示智能透明化电泳仪操作，针对组织透明化技术进行交流，更有精美小礼物等您抽奖。     锘海自主研发LS18平铺光片显微镜可实现小鼠全脑、脊髓、骨骼、肾脏、肝脏、乳腺、胰腺、肺、肌肉及肿瘤等小动物完整器官3D结构呈现。“平铺光片技术”解决了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，满足高通量、准确定位的荧光成像分析需求，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学等各个领域。锘海LS18平铺光片显微镜智能透明化电泳仪锘海组织透明化试剂盒神经元图片来自：西湖大学高亮博士实验室此外，锘海生命科学亦建立起一站式服务平台，为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。

在我们使用微流控或其他方法合成核酸脂质纳米粒后，成品溶液常常因有机溶剂的存在而极不稳定。以常见的微流控水相、有机相合成比3:1为例，有机相溶剂常使用无水乙醇，在混合后仍然有高达25%的含量。高浓度的乙醇将逐渐破坏溶液中的纳米粒子，使其粒径逐渐增大。有的甚至能在短短数小时内由50 nm增长到200 nm，严重影响实验结果和方案评估，所以合理、及时的后处理尤为重要。通常而言，后处理等同于除溶剂，但一般也会对溶液中的纳米粒子进行粒径测定。 粒径测定通常使用动态光散射粒度仪，需要注意的是，不同品牌的粒度仪对于同一个样品的检测结果会有些许差别。另外，在检测过程中，需要注意待测液体的浓度和温度对结果造成的影响：一般而言，浓度过高的液体因散射光被大量粒子阻挡，所测出的粒径偏差较大；而温度决定了粒子布朗运动强度，溶液温度没有平衡前也会影响粒径的检测结果。除溶剂则通常采用超滤或透析。超滤为主动式，速度快；透析为被动式，速度慢。有些科研工作者可能会担心超滤的方式过于猛烈，导致纳米粒子的破坏。对于这一点其实没有必要过于担心，一方面在超滤的过程中，并不会完全将溶剂去除——通常在剩1 – 2 mL时就停止离心；另一方面超滤相对于透析更快，虽有极少量的纳米粒子破坏，却避免了有机溶剂长期留存带来的影响，两害取其轻，超滤仍旧是除溶剂的有效办法。超滤管测粒径和除溶剂的具体步骤如下：1. 完成纳米粒子的合成后（假定成品1 mL），立刻用去钙去镁的D-PBS进行40倍稀释，体积为40 mL。稀释后取0.5 – 1 mL左右进行粒径测定，剩余39 – 39.5 mL执行剩余步骤以除溶剂。2. 将剩余溶液倒入超滤管中，室温（20℃）下以2000×g的速度离心5 – 30 min，离心时间依超滤管孔径大小而有所区别，第一次尝试时可以密切关注超滤管中的液体，以剩余1 – 2 mL为停止信号。3. 取出超滤管，将下方液体倒出，在超滤管上方继续添加剩余溶液（如果步骤2没有完全倒入超滤管中的话），并用移液枪吸取管中液体冲洗滤膜数次，按步骤2的参数再次超滤。4. 重复步骤2 – 3，直至溶液全部浓缩至1 mL左右。用移液枪吸取管中液体冲洗滤膜数次后将液体全部吸出转移并在生物安全柜中过0.2 μm滤膜除菌（如不进行生物实验则无需除菌）后，即为最终品。得到最终品后，就可根据使用者的实际需求稀释成相应浓度，并进行动物或细胞实验。随着纳米技术的不断发展，纳米药物在医药领域的应用越来越广泛，尤其在疫苗的研发、基因治疗，肿瘤靶向等方面显现了不可替代的优势。锘海生物为科研工作者和企业提供全面的纳米药物制备、生产及检测服务，囊括了纳米药物研发过程中，从处方筛选到制剂表征的全线过程。为客户简化流程，节约时间成本，同时提供高质量的数据分析与技术支持服务。纳米药物制备系统应用范围：了解更多纳米药物制备系统相关信息请联系021-37827858 或 13818273779（微信同号）点击以下链接，查看往期回顾核酸脂质纳米粒（LNP）科普 —— 组成成分及作用核酸脂质纳米粒科普——氮磷比计算通过微流控技术高效、可放大的制备核酸脂质纳米粒mRNA-LNP的结构到底是怎样的？大小、结构不同的mRNA-LNP，细胞内的蛋白表达会不同吗？—— 粒径大小篇mRNA体内递送载体有哪些？NanoAssemblr制备的LNP实现对CRISPR-Cas9的高效递送

常规的组织学检查通常使用冷冻或石蜡包埋的样本切片，微米级别厚度的组织切片允许对单个细胞进行标记及表征，但却无法探知生物样本的三维特性。切片分析只对病理样本的局部进行了探测研究，整个病理组织中，有相当大部分的信息仍未被探索。随着组织透明化技术的发展与光片显微镜的诞生，我们终于可以对完整样本进行完整的成像表征。最近发表在Nature Reviews Cancer的一篇综述中[1]总结了组织透明化、成像技术及3D成像的新应用等。组织透明化方法在近十年内迅速发展，各种化合物的联合使用已被广泛用于减少光散射和光吸收，并增加光学显微镜在成像中的成像深度。虽然组织透明化最初由神经科学家用于描绘小鼠中枢和外周的神经系统，而近几年的研究表明，对于组织的三维成像也可助力发育生物学、免疫学、肿瘤学和肿瘤机理等多种学科。例如肿瘤研究中，三维荧光成像已被用于评估肿瘤迁移性、肿瘤组织结构、细胞异质性、表征肿瘤微环境和评估肿瘤模型的治疗反应等。作者首先对各种透明化方法的特点进行了比较与介绍，肿瘤因其异质性及致密的结构首先需选择适当的透明化方式。接下来，作者介绍了3D成像在肿瘤研究中的应用：1.成像并定量：2D成像无法避免因切片带来的数据缺失，3D成像则可以很直接的进行数据定量[2]；2.肿瘤结构：3D成像有助于从细胞转化、细胞骨架等肿瘤模型中进行发生、发展分析[3]；3.脉管系统：脉管系统与肿瘤进展及侵袭性相关，3D成像有助于评估抗血管生成的治疗反应[4]；此外，对完整组织的3D成像也有助于对于肿瘤的转移评估、深入探索肿瘤微环境；肿瘤侵袭、传播与耐药性相关的病理研究；3D组织病理学研究等。 参考文献：[1] Almagro J, Messal HA, Zaw Thin M, van Rheenen J, Behrens A. Tissue clearing to examine tumour complexity in three dimensions. Nat Rev Cancer. 2021 Jul 30. doi: 10.1038/s41568-021-00382-w. Epub ahead of print. PMID: 34331034.[2] Wei M, Shi L, Shen Y, Zhao Z, Guzman A, Kaufman LJ, Wei L, Min W. Volumetric chemical imaging by clearing-enhanced stimulated Raman scattering microscopy. Proc Natl Acad Sci U S A. 2019 Apr 2;116(14):6608-6617. doi: 10.1073/pnas.1813044116. Epub 2019 Mar 14. PMID: 30872474; PMCID: PMC6452712.[3] Messal HA, Alt S, Ferreira RMM, Gribben C, Wang VM, Cotoi CG, Salbreux G, Behrens A. Tissue curvature and apicobasal mechanical tension imbalance instruct cancer morphogenesis. Nature. 2019 Feb;566(7742):126-130. doi: 10.1038/s41586-019-0891-2. Epub 2019 Jan 30. PMID: 30700911; PMCID: PMC7025886.[4] Dobosz M, Ntziachristos V, Scheuer W, Strobel S. Multispectral fluorescence ultramicroscopy: three-dimensional visualization and automatic quantification of tumor morphology, drug penetration, and antiangiogenic treatment response. Neoplasia. 2014 Jan;16(1):1-13. doi: 10.1593/neo.131848. PMID: 24563615; PMCID: PMC3924547. 锘海一站式科研服务，让科研变得更简单！锘海生命科学为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。了解更多相关信息请联系 021-37827858、13818273779（微信同号）

