会议介绍       CBIC 细胞生物产业大会、中国生物医药创 新合作大会、VIC 疫苗产业大会、SBIC 合成生物产业大会将于 6 月 6-7 日在北京举行，会议将邀请 200+ 生物医药权威专家和行业先进，分享细胞治疗、干细胞、类器官、 单细胞多组学、外泌体、溶瘤病毒、核酸药物、mRNA 疗法、溶瘤病毒、抗体药物、疫苗、 合成生物技术等领域的热门话题。会议信息01会议时间2023年6月6日-7日02会议地点北京望京昆泰酒店03锘海生命科学展位C8展会核心产品01锘海LS18平铺光片显微镜      锘海将携平铺光片显微镜产品资料和成像视频，向您展示生物组织透明化结合光片显微镜呈现快速高分辨率的生物组织三维成像案例，可广泛应用于神经科学、脑科学、胚胎发育学、肿瘤生物学、细胞生物学、药效评价和医学影像等领域。023D成像一站式科研服务     锘海生命科学搭建了一站式服务平台，为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过精细、快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。03生物组织透明化试剂盒（水性）该试剂盒主要是通过水化作用增加细胞膜流动性，结合去垢剂对细胞膜的通透作用实现对样品去脂的目的，并通过折射率匹配使样品透明。该方法适用于各种生物组织的透明化处理。 04生物组织膨胀试剂盒      利用水凝胶网络将生物大分子原位固定，并进一步实现各向同性的膨胀，从而达到提高组织分辨率的目的。05  铭汰微流控纳米药物递送平台       锘海将向您展示纳米药物制备系统及纳米药物制备、检测服务—从处方筛选到制剂表征全线过程。纳米药物制备系统通过微流控芯片技术制造纳米颗粒包裹体，可包裹化药、mRNA、siRNA、DNA等小分子物质，实现该物质的体内递送，从低通量至高通量均可覆盖，适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，并可在纳米颗粒表面添加标记物制造靶向药物。      锘海诚挚邀请您参观我们的展位（C8），现场有锘海专业工程师与您探讨交流技术难点及实验步骤，欢迎各位老师莅临咨询！

前言2023年3月6日，同济大学医学院附属同济医院栾冰教授团队在《Nature Metabolism》杂志上发表题为“Thermogenic adipocyte-derived Zinc promotes sympathetic innervation in male mice”的研究成果。该研究发现了初级锌离子(Zn)是一种产热脂肪细胞分泌的因子，可以促进小鼠脂肪组织交感神经支配和产热。该研究确定了产热脂肪细胞和交感神经元相互调节的正反馈机制，这种机制对于适应性产热很重要，为治疗肥胖提供了潜在靶点和新思路。适应性产热是棕色脂肪组织（brown adipose tissue, BAT）和米色脂肪细胞（beige adipocytes）在寒冷暴露和运动等外界刺激下产生的热量。由于其巨大的能量消耗能力，适应性产热已成为对抗全球肥胖及其相关疾病（如2型糖尿病和胰岛素抵抗）的一种策略。产热脂肪组织富含交感神经，交感神经释放儿茶酚胺刺激线粒体解偶联蛋白1 （UCP1）的表达和产热，同时棕色和米色脂肪细胞也通过分泌因子调节交感神经支配。在本文中，研究人员首先将白喉毒素受体(DTR)小鼠与表达UCP1-Cre的小鼠交配，产生了Ucp1-DTR小鼠，然后对小鼠脂肪组织进行透明化处理并结合酪氨酸羟化酶（TH）免疫染色标记交感神经，最后使用锘海LS18平铺光片显微镜进行3D成像。结果发现，冷诱导条件下，使用白喉毒素（DT）清除脂肪组织中的UCP1阳性产热脂肪细胞后，交感神经对脂肪组织的支配程度大幅下降，这表明产热细胞能够促进交感神经轴突生长（原文Fig.1b & 1d）。通过注射β3肾上腺素能受体拮抗剂L748337也观察到了此现象（原文Extended Fig.1e & 1g）。原文Fig.1b & 1d 4℃下分别注射DT和L748337的Ucp1-DTR小鼠ScWAT中TH阳性交感神经染色结果原文Extended Fig.1e & 1g 4℃下分别注射DT和L748337的Ucp1-DTR小鼠BAT中TH阳性交感神经染色结果进一步，研究人员给予小鼠腹腔内注射Zn时，scWAT和BAT中的交感神经支配增加。相反地，在scWAT和BAT中局部注射Zn螯合剂TPEN则会导致scWAT和BAT中的交感神经支配降低（原文Fig. 2c & 2e，原文Extended Fig. 2b & 2c）。使用锘海LS18平铺光片显微镜(点此了解详情）的3D成像结果清楚地表明锌可促进交感神经支配。原文Fig. 2c & 2e 分别注射Zn以及Zn螯合剂TPEN的小鼠scWAT中TH阳性交感神经染色结果原文Extended Fig. 2b & 2c 分别注射Zn以及Zn螯合剂TPEN的小鼠BAT中TH阳性交感神经染色结果最后，研究人员通过对普通饮食（RD）喂养和高脂饮食（HFD）喂养小鼠的相关实验中，观察到HFD小鼠BAT和scWAT中的交感神经支配（原文Fig. 4a（图左）& Extended Fig. 4a）和Zn水平下调，更为重要的是研究人员在肥胖中确定了锌伴侣蛋白金属硫蛋白-2（MT2）的表达上调，该蛋白通过锌离子螯合作用减少了产热脂肪细胞的锌分泌，抑制了交感神经的活性最终导致能量消耗减少。原文Fig. 4a（图左）& Extended Fig. 4a（图右）普通饮食（RD）喂养和高脂饮食（HFD）喂养的C57BL/6小鼠scWAT和BAT中TH阳性交感神经染色结果

 会议介绍 大会由中国医师协会、中国医师协会临床精准医疗专业委员会主办， 温州医科大学附属第一医院承办， 国家肝癌科学中心、 上海东方肝胆外科医院协办的中国医师协会临床精准医疗专业委员会协办的2023年会暨第五届肿瘤精准医学高峰论坛在浙江温州空港万豪酒店召开。此次会议采用线上线下相结合的方式， 共开设九大分论坛版块，覆盖单细胞与多组学技术应用、肿瘤微环境与代谢重塑前沿、肿瘤精准诊疗前沿、肿瘤微环境与代谢重塑前沿、肿瘤早筛与液体活检前沿、肿瘤精准诊疗前沿等领域。会议将邀请王红阳院士、张学敏院士、乔杰院士、卞修武院士、尚红院士、李校堃院士、贾伟平院士、等80余位顶尖专家发言分享。将有500＋医院、第三方临验中心、科研机构、分子诊断企业及大专院校等专业听众参与。会议时间2023年3月31日—4月2日会议地点浙江温州空港万豪酒店(地址:温州市龙湾区经济技术开发区滨海一道2007号)锘海展位号: B2    此次会议锘海将携各类产品技术资料和LS18成像视频，向您展示生物组织透明化结合光片显微镜呈现快速高分辨率的生物组织三维成像案例及生物组织透明化/染色→三维成像→数据分析大数据存储等整理解决方案。可广泛应用于神经科学、脑科学、胚胎发育学、肿瘤生物学、细胞生物学、药效评价和医学影像等领域。现场更有专业工程师与您探讨交流技术难点及实验步骤，欢迎各位老师莅临咨询！-END-锘海生命科学产品系列锘海LS18平铺光片显微镜组织透明化/染色、平铺光片显微成像科研服务生物组织透明化试剂盒(水性)生物组织膨胀试剂盒锘海组织透明化底透台(Smart Batch+) 组织透明化及免疫染色系统(VISIKOL) 组织透明化试剂盒铭汰 Microflow ™系列微流控纳米药物制备系统锘海近红外二区活体荧光/荧光寿命成像系统锘海类器官、3D细胞培养系统(Photosound) 小动物3D光声/荧光成像系统(regenHU)生物3D打印机耗材 (纳米标尺•小鼠骨钉•细胞水凝胶)CRO/CMO服务 • 显微镜配件及光学配件