近年来组织透明化方法发展得如火如荼，目前组织透明化方法有油性，基于水凝胶和水性的组织透明化方法。其中油性组织透明化方法主要有BABB, 3DISCO, uDISCO，FDISCO和 PEGASOS等，基于水凝胶的透明化方法有CLARITY和SHIELD，水性组织透明化方法有CLearT/CLearT2,SeeDB, FRUIT, Scale和CUBIC等方法。乱花渐欲迷人眼，面对种类如此繁多的透明化方法，我们又该如何选择呢？那么就让我们一起来看看每种透明化方法有什么优缺点吧！1. 油性组织透明化方法油性组织透明化技术主要是应用含有高折射率介质的光学透明剂取代组织中水分和脂质来平衡组织折射率，使组织达到光学透明。油性组织透明化方法具有较强的透明化效果，但是组织中的荧光蛋白容易被破坏，信号保存度低。BABB透明化方法采用梯度浓度的乙醇对生物样本进行脱水，随后用BABB试剂匹配组织的折射率。该方法是一种快速且透明性好的生物组织透明化方法，能够充分的透明胚胎和幼鼠的脑，但是乙醇脱水会导致内源性荧光蛋白淬灭，因而限制了该方法在含转基因荧光蛋白的组织样品中使用。为了解决这一问题，采用四氢呋喃代替乙醇脱水，同时应用二苄醚（DBE）替代BABB提高透明效率，开发出了基于四氢呋喃和DBE的新型透明化方法3DISCO。3DISCO能够快速透明多种器官组织，包括小鼠大脑，肺脏，肿瘤及人类胚胎等，并有效延长了荧光蛋白的表达时间。虽然3DISCO能够保护内源性荧光蛋白，但是DBE的降解产物如过氧化物或醛类物质，会对荧光蛋白产生有害干扰，使荧光蛋白信号仅能维持几天。为了更有效的保存内源性荧光蛋白，一种基于二苯醚（DPE）的透明化技术uDISCO,可以高效透明啮齿类动物及临床人类标本，有效保存荧光蛋白信号长达数月，但是对于绿色荧光蛋白表达水平较低的样品，该方法保存荧光蛋白信号的能力并不理想。a-uDISCO是在uDISCO的基础上发展出来的，通过调整PH值从而提高了样本的信号强度和稳定性。但是uDISCO和a-uDISCO对色素含量较高及硬组织的透明效果欠佳。为了提高透明效果，一种基于聚乙二醇(PEG)的新型全组织透明技术PEGASOS被开发，该方法脱钙，脱色，脱水，脱脂等优化处理，首次实现了对动物软、硬组织的同时透明化。虽然PEGASOS具有较好的透明化效果，也适用于生物体不同类型的组织。然而此类方法也存在透明试剂毒性较大，易溶解物镜结构中的粘合剂、操作步骤繁琐，组织脱水收缩等不足之处。油性组织透明化方法能够快速高效透明多种样本组织，但是油性试剂透明会导致样本皱缩，对组织结构和蛋白具有潜在的破坏性，且所使用试剂具有一定的毒性和腐蚀性，限制了油性透明化方法的广泛应用。2. 水性组织透明化方法由于油性透明化存在的诸多缺点和局限性导致水性透明化方法应运而生。水性透明化与油性透明化方法的区别在于选择的生化试剂是否有强亲水性。由于组织中荧光蛋白分子上带有亲水基团，与油性溶剂相比亲水溶剂更有利于荧光蛋白信号的保存。更适用于自带荧光的组织样本的透明化。亲水性试剂透明主要包括：单纯浸泡透明和高水化脱脂透明。浸泡型透明化技术是将样品浸泡在高折射率溶液中利用渗透压使组织逐渐透明化，该方法不去除脂质，利用高折射率溶液替换组织内外的液体，以平衡折射率，浸泡型透明化方法常适用于较小样本的透明化处理。ClearT是基于甲酰胺的浸泡型透明化方法，该方法透明速度快，成像效果好，但会使组织略微膨胀，且会使样本荧光信号淬灭。PEG可以稳定蛋白质构象，继而发展了可保留荧光蛋白的ClearT2的透明化技术，但该方法透明度比clearT低，透明化能力受限。SeeDB技术以果糖和硫代甘油为主要成分。能在几天内将样本透明化，且体积变化小，并可以与亲脂性染料兼容。但该方法因果糖黏度大导致在组织内的渗透性较低。由于SeeDB黏度极高，在SeeDB基础上衍生了FRUIT透明化方法，该方法选择尿素作为试剂中另一成分，降低了果糖黏度，大大提高试剂流动性和渗透性，加速了试剂在组织中的扩散速率。虽然浸泡型透明化操作比较简单方便，但浸泡型透明化方法不能去除脂质，因此通过该方法处理的样本透明度有限。去除样本的脂质可以显著提高透明化的效率和质量，胺基醇类和去垢剂类物质如SDS、Triton X-100可以有效去除脂类物质。水化法通过在透明化过程中去除脂质后，利用水化作用降低样本折射率进而实现组织透明化。由于尿素具有很强的水化能力，Scale透明化技术就是基于尿素水化作用的一种透明化方法，该方法可保留荧光信号，但该方法操作时间较长，且易导致组织破碎。CUBIC在Scale技术之上添加了胺基醇，可以清除血红素使组织脱色，提高透明化水平。UbasM也是一种基于尿素，葡甲胺和糖类的透明化方法，透明速度快，荧光信号保护较好且膜脂完整的一种透明化方法，可对厘米尺度的样品进行透明和三维成像。3. 水凝胶组织透明化方法去垢剂可以高效的去除样本中的脂类物质，但是高浓度的去垢剂处理样本可能会使样本发生形变。通过将样本包埋在水凝胶中，使水凝胶与样本中的蛋白质和核酸分子形成共价连接便可固定和保护细胞结构，再将样本置于透明化试剂中即可避免样本发生这种形变。CLARITY透明化方法利用凝胶包埋样本，并利用电场力去除样本的脂质从而使样本快速透明。SHIELD透明化方法通过环氧化合物P3PE固定组织实现蛋白的保护，之后使用SDS进行被动或主动除脂。油性透明化方法透明的样本透明度高，速度快，能适用于多种组织和器官。但是油性方法所使用的试剂大多毒性较强，并且容易淬灭内源性荧光蛋白的信号，不能和细胞膜上亲脂染料相兼容，样本会有明显收缩，组织或器官内部精确三维结构丢失。水性透明化方法虽然可以部分解决荧光蛋白易淬灭的问题，但是也存在透明时间长，透明能力低的缺点。水凝胶透明化方法操作过程复杂，且需要一定的设备。面对种类如此繁多的透明化方法，我们该如何进行选择呢？锘海研发的透明化试剂盒（点击链接查看详情）依托测样服务中积累到的丰富而宝贵的经验，对各种透明化方法进行测试和比较后对试剂配方进行了精心优化，使其在组织荧光保护、样本形态维持、降低自发荧光等方面表现出非常优异的性能。能够轻松实现小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、睾丸、淋巴、胎盘、卵巢等各类组织器官的透明化，适用范围广、操作简便、速度快、效率高，是广大科研工作者的不二之选。锘海一站式科研服务，让科研变得更简单！锘海生命科学为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过、快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。