 会议介绍 为了探讨核酸药物和核酸疫苗领域研究趋势，寻求核酸药物领域热点和难点问题解决方案，为科研工作者和产业化机构搭建沟通平台，加深学术交流和产业化合作，推动核酸药物与疫苗的研发进程，2023第二届核酸药物和疫苗创新峰会将于4月8-9日在杭州召开。本次会议邀请了国际、国内著名专家、企业家、投资人做精彩报告，将围绕核酸药物/疫苗研发进展情况、创新技术、递送系统、工艺和质量控制、临床研究、注册和申报等内容进行深入研讨，并邀请产业链上下游代表企业出席。会议时间2023年4月8日-9日会议地点杭州君尚云郦酒店2楼杭州市丁兰街道临丁路1188号锘海展位号: A7此次会议锘海将携各类产品技术资料及样机，向您展示纳米药物制备系统及纳米药物制备、检测服务—从处方筛选到制剂表征全线过程。纳米药物制备系统通过微流控芯片技术制造纳米颗粒包裹体，可包裹化药、mRNA、siRNA、DNA等小分子物质，实现该物质的体内递送，从低通量至高通量均可覆盖，适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，并可在纳米颗粒表面添加标记物制造靶向药物。现场更有专业工程师与您探讨交流技术难点及实验步骤，欢迎各位老师莅临咨询！-END-锘海生命科学产品系列锘海LS18平铺光片显微镜组织透明化/染色、平铺光片显微成像科研服务生物组织透明化试剂盒(水性)生物组织膨胀试剂盒锘海组织透明化底透台(Smart Batch+) 组织透明化及免疫染色系统(VISIKOL) 组织透明化试剂盒铭汰 Microflow ™系列微流控纳米药物制备系统锘海近红外二区活体荧光/荧光寿命成像系统锘海类器官、3D细胞培养系统(Photosound) 小动物3D光声/荧光成像系统(regenHU)生物3D打印机耗材 (纳米标尺•小鼠骨钉•细胞水凝胶)CRO/CMO服务 • 显微镜配件及光学配件

 会议介绍 近年来，激光扫描共聚焦显微镜技术及相关技术包括超高分辨显微镜，双光子激光扫描显微镜光片显微镜，转盘共聚焦，高内涵成像，多色成像，单分子成像技术等在快速发展，为提高广大相关科技工作者的学术及技术水平、促进生物光学成像技术在生命科学等领域中的应用，为相关科技工作者提供学术及技术交流的平台，北京理化分析测试技术学会电子显微学专业委员会定于2023年4月15日(星期六)，在北京举办“北京市2023年度激光共焦超高分辨显微学学术研讨会”。会议时间2023年4月15日会议地点四川龙爪树宾馆 四川会馆黄龙厅北京市朝阳区小红门路312号锘海展位此次会议锘海将携各类产品技术资料和LS18成像视频，向您展示生物组织透明化结合光片显微镜呈现快速高分辨率的生物组织三维成像案例及生物组织透明化/染色→三维成像→数据分析大数据存储等整理解决方案。可广泛应用于神经科学、脑科学、胚胎发育学、肿瘤生物学、细胞生物学、药效评价和医学影像等领域。现场更有专业工程师与您探讨交流技术难点及实验步骤，欢迎各位老师莅临咨询！-END-锘海生命科学产品系列锘海LS18平铺光片显微镜组织透明化/染色、平铺光片显微成像科研服务生物组织透明化试剂盒(水性)生物组织膨胀试剂盒锘海组织透明化底透台(Smart Batch+) 组织透明化及免疫染色系统(VISIKOL) 组织透明化试剂盒铭汰 Microflow ™系列微流控纳米药物制备系统锘海近红外二区活体荧光/荧光寿命成像系统锘海类器官、3D细胞培养系统(Photosound) 小动物3D光声/荧光成像系统(regenHU)生物3D打印机耗材 (纳米标尺•小鼠骨钉•细胞水凝胶)CRO/CMO服务 • 显微镜配件及光学配件

 会议介绍 神经退行性疾病是当今国内外脑科学研究的前沿和热点，随着脑科学的不断推进与发展，神经退行性疾病的临床与基础研究也不断推陈出新。为了交流国内外最新动态和发展趋势，促进国内外基础与临床研究学者的广泛交流，中国神经科学学会神经退行性疾病分会和中南大学湘雅医院将在湖南长沙举办第六届中国神经科学学会神经退行性疾病分会年会。会议的主要议题将涵盖阿尔茨海默病及其他痴呆、帕金森病及运动障碍、亨廷顿病、肌萎缩性侧索硬化症等在内的各种神经退行性疾病的基础与临床研究进展。会议时间2023年4月7日-9日（周五-周日）会议地点长沙市珠江花园酒店长沙市开福区福元西路99号珠江花城锘海展位号: 03    此次会议锘海将携各类产品技术资料和LS18成像视频，向您展示生物组织透明化结合光片显微镜呈现快速高分辨率的生物组织三维成像案例及生物组织透明化/染色→三维成像→数据分析大数据存储等整理解决方案。可广泛应用于神经科学、脑科学、胚胎发育学、肿瘤生物学、细胞生物学、药效评价和医学影像等领域。现场更有专业工程师与您探讨交流技术难点及实验步骤，欢迎各位老师莅临咨询！-END-锘海生命科学产品系列锘海LS18平铺光片显微镜组织透明化/染色、平铺光片显微成像科研服务生物组织透明化试剂盒(水性)生物组织膨胀试剂盒锘海组织透明化底透台(Smart Batch+) 组织透明化及免疫染色系统(VISIKOL) 组织透明化试剂盒铭汰 Microflow ™系列微流控纳米药物制备系统锘海近红外二区活体荧光/荧光寿命成像系统锘海类器官、3D细胞培养系统(Photosound) 小动物3D光声/荧光成像系统(regenHU)生物3D打印机耗材 (纳米标尺•小鼠骨钉•细胞水凝胶)CRO/CMO服务 • 显微镜配件及光学配件

微流控技术是目前制备脂质纳米粒（Lipid nanoparticle，LNP）最先进的技术，越来越多的企业、高校研究所，开始使用微流控技术开展脂质纳米粒的研发与生产。微流控技术是通过微流控设备，使两相液体在微流控芯片中，以层流的形式在相界面快速发生自组装反应，制备脂质纳米粒，用于递送核酸、小分子、多肽、蛋白等活性成分。粒径和PDI是评价其制备效果的重要指标，本文将为大家介绍脂质纳米粒粒径和PDI的测定方法，并通过具体的应用案例，展示粒径和PDI对于评价脂质纳米粒制备效果的重要意义。图1 微流控技术原理01粒径和PDI的测量方法粒径是表征颗粒大小的参数，常用于测定脂质纳米粒粒径的方法为动态光散射法（Dynamic light scattering，DLS）。动态光散射的原理是基于颗粒对光的散射。悬浮于液体中的脂质纳米粒，并不是静止的，由于分子的随机碰撞，脂质纳米粒不停地进行布朗运动。当激光照射脂质纳米粒时，布朗运动会导致颗粒对光的散射强度随时间涨落。颗粒越小，扩散或运动速度越快，散射光涨落越快，反之亦然。布朗运动的速率可以量化为平移扩散系数，通常用大写字母D表示。粒径与扩散系数的关系可以用斯托克斯-爱因斯坦方程（Stokes-Einstein equation）表示:DLS测量的是脂质纳米粒的流体力学粒径（Hydrodynamic diameter，DH），指的是与被测颗粒有相同扩散速率的球体直径。这个球体包括核心颗粒和任何与它表面相结合的物质，如任何的离子、吸附的聚合物等。图2 流体力学直径示意图利用DLS，我们可以快速测量样品中所有颗粒的粒径，得到基于光强的粒度分布曲线，显示样本中每个粒径的脂质纳米粒群体的散射光强度占比，也可以转换为基于体积或基于个数的粒径分布。同时，可以得到脂质纳米粒样本的平均粒径（Z-Average）、多分散系数（Polydispersity index，PDI or PI）。PDI是反映粒径分布宽度的无量纲数值，范围为0~1之间，数值越小，代表粒度越均匀，粒度分布越集中。通过铭汰微流控纳米药物制备系统合成的脂质纳米粒，根据配方及包裹活性成分的不同，粒径通常为40-500 nm，PDI通常0.3以下，对于成熟的配方，PDI在0.1以下。如图2所示，使用铭汰MicroFlow S微流控纳米药物制备系统，FlowOrigin M试剂盒包封mRNA，制备的核酸脂质纳米粒，利用DLS纳米粒度仪测量的结果。从结果可以看出粒径分布曲线为单峰且分布非常集中，Z-Average为83.45 nm， PDI为0.032，合成效果非常好。图3 核酸脂质纳米粒的DLS检测结果02粒径及PDI评价脂质纳米粒制备效果的应用举例2.1 通过粒径和PDI评估不同配方的合成效果使用铭汰MicroFlow S微流控纳米药物制备系统，分别按照Onpattro、Pfizer-BioNtech、Moderna三家经典配方以及铭汰FlowOrigin M试剂盒，合成mRNA-LNP，粒径及PDI的结果如图3所示。可以看出四家配方合成的该核酸脂质纳米粒粒径均为75 nm左右，PDI均为0.1以下，说明四家配方使用铭汰的微流控纳米药物制备系统均能获得非常好的合成效果。    图4 不同配方使用MicroFlow S合成mRNA-LNP的结果对比2.2通过粒径和PDI评价微流控芯片的重复使用效果采用相同配方，使用同一个微流控FlowTech S芯片，重复合成12次脂质纳米粒的粒径及PDI结果对比，如图4所示。可以看出，12次合成的脂质纳米颗粒粒径均为80nm左右，PDI为0.1以下，说明铭汰微流控芯片重复使用12次，仍然可以达到非常好的制备结果。 图5 同一微流控芯片重复合成12次结果对比2.3 通过粒径和PDI评价设备放大合成效果通过粒径、PDI，还可以比较不同设备的合成效果。图5为使用相同的配方，分别使用铭汰小小试MicroFlow T、小试MicroFlow S以及中试MicroFlow M合成的脂质纳米粒粒径和PDI的对比，粒径均为85 nm左右，PDI均为0.15以下，说明铭汰微流控纳米药物制备系统的系列产品，具有一致性的制备效果。  图6 铭汰微流控设备放大一致性对比03小结通过对脂质纳米粒粒径、PDI的测量及表征，有利于进行配方验证、筛选及优化，有利于评估微流控纳米药物制备系统的制备效果并选择适合的微流控纳米药物制备系统。铭汰拥有微流控纳米药物制备系统全产品线，可以为纳米药物研发生产的各个阶段，提供一站式的解决方案。应用范围纳米药物制备系统

2023第十六届中国科学仪器发展年会(ACCSI2023)将于2023年5月17-19日在北京雁栖湖国际会展中心盛大召开。ACCSI2023作为科学仪器行业高级别产业峰会，经过16年的发展，已被业界誉为科学仪器行业的“达沃斯”论坛。ACCSI2023以“创新发展 产业互联 — 助力北京怀柔打造科学仪器技术创新策源地”为主题，促进中国科学仪器行业健康快速发展，搭建科学仪器行业“政、产、学、研、用、资、媒”等各方有效交流平台，助推北京市“两区”建设。锘海生物科学仪器（上海）有限公司部分高管应邀出席此次盛会，并出席同期举办的“3i奖：仪器及检测风云榜颁奖盛典”。 锘海生物科学仪器（上海）有限公司作为ACCSI2023赞助商，特设专业展区——“A60” ，携多款当家产品亮相，诚邀您赴会参观！ 公司简介：：锘海生命科学成立于2017年，2020年获得国家高新技术企业资质，2021年7月被列入上海市标准化试点项目单位，项目名称为《光片照明显微镜研发与应用标准化试点》（项目编号：S21-02-025）。2022年被评定为“专精特新”中小企业、上海创新型中小企业，2023年被评为上海第一批科技型中小企业。总部位于上海松江区，在北京，广州，成都，沈阳等十余座城市设有办事处, 作为“生命科学的服务者，医疗创新的推动者“，致力于打造完整的生命科学研发、制造、服务体系。  锘海自主研发LS18平铺光片显微镜可实现小鼠全脑、脊髓、骨骼、肾脏、肝脏、乳腺、胰腺、肺、肌肉及肿瘤等小动物完整器官3D结构呈现。“平铺光片技术”解决了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，满足高通量、准确定位的荧光成像分析需求，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学等各个领域。为方便广大科研工作者，我们亦提供组织透明化、免疫荧光标记、高分辨大组织3D成像、图像分析与存储，一站式科研服务。此外，锘海还有纳米药物制备系统及纳米药物制备、检测服务—从处方筛选到制剂表征全线过程。纳米药物制备系统通过微流控芯片技术制造纳米颗粒包裹体，可包裹化药、mRNA、siRNA、DNA等小分子物质，实现该物质的体内递送，从低通量至高通量均可覆盖，适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，并可在纳米颗粒表面添加标记物制造靶向药物。目前，锘海已服务国内多家知名药企并具备成功申报临床的案例。 我们拥有一支专业且经验丰富的研发、销售、技术和本地化服务的团队，团队中大多数人员为高学历专业硕博人才，致力于为生命科学领域的科研及企业客户提供个性化、专业化的产品、服务和整体解决方案，让生命科学更加简单、高效。 锘海生物科学仪器（上海）有限公司地址：上海市松江区九亭镇云凯路66号科技绿洲二期10号楼2层电话：86-21-37827858、13818273779（微信同号）邮件：info@nuohailifescience.com网址：www.nuohailifescience.com扫一扫获取锘海生命科学最新动态