新冠疫情爆发后，mRNA相关技术获得了快速突破，多款mRNA新冠疫苗上市并展现出了相较于其他传统疫苗更高的保护率，使其逐渐成为研究宠儿。在mRNA疫苗中，一个核心要素就是构建一个mRNA的递送载体，而目前多通过脂质纳米粒（Lipidnanoparticle，LNP）来达到这一目的。而LNP之所以可以作为递送mRNA的载体，首要原因就是得益于构建LNP时所使用的阳离子磷脂或可电离磷脂。因为在组装过程下，阳离子磷脂或可电离磷脂中带正电的头部基团可以与带负电的RNA磷酸骨干相互作用，通过静电吸附达到包载的目的。那么各种不同的阳离子磷脂其结构上又有什么相似和不同之处呢，今天小编就带大家了解一下。早在1987年，研究者们就合成出了一种用于体外基因递送的阳离子磷脂DOTMA，用其制成的脂质体递送质粒DNA，包封率可达将近99.99%。后续大家熟悉的Lipofection体外转染试剂就是在此基础上构建的。图1中即为DOTMA的组成结构，可以看到其主要是由一个阳离子或可电离的头部基团、连接基团及疏水尾部组成。而且我们也可以根据3个组成基团的不同来区分不同的阳离子磷脂衍生物。图1. 阳离子磷脂DOTMA的化学结构和相关磷脂衍生物的结构组成首先，不同的疏水尾部结构可以影响磷脂的pKa值、亲脂性、相转变温度等，胆固醇衍生物或碳氢化合物链，甚至生育酚衍生物都可以作为脂类的疏水部分。烃尾一般在8~18个碳单元之间，可具有不同的不饱和度，同时没有对称性的要求。而且在某些配方中加入不饱和脂肪酸作为脂尾可以提高输送效率，这可能是由于它们的转变温度较低以及它们对提高膜流动性的影响。而常用的连接基团包括醚和酯、磷酸盐或膦酸酯连接基团、甘油型基团或多肽。氨基甲酸酯和酰胺也经常被用作连接基团，因为它们都是化学稳定和可生物降解的。酯和醚是化学稳定的可选连接基团。连接基团是可调节的，因为它们足够稳定，具有较高的循环稳定性，但可以在目标位点迅速降解，以促进RNA有效载荷的释放。而最主要的头部基团则可以是季铵盐、胍基、咪唑鎓盐、吡啶盐等结构组成的阳离子磷脂，或是由伯胺和仲胺磷脂、叔胺基磷脂等组成的可电离磷脂，亦或是可由阳离子和阴离子基团共价连接组成的两性离子脂质。随着研究的不断发展，越来越多的阳离子磷脂或可电离磷脂不断涌现，不断改善其在RNA递送上的各种问题，未来随着mRNA疫苗等相关技术的进一步普及，相信也会有更多的磷脂种类供研究者们选择。参考文献：1. Felgner, P. L., et al. Lipofection: a Highly Efficient, Lipid-Mediated DNA-Transfection Procedure. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1987, 84, 7413−7417.2. Yuebao Zhang., et al. Lipids and Lipid Derivatives for RNA Delivery. Chem. Rev. https://doi.org/10.1021/acs.chemrev.1c002443. Mahato, R. I. Water Insoluble and Soluble Lipids for Gene Delivery. Adv. Drug Delivery Rev. 2005, 57, 699−712.纳米药物制备系统应用范围：了解更多信息请联系021-37827858或13818273779点击以下链接，查看往期回顾mRNA-LNP的结构到底是怎样的？核酸脂质纳米粒（LNP）科普 —— 组成成分及作用核酸脂质纳米粒科普——氮磷比计算通过微流控技术高效、可放大的制备核酸脂质纳米粒大小、结构不同的mRNA-LNP，细胞内的蛋白表达会不同吗？—— 粒径大小篇mRNA体内递送载体有哪些？NanoAssemblr制备的LNP实现对CRISPR-Cas9的高效递送

众所周知，脊柱是身体的支柱，那么你了解脊柱具体由哪些结构组成吗？脊柱与脊髓之间又有什么关联呢？下面就跟着小编一起遨游知识的海洋吧！ 一．脊柱的结构与功能脊柱分颈椎、胸椎和腰椎，颈椎有生理前曲，胸椎后曲，腰椎前曲。简单来说，脊柱从侧位看，呈S状，此形状可以很好地吸收人体走路、跑跳带来的冲击和震荡。图1 脊柱结构图脊柱由脊椎骨及椎间盘构成，是一相当柔软又能活动的结构。随着身体的运动载荷，脊柱的形状可有相当大的改变。脊柱的活动取决于椎间盘的完整，相关脊椎骨关节突间的和谐。脊柱具有支持躯干、保护内脏、保护脊髓和进行运动的功能。 脊柱内部自上而下形成一条纵行的脊管，内有脊髓。二．脊髓的结构与功能脊髓(Madulla spinalis)是中枢神经的低级部分，由胚胎时期神经管的后部发育而成，仍保持节段性。脊髓发出脊神经分布于躯干和四肢，是躯干和四肢的初级反射中枢；内含许多上、下行传导束，与脑部各级中枢有着广泛的联系，是联系躯体和脑部的枢纽，在正常情况下，脊髓的活动总是在脑的控制下进行的。脊髓位于脊柱的椎管内，上端与脑相连，下端与第一腰椎下缘平齐。脊髓是脑与躯体、内脏之间的联系通道。(1)脊髓的结构从脊髓的横切面可以看出，脊髓包括灰质和白质两部分。灰质在中央，呈蝶形;白质在灰质的周围。白质内的神经纤维在脊髓各部分之问以及脊髓和脑之间，起着联系作用。图2 脊髓结构图(2)脊髓的功能反射功能：人的脊髓灰质里有许多低级中枢，可以完成一些基本的反射活动，如膝跳反射、排便反射等。但是，脊髓里的神经中枢是受大脑控制的。传导功能：脊髓能对外界或体内的刺激产生有规律的反应，还能将这些刺激的反应传导到大脑。反之，脑的活动也要通过脊髓才能传递到身体各部位。因此脊髓是脑与躯干、内脏之间联系的通道。三．平铺光片显微镜下的脊柱连脊髓样本3D重构LS18光片显微镜不仅可以对脑，心，肝，脾，肺，肾，卵巢等软的小组织样本进行成像，它同样可以对超过2cm的超长样本组织进行成像，如脑连脊髓，小鼠骨架，小鼠小肠，小鼠长脊柱等等。如下图3所示，为小鼠的脊柱样本血管成像3D重构结果。该脊柱整体长约6cm，成像分辨率为横向3.3µm，纵向7µm，整个样本成像时长约7小时。 图 3 小鼠长脊柱血管整体3D重构图4 局部细节展示（XY面层切）图5 局部细节展示（XZ面层切）锘海生命科学不仅自主研发出专门对大样本组织成像的平铺光片显微镜，同时还依托于显微镜测样服务工作积累了丰富的组织透明化、组织免疫荧光染色及成像经验，甚至我们的工程师还精心优化了透明化样本制备配方，自主研发出快速高效的锘海组织透明化试剂盒，如图6所示，它可适用于不同的样本组织类型，大大提高样本组织透明化的效率，从更专业的角度为广大科研工作者制定一套完整的服务解决方案，助力每一位生命科学工作者完成使命！锘海生命科学，助力科研人真正地回归科学！图6 锘海组织透明化试剂盒锘海一站式科研服务——让科研变得更简单锘海生命科学为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。了解更多锘海LS18平铺光片显微镜相关信息请联系 021-37827858、13818273779（微信同号）

近几十年来，随着医疗条件的提升、人均预期寿命增加，许多因身体条件变差而逐渐产生的“老年病”变得越来越常见。许多老年患者每天可能都需要服用多种药物，且药片的体积对于老年人而言不易吞咽。在2020年11月的推文《生物3D打印应用 | 打印高载药量速释片剂》中，我们介绍了Clive J. Roverts课题组如何使用生物3D打印提升载药量，从而减少药片体积，使其更易于吞咽。今天，我们将侧重于另一个方面，即如何克服同时服用多种药物的难题。口服药片是所有药物当中最为常见也是最为方便的一种剂型。但口服药片往往通过批量生产完成，所以难以根据患者进行定制（与之相反，注射剂往往根据医生的处方由护士在现场进行配制，具有一定程度的灵活性，但需要定点给药、扎破皮肤，所以便利性不如口服药片）。因此，如果能将多种药物整合到一粒药片中，将大大减少服药患者的压力。针对该问题，依然是Clive J. Roverts课题组，使用regenHU生物3D打印机技术，成功打印出复合活性成分片剂。这些活性成分并不是简单地混合在一起被压制成片剂，而是各自具有一个“舱室”，通过调整舱室外壁和药物本身的性质，就可以分别控制各个成分的释放速率。在文中，这项技术被称为聚合药片（Polypill）。通过3D打印技术制作这种新型的聚合药片，就可以实现真正的“个性化给药”。图1：聚合药片的结构、作用示意图在文中，作者使用硝苯地平（一种常见的降血压药物）、卡托普利（在文中作为降血压药物）、格列吡嗪（II型糖尿病降血糖药物）阐述“聚合药片”的设计。如图1所示，卡托普利在打印过程中被多孔膜材料包裹，服用后将以渗透的方式释放药物；硝苯地平与格列吡嗪则三边被包裹多孔膜包裹，另一面暴露在外，服用后将以溶出的方式释放药物。两层之间是顺滑的粘性材料，服用后将被溶解，使两层分离。两种释放方式均有缓释效应，因而三种药物在实验过程中，释放半衰期几乎都在14 h以上。图2：聚合药片成品图获得成品（图2）后，作者分别进行了扫描电镜、药物释放动力学等表征或检测。扫描电镜展示了多孔膜在溶出前后的变化（图3）；药物释放动力学的模型匹配显示以渗透方式释放的卡托普利为零级反应，以溶出方式释放的硝苯地平与格列吡嗪则为一级反应。另外，课题组通过重量成分均一度检测3D打印方式是否能够保证批次内药片质量的稳定；通过红外光谱检测各舱室的成分，保证不同舱室间没有发生“污染”。图3：药片中的多孔膜在溶出前（上两图）和后（下两图）的表面SEM图像 文章中对于复合成分药片的制作方法无疑具有较大的积极作用。目前，如果一位老年患者同时患有高血压和糖尿病，可能不得不分别服用这三种药物。一天多次的频率、每次五六颗的药量都会让老年患者感到严重不适。但如果该聚合药片得以成熟商业化，患者的服药压力将会大大降低。 参考文献[1] Khaled S A, Burley J C, Alexander M R, et al. 3D printing of tablets containing multiple drugs with defined release profiles[J]. International Journal of Pharmaceutics, 2015, 494(2): 643-650.REGENHU生物3D打印机具有高精度、高稳定性、打印方式广泛、应用面广等特点，欢迎大家咨询！联系电话021-37827858 或 13818273779（微信同号）。点击以下链接，查看往期回顾生物3D打印应用 | 打印高载药量速释片剂生物3D打印应用 | 构建体外肝毒性模型生物3D器官打印——人工角膜生物3D器官打印——肠道体外模型生物3D器官打印——喉部软骨