前言    生物组织的三维特性使得生命科学的研究都需基于3D空间信息而进行分析，如脑部神经投射、血管分布以及肿瘤微环境等。那么该选择什么方式方法，获取完整的，不同类型的生物组织在单细胞分辨率尺度上的三维结构呢？一、组织透明化和光片显微镜诞生传统组织学检测包括对冰冻或者石蜡包埋的组织样本进行切片，从而产生微米级别的切片，研究者可以对该切片进行免疫组化染色从而获得细胞层面信息。生物学家早就认识到组织薄切片比厚组织观察起来更加容易，显微切片机将组织切割成微米厚度的二维切片，通过二维切片我们可以获得单细胞层面的信息(Richardson & Lichtman, 2015)。但是三维组织结构可以让人们全面理解器官在正常功能和病理状态下的关键信息，例如神经系统就迫切需要进行三维结构的成像，因为大多数单个神经元向许多方向延伸，它们的真实性质和功能无法通过二维切片来确定；此外，发育生物学需要在三维结构上才能更好的认识器官甚至整个动物的形态发生(Chung et al., 2013)。因此获取完整生物组织在单细胞分辨率尺度上的三维结构一直是生命科学领域的重要目标之一。怎样才能获得组织的三维层面信息？方法一是通过将一系列连续的切片输入电脑进行三维结构重建，但是这种方法在技术上具有挑战性，因为组织在此过程会被撕裂、折叠、压缩或拉伸从而导致组织某个部分的损失或变形，由于剖面不完整，最终的体积重建可能无法还原最原始的三维结构(Oh et al., 2014)。方法二是使用光学切片技术进行整体成像，比如激光共聚焦、双光子显微镜和转盘显微镜等成像显微镜的使用，这些成像显微镜可以对小组织进行三维结构成像，但是这些现代的显微技术没办法解决组织太厚带来的严重速度滞后问题，以及强激光造成的光漂白、光毒性等问题。光学成像与细胞荧光标记相结合，因其具有良好的空间分辨率和高信噪比，是收集器官或组织单细胞分辨率信息的实用方法之一。然而，组织不透明是全组织和全器官光学成像的主要障碍之一，因此要进行光学成像就要进行组织透明化。那么是什么原因导致组织不够透明？在组织中，生物物质如水、脂类、蛋白质和矿物质通常以不均匀的混合物存在，它们的不均匀分布导致光发生强烈的横向散射，此外，生物物质有时会在细胞内外形成不均匀的结构，包括脂质颗粒和细胞器（如线粒体）、大的蛋白质簇（如胶原纤维）、甚至全细胞体积（如红细胞），当光被分子、膜、细胞器和组织中的细胞反射时，本来应该以直线传播的光线会发生多次偏移，因此光不能直接穿过组织从而形成光的散射(Tuchin, 2015; Wen, Tuchin, Luo, & Zhu, 2009)。组织不透明的另一个原因是光的吸收，血红蛋白、肌红蛋白和黑色素是生物组织中吸收可见光的主要分子，血红蛋白存在于所有脊椎动物（除了鳄鱼、冰鱼）和许多无脊椎动物中，样品内的光吸收可以限制激发光进入组织和荧光发射返回到探测器(Richardson & Lichtman, 2015)。正是由于光的散射和光的吸收，导致光的分布加宽、光的强度衰减，特别是在组织的深层区域，最终导致组织不透明，无法进行全组织三维结构光学成像。因此，组织透明化的目的主要是减少光的散射和吸收，以获得更好的光学成像效果（图1）(Gracie Vargas, 2001)。图1 实现组织透明化的关键步骤 (Susaki & Ueda, 2016)当光穿过组织时，由于脂质、色素的存在，导致光发生散射和吸收，从而组织不透明；组织透明化最主要的目的是通过脱脂、脱色等步骤从而减少光的吸收和光的散射。二、组织透明化方法类型经科学家的不断研究和突破，多种组织透明化方法相继被提出和优化。组织透明步骤包括：①样本固定；②样本透化（依据组织特性选择脱脂、脱钙、脱色、脱水或水化）；③折射率匹配。有机溶剂型透明化方法还涉及到组织脱水过程，根据组织成像需要还要涉及到样本免疫标记(图2)(Almagro, Messal, Zaw Thin, van Rheenen, & Behrens, 2021)；为了避免组织发生形变以及检测目标丢失，在透明化之前必须进行样本固定，但是固定程度需要控制，如果固定太弱，组织会软榻，如果固定过头，会阻碍免疫标记；一般使用多聚甲醛（PFA）、戊二醛（GA）进行组织固定，PFA可以均匀的固定大于500微米直径的样品，GA比PFA固定效果好，但是速度慢（分子较大，扩散速度慢）。SWITCH方法通过改变pH提高GA效率，GA一般适合固定脆弱以及蛋白表达较弱的组织；在组织切片中我们通过抗原修复减少醛固定时造成的抗原表位封闭（二硫键），在水性透明化方法SHIELD采用聚甘油-3-聚缩水甘油醚（P3PE）既能固定组织又能保存蛋白质；透化过程中用到的试剂主要有三种类型：①有机溶剂；②高水化试剂；③脱脂试剂；随后用高折射率的物质替换组织液体进行折射率匹配，实现组织透明。(Park et al., 2018)。图2 组织透明化基本流程(Almagro et al., 2021)(a) 不同来源样本获取。(b) 用不同方式（去垢剂、醇类化学试剂、电泳）增加组织通透性。(c) 组织标记（抗体、染料、凝集素）以及透明化（有机溶剂型透明化方法、水溶剂型透明化方法）。(d) 组织成像（三维数据、定量分析）。依据各透明化方法中使用的溶剂及其作用原理将现有的组织透明化方法主要分为三类：有机溶剂型、水溶剂型、水凝胶型（图3）(Matryba et al., 2020; Ueda et al., 2020b)。基于有机溶剂的组织透明化方法通过使用高折射率（RI）的有机溶剂将不同成分的RI均质，从而获得极好的组织透明度。BABB组织透明化方法可以完全透明胚胎和幼鼠大脑(Dodt et al., 2007)，但该方法中乙醇脱水作用会导致内源性GFP信号淬灭，无法透明有髓组织。通过引入四氢呋喃（THF）和二苄醚（DBE）, 3DISCO能够实现大多数成年啮齿动物器官的良好透明度，并将FPs保存几天，虽然DBE能有效保护内源荧光信号，但是DBE降解产物如过氧化氢、醛类物质会对荧光蛋白产生有害干扰(Erturk et al., 2012)。与3DISCO相比，uDISCO能够实现全身透明化和成像，并在数月内保持内源性FPs(Pan et al., 2016)。a-uDISCO是uDISCO的改良版本，通过调节pH条件提高荧光强度和稳定性(Li, Xu, Wan, Yu, & Zhu, 2018)。然而，uDISCO和a-uDISCO都不能有效的透明化高度着色的器官和硬组织。为了解决这些限制，赵瑚团队开发了聚乙二醇(PEG)相关溶剂系统(PEGASOS)，该系统可以透明所有类型的组织，同时保留内源性荧光(Jing et al., 2018)。朱丹教授团队通过温度和pH值调节开发了一种基于3DISCO，称为FDISCO，FDISCO有效的保存了FPs和化学荧光示踪剂，并允许在几个月内重复拍摄样品(Qi et al., 2019)。最近开发的sDISCO通过添加抗氧化剂稳定DBE，进一步保留了荧光信号。蛋白质也可以通过免疫标记来观察。由Renier等人开发的iDISCO可以对小鼠胚胎和成年器官进行全贴装免疫标记和体积成像(Renier et al., 2014)。vDISCO是一种基于纳米体的全身免疫标记技术。该技术将FPs的信号强度增强了100倍以上，并揭示了Thy1-GFP-M小鼠的全身神经元投射(Cai et al., 2019)。虽然有机溶剂方法表现出出色的透明性能，并实现了亚细胞分辨率的全身成像，但也存在一些不足，例如样品的大幅收缩、大多数有机溶剂的毒性和荧光蛋白的猝灭。由于油性透明化方法存在诸多缺点，水性透明化方法诞生，水性与油性透明化方法最大区别在于水性试剂具有强亲水性，更有利于荧光信号的保存，适用于自带荧光的组织样本进行透明化。水性透明化试剂主要包括：单纯浸泡透明化和高水化脱脂透明。ClearT是基于甲酰胺的浸泡型透明化方法，速度快，但是会导致组织膨胀且荧光信号会淬灭。PEG可以稳定蛋白质构象，继而发展了可保留荧光蛋白的ClearT2透明化技术，但该方法透明度比ClearT低。SeeDB技术以果糖和硫代甘油为主要成分，可以在几天内将组织透明化，但果糖粘度过高导致组织内渗透性低，在此基础上衍生出FRUIT透明化方法，尿素的使用降低了果糖粘度，提高试剂流动性和渗透性。浸泡型透明化方法不能去除脂质，因此样本透明度有限。SDS、Triton X-100可以有效去除脂质，水化法通过在透明化过程中去除脂质，利用水化作用降低样本折射率进而实现组织透明化。Scale技术利用尿素水化作用进行透明化，可保留荧光信号，但该方法操作时间较长，易导致组织破碎。CUBIC在Scale基础上添加了胺基醇，可以去除血红素使组织脱色,也可以保留荧光信号(Tian, Yang, & Li, 2021)。水凝胶解决了高浓度去垢剂导致样本形变的问题，水凝胶与样本中蛋白质和核酸分子形成共价连接便可以固定和保护细胞结构。水凝胶型组织透明化方法是一种基于水凝胶的组织透明化方法，利用丙烯酰胺凝胶将生物分子固定在它本来的位置，用水凝胶来替换组织中的脂类，让溶液中的单体进入组织，然后对其稍微加热，上述单体开始凝聚为长分子链，在组织中形成高分子网络，这一网络能够固定组织的所有结构，但不会结合脂类，随后快速将脂类抽出，便获得了完整透明的立体组织，如脑组织中的神经元、轴突、树突、突触、蛋白、核酸等都完好的维持在原位。这种独特的组织脱脂方法能够最小化结构破坏和生物分子损失。该方法的脱脂方式主要有两种：电泳和简单被动脱脂，均能有效去除脂质，从而大大提高了水凝胶组织的光学透明度和大分子通透性(Chung et al., 2013; Treweek et al., 2015)。CLARITY透明化方法利用凝胶包埋样本，并利用电场力去除脂质使样本快速透明；SHIELD通过环氧化物P3PE固定组织实现蛋白的保护，之后使用SDS进行被动或主动脱脂。水性透明化方法虽然可以部分解决荧光蛋白易淬灭的问题，但是也存在透明时间长，透明能力低的缺点，一般适用于小样本组织透明化。水凝胶透明化方法操作过程复杂，且需要一定的设备。图3 组织透明化方法的主要类型 (Ueda et al., 2020b)(A) 有机溶剂型透明化方法通过使用有机溶剂依次将组织进行脱水、脱脂、折射率匹配，在短时间内可使组织完全透明。然而，有机溶剂会快速漂白荧光蛋白的信号并且使组织皱缩。(B) 水溶剂型透明化方法以水溶性试剂对组织依次进行脱色、脱脂、折射率匹配，从而使组织完全透明。该方法具有更高的生物安全性和兼容性。(C) 水凝胶型透明化方法通过凝胶将生物分子固定在原来的位置，随后对组织进行脱色、脱脂、折射率匹配操作，从而使组织透明。基于水凝胶的方法可以保留足够的RNA用于分析，如荧光原位杂交；由于水凝胶网会固定组织，因此会使组织体积扩大几倍。三、组织透明化方法的选择组织透明化从2014年兴起以来，前期主要在神经科学领域广泛应用，随着透明化方法的不断改进，目前在发育生物学、免疫学、肿瘤学研究中也被广泛应用。检测目标不同，透明化方法中的试剂选择不同水凝胶适用于不稳定分子如RNA的保存，CLARITY方法中用到的化学试剂单丙烯酰胺或双丙烯酰胺对细胞内部结构进行很好的固定，使得在后期脱脂等处理后组织内部结构依然保持；常用的样本固定试剂是甲醇，在使用过程中可以较好的固定蛋白质（表1）(Almagro et al., 2021)；表1不同试剂适用于不同检测目标(Almagro et al., 2021)水性试剂蔗糖和尿素对内源性荧光试剂、脂类试剂比较友好；而有机溶剂苄醇-苯甲酸苄酯(BABB)会造成脂质洗脱和蛋白质荧光基团淬灭，所以不能用于脂肪组织的检测；有机溶剂型透明化方法PEGASOS中用到的试剂聚乙二醇(PEG)，可以有效保护内源性荧光；此外在有机溶剂型透明化方法中可以通过调节pH、温度达到保护荧光的效果，如FDISCO在四氢呋喃(THF)中，维持碱性pH和低温下，EGFP荧光信号可以维持数月（表2）。此外，免疫标记中使用的小分子染料（如细胞核染料DAPI、碘化丙啶、RedDot和SYTO）、凝集素、抗体对目标进行标记，其中抗体被动扩散速度非常慢，免疫染色可以通过优化抗体浓度、温度、孵育时间等提高染色效率；我们也可以通过减小样品体积、用小分子荧光染料代替抗体增强染色效果。也可以通过改变荧光标记的亲和属性如SWITICH方法，让它们在组织中自由扩散再进行结合；通过电泳的方式也可以提高染色效率(Almagro et al., 2021)。表2不同试剂对于荧光信号的保留(Almagro et al., 2021)此外，某些组织中含有较难去除的成分如色素、脂肪，其中血红素是组织中较难去除的色素，仅仅通过灌注PBS不足以去除肾脏、心脏、肌肉、肝脏中的血红素，可以选择含有漂白剂成分的试剂进行脱色如双氧水，并且能去除自发荧光，但是过氧化物处理会损伤目标荧光蛋白，所以荧光标记一般在漂白之后进行；前列腺和乳腺富含脂肪，会阻碍抗体进入、光线穿透，可以选择含有去垢剂成分的组合如TritonX-100、SDS、CHAPS等进行脱脂，去污剂可以破坏脂质双层使组织形成可以运输出组织的胶束，SHANEL方法中的CHAPS能生成较小的胶束，能更快的从组织中析出，具有有效的去脂效果。当组织较大时，被动去脂速度就比较慢，这时可以通过电泳的方式加快进程；电泳组织透明设备（ETC）和随机电子迁移（使用旋转电场或在单向电场内旋转样品）可以加速去脂。其它类型组织如硬组织骨骼，其中含有的钙化矿物质阻碍光的穿透，50%-70%的骨骼由遍布蛋白基质的钙化羟基磷灰石（HAP）晶体组成，这时可以选择含有钙螯合剂组合的方法如乙二胺四乙酸（EDTA）中性缓冲液，进行脱钙处理（表3）(Almagro et al., 2021)。表3不同试剂对于细胞组分去除(Almagro et al., 2021)四、组织透明化方法的应用范围不同组织在透明化方法的选择上都有所不同，根据组织成分、检测目标、组织类型选择不同的透明化方法，下表是不同透明化方法在不同健康以及肿瘤组织上的应用实例，对于组织在选择方法的时候可以借鉴这些实例，从而更好的避开长时间的摸索（表4）。表4 不同透明化方法应用到不同肿瘤组织举例(Almagro et al., 2021)此外，利用组织透明化方法可以实现人类器官三维成像（图4）(Ueda et al., 2020a)。图4 人类胚胎组织以及器官透明化三维结构图(Ueda et al., 2020a)(a) 胚胎周围神经三维图像。(b) 泌尿系统中的肾脏和Wolffian管。(c) 胚胎背部、手臂、头部肌肉。(d)手部脉管系统。(e)手部三种感觉神经。(f)肺上皮小管。锘海组织透明化及三维成像解决方案：-END-锘海生命科学产品系列锘海LS18平铺光片显微镜组织透明化/染色、平铺光片显微成像科研服务生物组织透明化试剂盒(水性)生物组织膨胀试剂盒锘海组织透明化底透台(Smart Batch+) 组织透明化及免疫染色系统(VISIKOL) 组织透明化试剂盒铭汰 Microflow ™系列微流控纳米药物制备系统锘海近红外二区活体荧光/荧光寿命成像系统锘海类器官、3D细胞培养系统(Photosound) 小动物3D光声/荧光成像系统(regenHU)生物3D打印机耗材 (纳米标尺•小鼠骨钉•细胞水凝胶)CRO/CMO服务 • 显微镜配件及光学配件