2021年7月5日，锘海LS18平铺光片显微镜技术应用及智能透明化电泳仪演示报告在国家蛋白质科学中心顺利举行。随着组织透明化技术和光片荧光显微镜的日新月异，科研工作者可以对结构复杂、高度异质性的生物样本进行三维成像，并通过搜索和分析荧光信号深入探索生理、病理功能以及机制。本次讲座由锘海生命科学工程师就组织透明化技术及3D光片荧光显微镜成像技术做现场报告，随后对智能透明化电泳仪做设备演示。 报告会现场左：小鼠肝脏脱脂后，右：小鼠整脑脱脂后小鼠整脑透明化小鼠心脏透明化最后，特别感谢国家蛋白质科学中心与锘海生命科学联合举办本次现场报告会！我们欢迎更多有科研服务需求的老师与锘海开展业务合作及交流。锘海LS18平铺光片显微镜简介：锘海LS18平铺光片显微镜是一款为透明化大组织样品设计的高分辨率3D成像仪器。锘海LS18平铺光片显微镜采用自主研发的动态虚拟光片平铺技术，克服了传统光片显微镜3D空间分辨率、Z轴层析能力和成像视野之间的矛盾，摒弃了原有选择性平面照明显微镜中的单光片照明的方式，利用多个薄的光片分段照明，在不损失成像视野的情况下，获得高分辨率的3D图像。锘海LS18平铺光片显微镜具有高速高分辨率成像、成像模式灵活可调，多色同时成像等优势。锘海LS18平铺光片显微镜致力于实现透明化后脑、心、肝、脾、肺、肾、小肠、乳腺、脊柱/脊髓、胸椎、肿瘤等多种完整组织器官的3D高分辨率成像。适用于各种不同类型透明化方法处理的样品，（水性透明化方法如Scale、SeeDB、CLARITY、CUBIC、SWITCH、SHIELD等，油性透明化方法如BABB、3DISCO、iDISCO、uDISCO、PEGASOS等），可得到高分辨率、高信噪比的多色荧光3D图像，能够快速定位宏观样品中的目标细胞，获得高分辨率的3D细胞微结构。智能透明化电泳仪SmartClear 简介：智能透明化电泳仪SmartClear 采用不同的电泳设计，在快速去脂的过程中大限度的保护样品蛋白。根据不同的实验需求，可定制化提供不同的样品台，电压、电流、温度，电场旋转速度等多种实验条件可调，使实验者获得好的实验条件。产品优势：专利设计一键式简易操作，高效组织透明化保护组织结构以及荧光信号完整适用于对完整大脑进行神经解剖学、神经退行性疾病等方面的研究同时也适用于心、肝、脾、肺、肾、卵巢、肿瘤等多种组织器官的透明化应用范围：生物软组织样本（如：脑、肝、脾、心脏等器官）转为澄清透明状态，并维持组织整的细胞结构和分子组成。开启完整无损的全脑神经网络3D图像，包括精细回路和分子连接。智能荧光标记电泳仪SmartLabel简介：SmartLabel智能荧光标记电泳仪采用不同的电泳设计和薄膜设计，在染色的过程中大限度的保护样品蛋白，实现完整组织和器官的均匀标记。充分利用荧光探针，减少浪费，降低非特异性标记。使实验者获得好的标记结果。 产品特点：快速：与被动标记相比，标记大型样本（例如啮齿类动物器官）快一个数量级（≤24小时vs.数周至数月）；简便：只需要加载缓冲液、样品和探针。借助双室设计，可以同时执行2个不同样本的标记实验；高校：使用少量抗体（低至~3ug）即可标记整个小鼠大脑尺寸的组织；可靠：采用随机电泳技术防止组织损伤，纳米多孔膜防止组织污染和探针损耗。

几十年来，组织学检测技术一直是病理诊断和生物医学研究的金标准，但传统基于2D组织切片获取图像信息的方式仅能帮助我们“管中窥豹，可见一斑”，不但无法获取全局完整组织信息反映样品内生物信息全貌，甚至可能与关键信息失之交臂。正所谓差之毫厘，谬以千里。更重要的是生物组织固有的三维属性使得生命科学的研究日益依赖于空间信息的完整解读：如脑部神经投射、血管分布以及肿瘤微环境研究等，均需围绕三维空间信息才能得以进行客观分析及后续研究。所以，拥有便捷可靠的3D信息获取途径是如今生命科学解码研究的关键所在。近年来，光片显微技术以高效的三维成像特性，被应用于脑科学、肿瘤学、免疫学、药物研发、组织病理诊断等各个领域。但是生物组织的不均匀性，如各层组织中含有的水、脂质和蛋白质等各种分子造成光散射，以及细胞中的各类色素成分造成的光吸收，不仅限制了成像深度而且大大降低了图像对比度，想要对组织进行三维成像仍是个很大的挑战。因此组织透明化技术是开启当今光学切片显微镜全部潜能的关键！自2013年CLARITY入选Science杂志的“十大突破”之一技术以来，不断涌现出各种透明化方法，几乎相当于将一个世纪前的组织透明化技术进行了重新发明，形成了以“水性透明化方法”、“油性透明化方法”以及“基于水凝胶透明化方法”的“三足鼎立“之势。相对而言，基于有机溶剂的方法，尽管透明化程度佳、效率高，但是荧光信号的兼容度有限；基于水溶性试剂的方法，虽然亲水性环境对荧光蛋白友好，但是透明化效率及程度有限；而基于水凝胶的方法，对蛋白质、核酸保护效果好，但是有些需要辅助设备（相应主动式方法速度快），所用配套的商业试剂相对昂贵、对操作有一定要求。Pubmed实时搜索组织透明化引文结果由于各种透明化方法均有其特点，因此研究人员需要根据自己的研究目的和实验方案选择最合适的透明化方法，以便得到较佳的实验结果。但是实际操作中，往往是在没有尝试并比较过几种透明化方法以前，是很难确定哪一种最合适，而且很多情况下仅仅因为试剂原料、溶液配制、浓度设置、pH调整等微小细节上，难以重复或无法重复文献中的惊艳效果，因而无法说是否可以“遇上“最合适的方法。锘海新研发的透明化试剂盒是基于各种透明化方法测试和比较后，以及依托测样服务中积累到的丰富而宝贵的经验，经过精心优化的配方，可以穿透细胞而不损伤自身及蛋白质结构，高效地进行脱色脱脂，采用亲水性温和环境的设计，使其在组织荧光保护、样本形态维持、降低自发荧光等方面表现出非常优异的性能，轻松实现小鼠脑、心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、睾丸、淋巴、胎盘、卵巢等各类组织器官的透明化，适用范围广、操作简便、速度快、效率高，是广大科研工作者的较佳选择.                                                                          锘海透明化试剂盒                                                        以小鼠脑为例透明化过程透明化效果展示成像结果展示（采集自锘海LS18平铺光片显微镜）注：以上透明化和成像图片版权归锘海生命科学所有，图片盗用将追究责任。锘海生命科学，为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。了解更多锘海组织透明化试剂盒相关信息请联系021-37827858、13818273779（微信同号）