2023长三角神经科学论坛2023年5月19日-20日浙江三立开元名都大酒店 锘海展位号：主会场展位6；分会场展位9      2023长三角神经科学论坛将于2023年5月19日-20日在浙江杭州召开。本次会议主题为“神经内稳态”。为更好地促进基础和临床的结合，促进神经科学和人工智能等学科交叉结合发展提供平台，引领时代潮流。展会信息01会议时间2023年5月19日至20日02会议地点浙江三立开元名都大酒店 （浙江省杭州市拱墅区绍兴路538号）03锘海生命科学展位主会场展位6（二楼）；分会场展位9（四楼）展会核心产品锘海LS18平铺光片显微镜      锘海将携平铺光片显微镜产品资料和成像视频，向您展示生物组织透明化结合光片显微镜呈现快速高分辨率的生物组织三维成像案例，可广泛应用于神经科学、脑科学、胚胎发育学、肿瘤生物学、细胞生物学、药效评价和医学影像等领域。锘海LS18平铺光片显微镜成像展示：小鼠整脑神经成像小鼠脑连脊髓小鼠心脏神经小鼠心脏血管小鼠肝脏神经小鼠肺神经3D成像一站式科研服务      锘海生命科学搭建了一站式服务平台，为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过精细、快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。生物组织透明化试剂盒（水性）      该试剂盒主要是通过水化作用增加细胞膜流动性，结合去垢剂对细胞膜的通透作用实现对样品去脂的目的，并通过折射率匹配使样品透明。该方法适用于各种生物组织的透明化处理。 生物组织膨胀试剂盒      利用水凝胶网络将生物大分子原位固定，并进一步实现各向同性的膨胀，从而达到提高组织分辨率的目的。      锘海诚挚邀请您参观我们的展位（主会场展位6；分会场展位9），现场有锘海专业工程师与您探讨交流技术难点及实验步骤，欢迎各位老师莅临咨询！