在一些生物光学成像中，为了使特定器官或组织形成能够分辨的图像，往往会使用造影剂（Contrast Agent）。然而一般的造影剂在病灶部位聚集相对较少，反而在网状内皮系统（Reticuloendothelial System，RES，如肝脏、脾脏等）大量聚集，使成像存在较高的背景噪音，成像效果大打折扣甚至会影响诊断的结果。通过纳米粒子的高渗透长滞留效应（Enhanced Permeability and Retention，EPR）和体内组装虽然能够一定程度上提升造影剂在肿瘤、炎症部位的聚集，但网状内皮系统中的浓度仍然较高。在此背景下，Zhao等人创新性地使用镧系元素上转移纳米粒子与近红外二区（NIR-II）纳米探针两者在体内的可控组装与分解，在提高信噪比的同时，延长了其在肿瘤部位的滞留时间。为手术的实时成像提供更为清晰、可靠的方案。该造影剂由两部分组成：1、β-环糊精（β-CD）修饰的下转移纳米探针（DCNP@β-CD），能够在808 nm的近红外激发光照射下，产生1060 nm的近红外二区（NIR-II）荧光，进行生物成像；2、偶氮苯修饰的镧系上转移纳米粒子（UCNP@Azo），能够在980 nm的近红外激发光照射下，产生365 nm的紫外发射光，使得修饰的偶氮苯发生异构化，由较为稳定的反式（trans-isomer）转变为能量较高的顺式（cis-isomer）。当UCNP@Azo 以反式存在时，能够与DCNP@β-CD组装，形成平均粒径达485 nm的纳米簇；而当UCNP@Azo 以顺式存在时，无法与DCNP@β-CD形成稳定结合，荧光强度大大降低。图1：UCNP@Azo与DCNP@β-CD的组装（左）与分解（右）示意图在实际使用过程中，作者发现相对于将UCNP@Azo与DCNP@β-CD同时注射，先注射UCNP@Azo，过一段时间后再注射DCNP@β-CD得到的荧光强度更高。做系统性对比后得出结论，间隔时间为10 h时，荧光强度达到更大。图2：在注射UCNP@Azo后10 h再注射DCNP@β-CD与同时注射两种试剂得到的a）荧光强度对比；b）信噪比对比同时，可以对作为背景的器官以980 nm的红外光进行照射，降低该器官内的荧光强度，从而提高信噪比。在文章中，作者也对何时照射980 nm近红外光进行了考察。以注射第二种制剂（DCNP@β-CD）为时间原点，在固定两种制剂的注射间隔为10 h后，分别在不同时间点，甚至多个时间点和注射间隔期内进行980 nm的红外光照射，发现在注射=一剂（UCNP@Azo）后9 h时进行照射，将大程度提高信噪比。图3：UCNP@Azo与DCNP@β-CD实际操作方式：注射UCNP@Azo、注射DCNP@β-CD并用980 nm近红外光对作为背景的器官或组织进行照射、用808 nm近红外光成像图4：以注射第二种制剂（DCNP@β-CD）为时间原点，在固定两种制剂的注射间隔为10 h后，于不同时间点进行980 nm近红外光照射得到的背景强度对比在文章的最后，作者也描述了两种成分的组合将延长在机体内的滞留时间，使得能够进行手术的高信噪比窗口达到了6 h。这无疑为手术成像提供了更多潜力，相信在不久的将来，这项技术能够用于增强生物成像、治疗或其他需要在肿瘤部位聚集大量造影剂的应用领域。参考文献：[1] Zhao M, Li B, Wang P, et al. Supramolecularly Engineered NIR‐II and Upconversion Nanoparticles In Vivo Assembly and Disassembly to Improve Bioimaging[J]. Advanced Materials, 2018, 30(52):1804982.锘海 SWIR 1.0 近红外二区活体荧光成像系统采用低噪声和高灵敏度的进口InGaAs CCD，结合动物气体麻醉装置及便捷的操作界面，实现实时荧光信号成像。通过镜头切换，可分别完成宽场和局部放大成像，具有非常高的荧光信号采集能力。超高帧频不仅可以实现单幅图片采集，更可以完成视频拍摄，帮助您捕获整个实验过程。锘海-近红外二区小动物活体成像系统点击以下链接，查看往期回顾近红外二区小动物活体成像 —— 呼吸速率监控近红外二区小动物活体成像 —— 稀土纳米颗粒协助肿瘤切除手术

2021年7月12日至7月18日，由清华大学生物医学测试中心、清华大学结构生物学创新中心和清华大学-北京大学生命科学联合中心联合主办，为期7天的“第四届显微成像基础与应用暑期研讨会”圆满结束。此次研讨会主要面向清华大学及其他高校院所、企事业单位的科研人员、研究生和平台技术人员。研讨会邀请清华大学及校外相关领域的知名专家做技术讲座，并安排上机演示及实操、显微镜拆解及组装的讲解与实训活动。锘海应邀参加此次研讨会，并带来了锘海LS18平铺光片显微镜样机，及平铺光片显微镜及组织透明化应用讲座。锘海LS18平铺光片显微镜样机于清华大学生物技术馆2307安装测试完成，欢迎各位老师前来参观、测试！会议日程Day 1 (Monday, 2021/07/12)11:30-12:00AM 翟星帏 锘海生物科学仪器(上海)有限公司锘海LS18平铺光片显微镜及CLARITY组织透明化、荧光染色标记新应用Day 6 (Saturday, 2021/07/17)8:30AM-11:30AM 高亮 西湖大学生命科学学院Lightsheet microscopeBig data processingDay 7 (Sunday, 2021/07/18)8:30AM-11:30AM 上机实操上机内容：Transparent sample preparation, Lightsheet microscope, Imaris Image Processing上机设备：2307：锘海-LS18平铺光片显微镜现场回顾成像案例：1）小鼠全脑毛细血管染色成像小鼠全脑毛细血管染色成像 横断面（XY面）100um投射（左），冠状面（XZ面）100um投射（右） 高分辨率下100um投射（voxel size: 500nm*500nm*1.5um）（2）小鼠肾脏血管染色成像小鼠肾脏血管染色成像局部高倍成像层切面（3）小鼠肺的神经结构成像小鼠肺的神经结构成像300um截面神经结构提取（上），层切面神经追踪（下）。

REGENHU凭借其杰出的创新设计与优质的产品，获得了两大设计奖项——iF和Red Dot。锘海作为REGENHU的合作伙伴，愿一同分享这一荣耀喜讯！这体现了REGENHU致力于为客户提供高质量和高性能设备的又一重要决心和目标。R-GEN 100及200系列生物3D打印机整合了14年的生物打印技术，并融合专业知识、用户反馈和市场需求。充分将以客户为导向的思路蕴含在产品及设计理念当中，帮助客户实现其目前的生物研究目标和未来的生物制造和生产目标。屡获殊荣的REGENHU前沿生物打印机平台通过不断设定新标准以实现医学迭代。提供新的方法和解决方案，协助个性化药物、生物墨水制剂、人体组织以及3D细胞模型的开发，促进生物医学研究、再生医学及药物研发领域进步。 带着这样的目标，在获此殊荣的同时，REGENHU也将持续在众多新兴领域为客户提供优质和创新的产品。凭借杰出的生物打印解决方案，使用户能够实现他们在组织工程、药物开发的3D细胞模型或再生医学的人体组织等方面的目标和抱负。带着以客户为中心的理念和远见卓识，提供全面、高性能的生物打印平台。 与用户一起，塑造医学的今天与未来！REGENHU生物3D打印机具有高精度、高稳定性、打印方式广泛、应用面广等特点，欢迎大家咨询！联系电话021-37827858 或 13818273779（微信同号）。点击以下链接，查看往期回顾生物3D打印应用 | 构建体外肝毒性模型生物3D器官打印——人工角膜生物3D器官打印——肠道体外模型生物3D器官打印——喉部软骨