应用背景     免疫疗法是现代癌症治疗的关键组成部分，一些疗法已成功地应用于恶性肿瘤，但存在的非普适性及多副作用等问题仍未较好解决。RNA设计和递送的进步正在引领RNA免疫治疗的新时代，对癌症免疫学理解的实质性进步、个性化癌症抗原的识别以及RNA递送载体性能的优化，都将在下一代免疫治疗中发挥核心作用。用于癌症疫苗的mRNA纳米颗粒      唯一获得批准的癌症疫苗是Sipuleucel-T，这是一种用于前列腺癌的自体树突状细胞疗法，于2010年获得批准，但由于其成本高且临床疗效不尽如人意，并未获得广泛使用。      mRNA脂质纳米颗粒（LNP）疫苗在抑制COVID-19大流行方面取得了巨大成功，因此，很有希望成为治疗性癌症疫苗的候选疫苗。其制备过程无需体外细胞培养或蛋白质工程，可直接从测序数据中体外转录编码患者特异性新抗原的mRNA，这展现了该平台新抗原疫苗接种的灵活性。此外，多个新抗原可由一个mRNA编码，以增加疫苗的广度和效力。将免疫刺激RNA注入疫苗制剂可以对抗免疫抑制肿瘤微环境，并大大提高治疗效果。表1. mRNA癌症疫苗临床试验（自2021年1月开始）‍下一代mRNA癌症疫苗的改进      mRNA癌症疫苗的改进可分为三个方向：1.增加可治疗的患者数量；2.提高RNA-LNPs的效力；3.提高其耐受性。      为解决第一个问题，需要更好地了解如何为更广泛的癌症患者设计抗原。以低突变负担癌症来讲，新抗原数量较少，可能需要额外的工具来改进抗原设计，神经网络和深度学习技术的进步，可利用多个数据源为抗原设计做出最佳预测。      针对第二个问题，可电离脂质的开发虽然增加了mRNA的递送，但只有一小部分给药的mRNA被抗原呈递细胞（APCs）处理。将mRNA疫苗靶向具有MHC-I交叉呈递和CD8 T细胞活化能力的淋巴器官APCs，可能提高疫苗效力。例如BNT111，目前正处于黑色素瘤的II期临床试验中（见表1），并取得了良好的早期结果，该药物利用一种带负电荷的配方，可促进巨噬细胞和树突状APCs的特异性摄取。除了基于电荷的靶向，与LNP表面的配体偶联（例如，抗CD11c或DEC205抗体）也可以改善APC靶向，这些都可作为增强低RNA剂量下免疫反应的改进方向。      在提高耐受性方面，尽管SARS-CoV-2 mRNA疫苗已具备较好的临床安全性，但减小mRNA疫苗副作用的问题仍值得研究。确定mRNA-LNP反应原性的来源是困难的，最近的研究提供了对调节反应原性生物机制的见解。其中，对LNP设计和遗传/环境因素如何影响mRNA疫苗反应原性的理解存在巨大差异。重要的是，激活这些炎症途径和I型干扰素最终可以抑制疫苗mRNA的翻译，从而抑制抗原表达和抑制免疫。因此，减轻这些炎症过程可能会改善疫苗效力以及副作用，可能的方式包括改变或替换某些LNP成分、结合隐形脂质以避免免疫监视、进行RNA修饰以减少PRR识别。此外，免疫激活的时间和位置（局部还是全身）可能决定其结果是破坏性的还是保护性的。需要细致的工程设计来设计疫苗，将适得其反的先天免疫反应的激活降到最低，同时仍然促进APC成熟，抗原呈递和适应性免疫。图1. RNA脂质纳米颗粒（LNPs）是模块化的工具，可精确地调整免疫反应靶向RNA递送用于体内CAR治疗      体内RNA递送到T细胞是一种有吸引力的方法。即将CAR-mRNA封装到细胞类型特异性（即T细胞）的纳米颗粒中（图1）。这种基于mRNA-LNP的体内CAR-T生成除了具有时间和成本优势外，还可能带来治疗和安全性方面的好处。mRNA-LNP递送减轻了与现有CAR-T疗法中使用的慢病毒载体相关的插入突变的担忧。此外，mRNA表达的短暂性可以通过给药调节CAR-T水平，与已批准的疗法相比，这可能会降低毒性。      CAR-T应用中最大的挑战是增加LNP的特异性。关于T细胞表面受体配体（例如，针对CD3/4/5/8的抗体）结合到mRNA-LNPs上的潜在T细胞靶向已经得到了证明。在临床前，靶向抗体的共价吸附和静电吸附都已成功使用。提高偶联效率、控制配体的实际取向、设计更精确的靶向配体工程，都能提高LNP的效力。      CAR-mRNA纳米颗粒可能需要重复给药，但RNA-LNPs相关的副作用限制了给药次数。因此，增加CAR的表达时间是有必要的。一种方法是使用环状mRNA，没有末端，它可以抵抗外切酶降解和脱帽，与线性mRNA相比，获得了更高的表达扩展。另外，LNP本身也可以调优，Moderna最近报道了一种LNP，与现有的LNP相比，其表达时间增加了近6倍，这也让我们认识到，RNA设计和递送的进步必将大幅提高细胞转染的效力和治疗时间，从而实现体内CAR-T治疗。将体内CAR疗法扩展到T细胞之外     特异性、灵活性等设计原则也可将靶RNA递送到其他免疫细胞以达到不同的治疗目的。例如，将CAR-mRNA靶向巨噬细胞可以促进实体肿瘤CAR疗法的发展，这是现有CAR-T无法解决的问题。      与T细胞不同，巨噬细胞在许多实体肿瘤中大量存在，占浸润免疫细胞的50%。作为吞噬细胞，巨噬细胞递送CAR-LNPs可能比T细胞容易得多。Carisma Therapeutics 证明了CAR巨噬细胞靶向HER2，能够吞噬异种移植的SKOV3癌细胞，呈递抗原，并重建肿瘤微环境。Carisma和Moderna已经合作利用mRNA-LNPs在体内靶向单核细胞/巨噬细胞进行CAR表达。大剂量静脉RNA-LNP治疗的挑战      临床批准的静脉RNA-LNP治疗通常需要预先使用免疫抑制剂。例如，根据FDA对Onpattro的药品标签，静脉注射siRNA-LNP在高达20%的患者中观察到IRRs，因此，注射前6小试，需要进行类固醇、抗组胺药和退烧药等联合用药。      与局部给药相比，全身输注使用更高剂量的RNA-LNPs之前需要免疫抑制，这是一个未被充分认识的挑战，因为免疫疗法需要具备一定的免疫功能。因此，对静脉注射RNA-LNPs有严重不良反应的患者可能无法接受这些治疗。      临床前体内CAR研究通常需要高全身剂量。因此，新的配方和RNA修饰以进一步降低RNA-LNP的反应原性对治疗成功具有非常重要的意义。对于LNP结构以及其他类型的RNA纳米配方来讲，尚存在着广阔的、未被发掘的巨大空间，希望脂质和LNP制剂的发展不断赢得突破，为更多疾病的治疗打开mRNA疗法窗口。‍结论‍‍     ‍ 免疫疗法的巨大成功表明，免疫系统仍然是我们对抗癌症最有力的工具之一。开发普适性的免疫药物，惠及更多的患者是所有研究人员、临床医生的共同努力目标。RNA疗法具有靶向特定基因、诱导免疫激活的固有能力，且易于通过靶向纳米颗粒在体内传递。尽管开发安全高效的RNA递送系统仍面临挑战，但相信，RNA纳米递送终将成为下一代免疫疗法的重要组成部分。‍‍‍