mRNA-LNP无疑是近两年较为火热的研究热点，随着新冠疫情的不断肆虐，几款采用了mRNA-LNP的新冠疫苗陆续上市，使人们对这一具有广泛应用前景的技术愈发重视。那么对于一个制备良好的mRNA-LNP，其内部分子组成结构到底是怎样的呢？今天小编就通过相关研究带大家一起探索其组成结构。首先，目前普遍采用的mRNA-LNP处方多是通过由阳离子磷脂、DSPC（二硬脂酰磷脂酰胆碱）、胆固醇、DMPE-PEG2000（磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000）构建的LNP来实现对mRNA分子的包载。几种磷脂分子发挥各自的功效将mRNA分子包裹在内部形成一个球形的脂质纳米粒，而且通过处方的调整，也可以实现粒径大小不同的LNP制备，详见图1电镜图。图1. LNP的冷冻透射电镜图，a、b、c分别为粒径大小在48nm、64nm、100nm左右的LNP随后采用小角中子散射技术来进一步研究LNP上的磷脂分子分布情况，利用氘化的DSPC和胆固醇进行LNP的制备，并分别在不同比例下的D2O/H2O缓冲液中检测其散射信号。结果如图2A，散射信号只在缓冲液中D2O较低时检测到，即在q ∼ 1 nm−1处有一明显的峰。而DSPC的散射长度密度（SLD）和其他磷脂材料有较大的区别，这些散射曲线都与之前报道过的核-壳结构体系的小角散射的结果相似，而且图中的数据拟合与一核两层壳的结构最为吻合。图2B中的散射长度密度数据则可代表LNP外壳到中心的距离，图2C则是根据散射结果分析后得到的LNP结构的模型示意图。在此模型中，我们认为LNP的核由阳离子磷脂、胆固醇、mRNA和水组成，在此核的外部是一层2.4 nm厚的由DSPC，少部分的阳离子磷脂、胆固醇以及PEG磷脂中的DMPE端组成的单层壳。再向外则是一层约4 nm厚的PEG磷脂壳。图2. (A)不同D2O含量下的LNP小角中子散射结果，从上至下分别为18%、27%、50%、68%、100%的D2O。(B) SLD曲线作为LNP中心距离的函数，与A中数据的拟合相对应。(C) 根据SLD数据描绘的LNP中脂质分布示意图同时，根据LNP主要成分的SLD数据，详见表1，可以详细验证LNP系统的组成。溶剂的SLD由H2O/D2O的比例给出，PEG层的SLD随着它延伸到溶剂中而变化。在LNP中，内核的SLD是恒定的，但随着D2O含量的变化而变化。mRNA的SLD也随着D2O体积分数的增加而增加，因为它含有可以交换为氘的不稳定氢。利用拟合的内核SLD值作为D2O含量的函数，以及LNP组分已知的SLD值(表1)与建立的脂质:mRNA摩尔比，根据以下公式可以计算LNP中的水含量。其中V是各成分的体积分数。VDLin-MC3-DMA · SLDDLin-MC3-DMA + VChol · SLDChol+ VH2O · SLDH2O +VRNA · SLDRNA =SLDcore脂质单层的SLD不依赖于溶剂而保持恒定，这证实了如预期的那样，该层中没有溶剂存在。由阳离子磷脂（DLin-MC3-DMA）、DSPC、胆固醇、PEG磷脂中的DMPE段包裹在核心外。目前这一mRNA-LNP的结构也是目前比较公认的一种结构，但是通过相关研究可以进一步为我们提供强有力的科研依据。几种脂质成分不是均匀的随意分布在LNP上的，其结构信息也会给研究者们提供更多的灵感，以帮助他们设计研发更加合理有效的mRNA-LNP出来。参考文献：1. Zackrisson M, et al. (2005) Small-angle neutron scattering on a core-shell colloidal system: A contrast-variation study. Langmuir 21:10835–108452. Belliveau NM, et al. (2012) Microfluidic synthesis of highly potent limit-size lipid nanoparticles for in vivo delivery of siRNA. Mol Ther Nucleic Acids 1:e37.3. Marianna YA, et al.（2018）Successful reprogramming of cellular protein production through mRNA delivered by functionalized lipid nanoparticles. PNAS 115: E3351–E3360纳米药物制备系统应用范围：点击以下链接，查看往期回顾核酸脂质纳米粒科普——氮磷比计算通过微流控技术高效、可放大的制备核酸脂质纳米粒大小、结构不同的mRNA-LNP，细胞内的蛋白表达会不同吗？—— 粒径大小篇mRNA体内递送载体有哪些？NanoAssemblr制备的LNP实现对CRISPR-Cas9的高效递送核酸脂质纳米粒（LNP）科普 —— 组成成分及作用

会议背景：中国神经科学学会神经内稳态和内分泌分会成立于2008年。现任主任委员为大连医科大学李韶教授。为提高科研水平，促进相关研究的发展和人才培养，年会邀请到国际、国内知名的专家围绕“神经内稳态和内分泌及药物干预靶点”主题，以线下为主、线上为辅的方式进行交流。共同探讨该领域的未来发展趋势和感兴趣的科学问题，以相互学习、共同提高、增进友谊、促进相关学科交叉融合繁荣发展。现场回顾：会议日程：锘海LS18平铺光片显微镜技术：如cell reports: 适用于透明组织成像的多功能平铺光片显微镜文章所述，平铺光片显微镜不仅可以提高样本成像的空间分辨率及成像效率，还可通过更换不同NA的检测物镜，放大倍数，调整激发光片实现对厘米级的组织样本进行多分辨率级别快速成像。下面就请跟着小编一起来看看锘海LS18平铺光片显微镜在不同的分辨率下分别能看到哪些结构吧！（1）小鼠全脑毛细血管染色成像如图1所示，为LS18平铺光片显微镜对染色的小鼠脑进行3小时成像获取的整脑血管网络。该成像结果展示了能识别到的几乎所有的毛细血管，该成像分辨率为横向3.3um，纵向7um。图1. 小鼠全脑毛细血管染色成像如图2 所示，分别从该小鼠脑的横断面和冠状面提取的100um局部投射结果，提取局部100um子区域，由此可见，采用平铺光片显微镜在微米级空间分辨率下对3D组织进行成像，其成像结果近乎各向同性！图2. 横断面（XY面）100um投射（左），冠状面（XZ面）100um投射（右）为观察到更细微的组织结构，我们将平铺光片显微镜的检测路径放大倍数提升至12.6X，此时成像的voxel size 为500nm*500nm*1.5um，如图3所示，从该成像结果我们可以观察到每一根毛细血管之间的相互连接关系，方便后续进一步分析不同功能性脑区之间血管之间的相互关系。图3. 高分辨率下100um投射（voxel size: 500nm*500nm*1.5um）（2）小鼠肾脏血管染色成像平铺光片技术为科研工作者对完整组织器官成像及局部高分辨成像需求提供了完美捷径！如图4所示，LS18光片显微镜呈现对血管染色的小鼠肾脏进行整体快速成像，局部高分辨率成像，如图5所示，整个成像过程在3小时内完成。图4. 小鼠肾脏血管染色成像图5. 局部高倍成像层切面（3）小鼠肺的神经结构成像2019年突如其来的新冠肺炎疫情迅速蔓延全国，学术界工作者们快速响应，追逐溯源，研究机理，到临床疫苗研发，在国家资本及学术热情的支持下，科研成果呈井喷式爆发，LS18光片显微镜也努力为取得进一步科研成果贡献自己的一份力量！图6 展示了小鼠肺的神经结构成像，可以辅助科研工作者了解肺当中的神经与各气管之间相互关系。如图7所示，科研工作者可根据自己感兴趣的部位进行结构提取，或是从层切面对单根神经进行逐条追踪。图6. 小鼠肺的神经结构成像图7.  300um截面神经结构提取（上），层切面神经追踪（下）。结论综上所述， LS18光片显微镜对厘米级的透明化样本组织可进行不同分辨率级别快速成像，快速满足科研工作者的成像需求。LS18不仅能够兼容所有的组织透明化方法，还具有半自动校准功能，实现多通道成像，保证成像结果准确、可靠、易用，它将为科研工作者们带来更多的惊喜，敬请期待！展会预告： 2021年（第十四届）中国药物制剂大会将于2021年8月13-15日在辽宁省沈阳市举办，锘海将在16#展台布展。第三届全国肿瘤细胞生物学年会将于2021年8月13-16日在长春召开，锘海将在24#展台布展。 期待您的莅临和关注！

2021年7月1-3日，锘海LS18平铺光片显微镜及智能透明化电泳仪Smart CLear装机培训在华中科技大学同济医学院顺利举行。锘海生命科学工程师在仪器安装完成后，对光片及透明化进行理论和操作培训。内容包括透明化原理和方法、锘海LS18仪器操作演示、产品特点、案例展示及应用方向、服务内容等。随后老师进行样本成像测试，并验收仪器的各项参数，均顺利通过。培训现场：锘海LS18平铺光片显微镜简介：锘海LS18平铺光片显微镜是一款为透明化大组织样品设计的高分辨率3D成像仪器。锘海LS18平铺光片显微镜采用自主研发的动态虚拟光片平铺技术，克服了传统光片显微镜3D空间分辨率、Z轴层析能力和成像视野之间的矛盾，摒弃了原有选择性平面照明显微镜中的单光片照明的方式，利用多个薄的光片分段照明，在不损失成像视野的情况下，获得高分辨率的3D图像。锘海LS18平铺光片显微镜具有高速高分辨率成像、成像模式灵活可调，多色同时成像等优势。锘海LS18平铺光片显微镜致力于实现透明化后脑、心、肝、脾、肺、肾、小肠、乳腺、脊柱/脊髓、胸椎、肿瘤等多种完整组织器官的3D高分辨率成像。适用于各种不同类型透明化方法处理的样品，（水性透明化方法如Scale、SeeDB、CLARITY、CUBIC、SWITCH、SHIELD等，油性透明化方法如BABB、3DISCO、iDISCO、uDISCO、PEGASOS等），可得到高分辨率、高信噪比的多色荧光3D图像，能够快速定位宏观样品中的目标细胞，获得高分辨率的3D细胞微结构。智能透明化电泳仪SmartClear 简介：智能透明化电泳仪SmartClear 采用不同的电泳设计，在快速去脂的过程中大限度的保护样品蛋白。根据不同的实验需求，可定制化提供不同的样品台，电压、电流、温度，电场旋转速度等多种实验条件可调，使实验者获得好的实验条件。 产品优势：不同的电泳技术，保护样品蛋白样品定制化，针对不同样品有不同载物台成本低，透明液可维持10天速度快，3天即可完成全器官透明化应用范围： 生物软组织样本（如：脑、肝、脾、心脏等器官）转为澄清透明状态，并维持组织内完整的细胞结构和分子组成。开启完整无损的全脑神经网络3D图像，包括精细回路和分子连接。