       2023年4月24—5月6日，锘海生命科学在北京大学第三医院圆满完成了LS18 plus平铺光片显微镜的装机培训工作。          锘海工程师在仪器安装调试完成后，5月4日上午进行理论部分宣讲，包括组织透明化方法和三维成像的原理及应用、平铺光片显微镜技术介绍、案例展示及应用方向等。5月4日下午-5月5日下午，我们工程师系统地从样本准备、上样、图像采集和处理对平台老师及主要用户进行LS18 plus仪器操作演示及数据处理流程讲解，确保老师可以完全学会。             5月6日全天我们工程师指导平台老师测样及数据处理整体流程，完成样本成像测试，老师们对于自己拍摄重构的3D可视化图像很满意很开心，并验收仪器的各项参数，均顺利通过。

2023（第三届）3D细胞培养与类器官研讨会2023年5月19日-20日上海中谷小南国花园酒店锘海展位号：58      2023年第三届3D细胞培养与类器官研讨会将于2023年5月在上海举办，汇聚行业资深学者、从业者们共话当前类器官技术当下的发展与应用。锘海诚挚邀请您参观指导和业务洽谈。展会信息01会议时间2023年5月19-20日  02会议地点上海中谷小南国花园酒店03锘海生命科学展位58展会核心产品01锘海LS18平铺光片显微镜      锘海将携平铺光片显微镜产品资料和成像视频，向您展示生物组织透明化结合光片显微镜呈现快速高分辨率的生物组织三维成像案例，可广泛应用于神经科学、脑科学、胚胎发育学、肿瘤生物学、细胞生物学、药效评价和医学影像等领域。023D成像一站式科研服务      锘海生命科学搭建了一站式服务平台，为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过精细、快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。03  铭汰微流控纳米药物递送平台        锘海将向您展示纳米药物制备系统及纳米药物制备、检测服务—从处方筛选到制剂表征全线过程。纳米药物制备系统通过微流控芯片技术制造纳米颗粒包裹体，可包裹化药、mRNA、siRNA、DNA等小分子物质，实现该物质的体内递送，从低通量至高通量均可覆盖，适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，并可在纳米颗粒表面添加标记物制造靶向药物。04  RegenHU生物3D打印机        regenHU生物3D打印机，可根据客户需求提供生物3D打印方案，具有高精度、高稳定性、打印方式广泛、应用面广等特点。应用领域：组织工程、再生医学&个性化医疗、制药、医疗器械行业、化妆品、药物开发等。      锘海诚挚邀请您参观我们的展位58，现场有锘海专业工程师与您探讨交流技术难点及实验步骤，欢迎各位老师莅临咨询！

会议介绍      2023第十六届中国科学仪器发展年会（ACCSI2023）将于2023年5月17-19日在北京雁栖湖国际会展中心召开。预计将吸引千余位科学仪器行业相关政府领导、院士专家、科学仪器及检验检测企业高层参会。会议信息01会议时间2023年5月17日-19日02会议地点北京雁栖湖国际会展中心酒店03会议报告报告题目：平铺光片显微镜技术及其应用报告人：贺艳（锘海生命科学 应用工程师）报告时间：2023-05-19 15:10-15:30报告概要：光片荧光显微镜的发展；平铺光片显微镜技术；产品应用案例04锘海生命科学展位A60展会核心产品01锘海LS18平铺光片显微镜      锘海将携平铺光片显微镜产品资料和成像视频，向您展示生物组织透明化结合光片显微镜呈现快速高分辨率的生物组织三维成像案例，可广泛应用于神经科学、脑科学、胚胎发育学、肿瘤生物学、细胞生物学、药效评价和医学影像等领域。023D成像一站式科研服务      锘海生命科学搭建了一站式服务平台，为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过精细、快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。03  铭汰微流控纳米药物递送平台       锘海将向您展示纳米药物制备系统及纳米药物制备、检测服务—从处方筛选到制剂表征全线过程。纳米药物制备系统通过微流控芯片技术制造纳米颗粒包裹体，可包裹化药、mRNA、siRNA、DNA等小分子物质，实现该物质的体内递送，从低通量至高通量均可覆盖，适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，并可在纳米颗粒表面添加标记物制造靶向药物。04  RegenHU生物3D打印机         regenHU生物3D打印机，可根据客户需求提供生物3D打印方案，具有高精度、高稳定性、打印方式广泛、应用面广等特点。应用领域：组织工程、再生医学&个性化医疗、制药、医疗器械行业、化妆品、药物开发等。      锘海诚挚邀请您参观我们的展位A60，现场有锘海专业工程师与您探讨交流技术难点及实验步骤，欢迎各位老师莅临咨询！

 会议介绍 作为近两年增长最快的生物医药细分领域，核酸疗法持续高速发展中，新冠疫情更是将核酸药物mRNA疫苗推上风口浪尖。而在后疫情时代下的今天，mRNA又将如何发展？拓展新的适应症、优化工艺生产技术、扩大产能供应，以及即将到来的首款国产小核酸药物，核酸疗法正在迎来大时代！I-RNA 第三届核酸疫药物及疫苗产业深度聚焦峰会携手80+行业大咖和1200+行业同仁，共同探讨核心技术分享最新成果，开启产业化征程！会议时间2023年4月27日-28日会议地点苏州金鸡湖凯宾斯基大酒店2楼 江苏苏州工业园区，国宾路1号锘海生命科学展位号: B16    此次会议锘海将携各类产品技术资料及设备样机，向您展示纳米药物制备系统及纳米药物制备、检测服务—从处方筛选到制剂表征全线过程。纳米药物制备系统通过微流控芯片技术制造纳米颗粒包裹体，可包裹化药、mRNA、siRNA、DNA等小分子物质，实现该物质的体内递送，从低通量至高通量均可覆盖，适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，并可在纳米颗粒表面添加标记物制造靶向药物。现场更有专业工程师与您探讨交流技术难点及实验步骤，欢迎各位老师莅临咨询！-END-锘海生命科学产品系列锘海LS18平铺光片显微镜组织透明化/染色、平铺光片显微成像科研服务生物组织透明化试剂盒(水性)生物组织膨胀试剂盒锘海组织透明化底透台(Smart Batch+) 组织透明化及免疫染色系统(VISIKOL) 组织透明化试剂盒铭汰 Microflow ™系列微流控纳米药物制备系统锘海近红外二区活体荧光/荧光寿命成像系统锘海类器官、3D细胞培养系统(Photosound) 小动物3D光声/荧光成像系统(regenHU)生物3D打印机耗材 (纳米标尺•小鼠骨钉•细胞水凝胶)CRO/CMO服务 • 显微镜配件及光学配件