众所周知，锘海LS18平铺光片显微镜既可以对透明化大样本组织进行快速3D成像，又可以对小器官组织进行高分辨成像。如今，LS18平铺光片显微镜又迎来新的突破，实现对厘米级的大样本组织进行分辨率从微米级到亚微米级成像，满足绝大部分科研工作者既想观察组织结构宏观整体状态，又想获取选定区域细节高分辨率成像需求。下面就跟着小编一起见证它真正的实力吧！小鼠脑样本的血管组织局部高分辨率成像图1 整脑血管组织成像首先，我们对整脑血管组织进行整体3D扫描成像，如图1所示，基本可以对整脑血管组织全方位采集，实现完整3D重构。其次，我们通过更换高倍物镜，调整光片平铺参数，选取局部特定区域进行高分辨率成像以便于观测更细小的毛细血管组织。如图2所示为选定成像区域，该区域成像深度约2mm，成像分辨率为横向650nm，纵向2um。图2 局部区域整体三维视图那么，高分辨率成像具体能达到什么样的成像效果呢？下面我们将分别从不同的光学层切厚度来观察血管高分辨率成像结果。1. 100um光学层切如图3所示为100um光学层切结果，通过局部放大及测量可以得到，LS18平铺光片显微镜能够观察并可量化的大血管组织管径约14.55um，细小的毛细血管分支约1.9um。图3  100um 厚层切及管径测量2. 200um光学层切及局部放大图4  200um层切及局部放大3. 500um光学层切图5 500um光学层切综上所述，LS18平铺光片显微镜集多功能成像能力于一身，实现微米到亚微米级空间分辨率对大样本组织进行快速成像，出于为广大生物医学工作者考虑，LS18平铺光片显微镜操作简便快捷，并且灵活适应于不同成像层面的应用，满足科研工作者绝大部分需求。此外，锘海生命科学亦建立起一站式服务平台，为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过精准、快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。点击以下链接，查看往期回顾组织透明化染色、大组织3D荧光成像科研服务太厉害了！LS18平铺光片显微镜竟然还有这项新功能！锘海LS18光片显微镜助力ProTracer技术发现成体肝细胞来源-荣登Science杂志一款适用于透明组织成像的多功能平铺光片显微镜

在使用带电荷的原料进行纳米粒子合成时，正电荷与负电荷的数量比将影响到纳米粒子的稳定性、电位等性能。而在核酸脂质纳米粒中，正电荷通常为具有可电离铵根（N）的阳离子脂质，而负电荷则为带有大量磷酸根（P）的核酸分子，两者可通过静电吸附的方式结合在一起。因此，不合理的比例可能会导致粒径过大、稳定性差等缺陷，正确计算正电荷与负电荷的比——N/P比——就显得尤为重要。 作为计算举例，我们挑选一个常见的配方，计算的关键数值如下： 阳离子脂质浓度（即N的浓度）：6.25 mmol/L有机相体积（含阳离子脂质）：1 mL核酸浓度：0.17 mg/mL水相体积（含核酸）：3 mL 碱基的平均分子量：330 g/mol其中碱基的平均摩尔浓度为经验的平均值，如果使用的核酸序列已知，则能够计算得到精确的摩尔浓度。在以上条件下，N的物质的量为：而P的物质的量为：因此N/P比为：以上即为N/P比的计算过程，不过在实际应用当中，也可以先定下N/P比，再确定有机相或水相的浓度，此时只需要逆向计算即可。例如我们将N/P比改为6:1，在其他浓度不变的情况下，核酸的浓度就需要降到原有的2/3，即0.113 mg/mL。 细心的读者可能也发现了，在计算的过程中并没有明确的核酸长度，这是因为核酸的长度并不会影响使用到的质量浓度。以单链RNA和上方计算得到的数值为例，在保持N/P比和N的物质的量不变的情况下，所需的P的物质的量也固定为1.545×10-6mol，而核酸的质量浓度与P的物质的量关系为：n核酸为核酸的物质的量（摩尔数），M核酸为核酸的摩尔质量对于1000 nt的mRNA，一个mRNA分子就有1000个阴离子；而对于2000 nt的mRNA来说，一个mRNA分子则有2000个阴离子，所需的物质的量（摩尔数）只需1000 nt的一半，但相对应的，其核酸的摩尔质量则会提升一倍（不考虑不同碱基的重量差异）。所以两者相乘，最终的数值并没有变化。因此，在使用mRNA的时候，换算成质量浓度对于计算更为方便。纳米药物制备系统应用范围：了解更多信息请联系021-37827858或13818273779点击以下链接，查看往期回顾核酸脂质纳米粒（LNP）科普 —— 组成成分及作用大小、结构不同的mRNA-LNP，细胞内的蛋白表达会不同吗？—— 粒径大小篇mRNA体内递送载体有哪些？NanoAssemblr制备的LNP实现对CRISPR-Cas9的高效递送重塑T细胞基因递送—GenVoy-ILM T细胞试剂盒

会议背景：免疫学是关乎人类发展的基础性前沿学科，在抵抗病毒感染、抗击肿瘤侵害以及自身免疫疾病等的检测与治疗中发挥了重要作用。随着人们对健康的重视，免疫学已经成为世界上发展最快，研究领域交叉范围最广的学科之一。为推进免疫学的发展，促进基础免疫学研究与临床成果转化，推动国内外免疫学的交流与合作，第八届CMI免疫学研讨会于2021年7月2-4日在安徽省合肥市玛丽蒂姆酒店盛大召开。会议吸引国内外30余位顶级免疫学者做学术报告和交流。会议内容围绕免疫学前沿热点研究、免疫治疗转化应用、细胞免疫机制、免疫新技术应用等。会议参加人数800余人，参展厂商约20家。本次大会由田志刚院士担任大会主席，由中国科技大学主办，中国科技大学生命科学与医学部和《Cellular Molecular Immunology》期刊编辑部承办，中国免疫学会、安徽省免疫学会协办。现场回顾：关于锘海：锘海生命科学成立于2017年，2020年获得国家高新技术企业资质。作为“生命科学的服务者， 医疗创新的推动者“，致力于打造完整的生命科学研发、制造、服务生态体系。组织透明化通过生化试剂去除造成光散射和光吸收的组分，从而让组织达到折射率均一、光学均 质性。组织标记是形态学研究中重要的研究方法之一。通过组织细胞特异性标记以及显微镜观察 与统计，可以对目标蛋白、核酸、亚细胞结构等进行明确的定性、定位和定量分析等。锘海自主研发LS18平铺光片显微镜可实现小鼠全脑、脊髓、骨骼、肾脏、肝脏、乳腺、胰腺、 肺、肌肉及肿瘤等小动物完整器官3D结构呈现。“平铺光片技术”解决了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，满足高通量、准确定位的荧光成像分析需求，广泛应用于免疫学、脑科学、肿瘤学、药物研发、药物筛选、干细胞研究、组织胚胎学等各个领域。展会预告：2021年7月15-17日，中国神经科学学会神经内稳态和内分泌分会暨辽宁省神经科学学会2021年学术年会将在大连医科大学举办 。锘海在7号展位，期待您的莅临和关注！

在过去的一年里，随着全球范围内众多研究者们对mRNA疫苗的广泛关注使得mRNA疫苗、核酸药物等一些原本比较“生僻”的词汇获得了更多的曝光度。人们愈发发现原本应用于罕见病、肿瘤等疾病个性化治疗的核酸药物所具有的无限潜能，其众多优点使得越来越多的人们意识到了下一个药物新时代可能正悄然走来。而目前的mRNA疫苗、核酸药物多是采用脂质纳米粒（LNP）来实现对mRNA等核酸分子的递送的，目前辉瑞、Moderna等上市的mRNA新冠疫苗以及最早的RNA类药物onpattro都是采用了脂质纳米粒来递送各自的核酸药物，也是目前最受大家认可，研究使用最广泛的递送体系。与其他递送材料相比，其包封效果、体内外表达效果、体内安全性等多方面都更具优势。这也使得制备得到良好结果、可靠的脂质纳米粒成为了一项重要工作。目前常用的脂质纳米粒制备方法主要有薄膜水化法、挤出法、均质法等。但是最适合的技术还是采用微流控混合技术来制备核酸脂质纳米粒，该方法相对简便快速，条件温和，同时容易实现生产放大。如图1所示，通过不同生产规模的微流控机器，可以较好的实现mRNA-LNP的良好制备，其结果一致性良好。粒径结果合适，且具有极低的PDI值，证实其分散性较好，并且包封效果可达90%以上。这些良好的表征结果正是众多研究者们所期待看到的数据。图1. 不同生产规模的微流控机器在不同参数下可以得到一致性良好的结果此外，在体内实验中也可以进一步验证其效果，如图2、3所示。通过制备包载了EPO-mRNA的LNP（注：EPO，Erythropoietin，促红细胞生成素），经静脉注射给药后，检测小鼠血清中EPO蛋白表达量，可发现相较于空白组明显的EPO蛋白表达提升，并且在不同规模机器间表达水平也比较一致。并在7天后，检测其血细胞容积，也可发现明显的生理指标提升。图2. 给药EPO-mRNA LNP后小鼠血清内EPO蛋白表达量                                             图3. 给药EPO-mRNA LNP7天后小鼠血细胞容积量的变化通过这些良好的体外表征以及体内表达结果可以发现，采用微流控技术制备的mRNA-LNP的确十分可靠，并且在不同生产规模间实现了一致性的结果，让更多研究者们有理由相信这一技术在mRNA疫苗、核酸药物领域的强大实力。纳米药物制备系统应用范围：了解更多信息请联系021-37827858或13818273779点击以下链接，查看往期回顾大小、结构不同的mRNA-LNP，细胞内的蛋白表达会不同吗？—— 粒径大小篇mRNA体内递送载体有哪些？NanoAssemblr制备的LNP实现对CRISPR-Cas9的高效递送重塑T细胞基因递送—GenVoy-ILM T细胞试剂盒核酸脂质纳米粒（LNP）科普 —— 组成成分及作用

葡萄酒是以新鲜葡萄或葡萄汁为原料，经全部或部分发酵酿制而成的酒精饮料。其中富含酚类物质，如花青素、黄酮醇、儿茶酸和酚酸等，可以有效地清除自由基，有很强的抗氧化能力，长期适量饮用葡萄酒具有抑制冠心病、动脉粥样硬化、抗癌和抗炎症等功效。目前测定葡萄酒抗氧化性的方法有很多，如分光光度法、色谱法、毛细管凝胶电泳法等。而电子顺磁共振波谱法是当前用于研究生物和医学体系中活泼自由基较为先进和成功的方法之一，与其他方法比，具有样品不受损、无干扰、灵敏度和分辨率高等优点。国外利用这种方法针对抗氧化能力强的营养保健食品，例如茶、啤酒、咖啡等进行的相关研究已成为热点。扬州大学食品科学与工程学院利用EPR技术对几种原产地为中国的干红葡萄酒进行了研究，进行了发酵后的抗氧化性分析试验和总酚检测。通过不同单品种干红葡萄酒总酚含量比较可知（图1），5个单品种葡萄酒的总酚含量存在比较明显的差异（P＜0.05），其中西拉和增芳德葡萄酒的总酚含量相对较低。取总酚含量最高的梅鹿辄干红葡萄酒作为测试样品，用蒸馏水稀释100倍至800倍进行EPR测试。由结果可知，稀释100倍的样品在5min时DPPH信号完全消失，说明此时DPPH已被完全清除，而其他样品仍有剩余，但信号完整。为保证实验准确性，选取200倍稀释倍数作为实验条件。图2 不同稀释倍数梅路辄干红葡萄酒清除 DPPH 自由基的EPR波普图（反应 5 min）在不同反应时间下对不同单品种干红葡萄酒DPPH清除效果进行比较可知，反应5min时，5种不同的葡萄酒反应体系中的剩余DPPH的信号值都有明显的降低，而且各葡萄酒清除DPPH自由基的能力有明显差异。（图3）图3 不同单品种干红葡萄酒 DPPH 自由基清除信号 EPR 波普图（反应 10min, 稀释倍数 200 倍）而当实验时间进行到10min时，其中梅鹿辄、宝石解百纳和赤霞珠三种干红葡萄酒样品中DPPH信号基本消失，说明这三种葡萄酒样品中DPPH自由基已被几乎完全清除，而且三种样品的清除能力相差无几。西拉和增芳德两个样品中DPPH信号仍保持完整，但是与5min时相比，信号值已有明显下降，说明样品中抗氧化性物质比5min时消耗的更多。图4 不同单品种干红葡萄酒 DPPH 自由基清除信号 EPR 波普图（反应 10min, 稀释倍数 200 ）实验结果表明DPPH清除率与总酚的变化趋势基本一致。以这次实验的样品数据拟合可以得知，干红葡萄酒样品的抗氧化性与其总酚含量呈正相关。此次实验所用的EPR技术可用于直接检测各种未成对电子的自由基，不但可以很大程度上提高实验的稳定性、可靠性和信噪比，也对下一步研究葡萄酒对其他自由基（ABTS、OH自由基等）的清除作用提供了更多的可能性，有利于全面分析葡萄酒的抗氧化性。ESR5000EPR是由不配对电子的磁矩发源的一种磁共振技术，可用于从定性和定量方面检测物质原子或分子中所含的不配对电子，并探索其周围环境的结构特性。对自由基而言，轨道磁矩几乎不起作用，总磁矩的绝大部分（99%以上）的贡献来自电子自旋，所以电子顺磁共振亦称“电子自旋共振”（ESR）。在此研究中的EPR实验结果均使用了先进的EPR技术（德国Bruker）去证实。我司代理的德国布鲁克EPR产品（ESR5000）可以为您提供各种检测、试用等服务。该仪器有着高灵敏性、高稳定性、操作简便及检测高效的优点，欢迎大家咨询！联系电话：02137827858 或 13818273779。点击以下链接，查看往期回顾锘海生物提供电子顺磁共振波谱仪（EPR、ESR）检测服务电子顺磁共振波谱仪（EPR）丨生物医学应用电子顺磁共振波谱仪（EPR）应用丨石英表面反应性EPR电子顺应用丨地质测年

众所周知，锘海LS18平铺光片显微镜既可以对透明化大样本组织进行快速3D成像，又可以对小器官组织进行高分辨成像。如今，LS18平铺光片显微镜又迎来新的突破，实现对厘米级的大样本组织进行分辨率从微米级到亚微米级成像，满足绝大部分科研工作者既想观察组织结构宏观整体状态，又想获取选定区域细节高分辨率成像需求。下面就跟着小编一起见证它真正的实力吧！小鼠脑样本的血管组织局部高分辨率成像                                                       图1 整脑血管组织成像首先，我们对整脑血管组织进行整体3D扫描成像，如图1所示，基本可以对整脑血管组织全方位采集，实现完整3D重构。其次，我们通过更换高倍物镜，调整光片平铺参数，选取局部特定区域进行高分辨率成像以便于观测更细小的毛细血管组织。如图2所示为选定成像区域，该区域成像深度约2mm，成像分辨率为横向650nm，纵向2um。图2 局部区域整体三维视图那么，高分辨率成像具体能达到什么样的成像效果呢？下面我们将分别从不同的光学层切厚度来观察血管高分辨率成像结果。1. 100um光学层切如图3所示为100um光学层切结果，通过局部放大及测量可以得到，LS18平铺光片显微镜能够观察并可量化的大血管组织管径约14.55um，细小的毛细血管分支约1.9um。图3  100um 厚层切及管径测量2. 200um光学层切及局部放大图4  200um层切及局部放大3. 500um光学层切综上所述，LS18平铺光片显微镜集多功能成像能力于一身，实现微米到亚微米级空间分辨率对大样本组织进行快速成像，出于为广大生物医学工作者考虑，LS18平铺光片显微镜操作简便快捷，并且灵活适应于不同成像层面的应用，满足科研工作者绝大部分需求。此外，锘海生命科学亦建立起一站式服务平台，为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过精准、快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。点击以下链接，查看往期回顾组织透明化染色、大组织3D荧光成像科研服务太厉害了！LS18平铺光片显微镜竟然还有这项新功能！锘海LS18光片显微镜助力ProTracer技术发现成体肝细胞来源-荣登Science杂志一款适用于透明组织成像的多功能平铺光片显微镜