锘海LS18平铺光片显微镜简介锘海LS18光片显微镜是一款具有半自动校准能力的多功能平铺光片显微镜，它能够在同一成像视野大小下，快速平铺多个小而薄的光片（薄度可达1μm）进行分段照明。并且锘海LS18光片显微镜适用于对所有组织透明化方法透明的样本组织进行多色快速3D成像，结合组织膨胀技术分辨率可达70nm。特点1、LS18平铺光片显微镜采用独特的动态平铺光片技术，在与其他光片显微镜获得相同的成像视野下，能够获得更薄的光片厚度，提升空间分辨率(X-Y轴分辨率)和光学层析能力（即Z轴分辨率），同时赋予显微镜自动校准和实时优化的能力。2、成像模式灵活可调，LS18光片显微镜配备不同NA的检测物镜，实现从0.63倍到12.6倍的多级变倍观察，可在几分钟内完成整个大样本组织的完整成像。因此，LS18光片显微镜适用于多种大尺度组织和器官细胞级分辨率的高速3D成像。（15min快速扫描完整鼠脑）3、 LS18光片显微镜与所有的组织透明化方法兼容。适用于各种基于水溶性、有机溶剂、水凝胶等透明化方法处理的样品成像，同时适用于不同形状，不同机械强度的组织成像。4、LS18光片显微镜具有半自动校准功能，成像质量可靠，且易于维护。5、 LS18光片显微镜可以对透明化样本组织进行多分辨率级别、各向同性、多色三维成像；6、 LS18光片显微镜的载物方式简易，便于用户操作。夹持法                                     粘胶法7、 LS18光片显微镜软件界面直观，操作步骤简洁明了。8、样品固定方案多种多样，为完整的成像质量保驾护航。根据样品的形态、大小、软硬程度的不同，LS18光片显微镜设计了不同的样品固定方式，如粘胶法、夹持法，磁针固定，凝胶包埋等方案，不同种类的透明化样品可以选取合适的样品固定式，使得样品固定牢靠，保证样本成像的完整性及流畅化。同时，锘海生命科学搭建了一站式服务平台，为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过精准、快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。LS18平铺光片显微镜成像展示* 神经细节展示图片来自西湖大学高亮博士实验室小鼠整脑神经成像 小鼠脑神经成像小鼠整脑血管成像      小鼠肺成像                          小鼠肾脏血管成像   乳腺肿瘤成像                           小鼠骨双色成像        胎鼠卵巢双色成像                   小鼠睾丸血管成像小鼠脾脏神经成像                      小鼠胚胎成像  小鼠肠血管成像                             小鼠胃血管成像 已购客户：已发文章2023Nature metabolismThermogenic adipocyte-zinc promotes sympathetic innervation in male mice.pdf2022Nature CommunicationsvolumeCarbonized paramagnetic complexes of Mn (II) as contrast agents for precise magnetic resonance imaging of sub-millimeter-sized orthotopic tumors.pdfChinese MedicineThree-dimensional visualization of electroacupuncture-induced activation of brown adipose tissue via sympathetic innervation in PCOS rats.pdfResearch SquareThree-dimensional visualization of electroacupuncture-induced activation of brown adipose tissue via sympathetic innervation in PCOS rats.pdf2021ScienceProliferation tracing reveals regional hepatocyte generation in liver homeostasis and repair.pdfThe Royal Society of ChemistryConcentrated small extracellular vesicles from menstrual blood-derived stromal cells improve intrauterine adhesion, a pre-clinical study in a rat model†.pdfbioRxivSpatiotemporal dynamics of molecular expression pattern and intercellular interactions in glial scar responding to spinal cord injury.pdf2020Cell ReportsA Versatile Tiling Light Sheet Microscope for Imaging of Cleared Tissues.pdf中国光学期刊光片荧光显微成像技术及应用进展.pdf技术发明人介绍高亮博士分别于2000年和2003年获清华大学学士和硕士学位，2009年获美国Purdue大学博士学位。2010年至2013年间在Howard Hughes医学研究院，Janelia研究所，诺贝尔奖获得者Eric Betzig 博士实验室从事博士后研究。2014年至2016年间任美国纽约州立大学石溪分校助理教授。2017至2018年间任美国显微镜公司首席研究科学家。2019年全职加入西湖大学。组织透明化、染色技术及LS18光片显微镜应用报告，欢迎联系我们！-END-锘海生命科学产品系列锘海LS18平铺光片显微镜组织透明化/染色、平铺光片显微成像科研服务生物组织透明化试剂盒(水性)生物组织膨胀试剂盒锘海组织透明化底透台(Smart Batch+) 组织透明化及免疫染色系统(VISIKOL) 组织透明化试剂盒铭汰 Microflow ™系列微流控纳米药物制备系统锘海近红外二区活体荧光/荧光寿命成像系统锘海类器官、3D细胞培养系统(Photosound) 小动物3D光声/荧光成像系统(regenHU)生物3D打印机耗材 (纳米标尺•小鼠骨钉•细胞水凝胶)CRO/CMO服务 • 显微镜配件及光学配件

组织透明化和光片显微镜诞生的必要性生物组织的三维特性使得生命科学的研究都需基于3D空间信息而进行分析，如脑部神经投射、血管分布以及肿瘤微环境等。传统组织学检测包括对冰冻或者石蜡包埋的组织样本进行切片，从而产生微米级别的切片，研究者可以对该切片进行免疫组化染色从而获得细胞层面信息。生物学家早就认识到组织薄切片比厚组织观察起来更加容易，显微切片机将组织切割成微米厚度的二维切片，通过二维切片我们可以获得单细胞层面的信息(Richardson & Lichtman, 2015)。但是三维组织结构可以让人们全面理解器官在正常功能和病理状态下的关键信息，例如神经系统就迫切需要进行三维结构的成像，因为大多数单个神经元向许多方向延伸，它们的真实性质和功能无法通过二维切片来确定；此外，发育生物学需要在三维结构上才能更好的认识器官甚至整个动物的形态发生(Chung et al., 2013)。因此获取完整生物组织在单细胞分辨率尺度上的三维结构一直是生命科学领域的重要目标之一。怎样才能获得组织的三维层面信息？一种方法是通过将一系列连续的切片输入电脑进行三维结构重建，但是这种方法在技术上具有挑战性，因为组织在此过程会被撕裂、折叠、压缩或拉伸从而导致组织某个部分的损失或变形，由于剖面不完整，最终的体积重建可能无法还原最原始的三维结构(Oh et al., 2014)。还有一种方法是使用光学切片技术进行整体成像，比如激光共聚焦、双光子显微镜和转盘显微镜等成像显微镜的使用，这些成像显微镜可以对小组织进行三维结构成像，但是这些现代的显微技术没办法解决组织太厚带来的严重速度滞后问题，以及强激光造成的光漂白、光毒性等问题。光学成像与细胞荧光标记相结合，因其具有良好的空间分辨率和高信噪比，是收集器官或组织单细胞分辨率信息的实用方法之一。然而，组织不透明是全组织和全器官光学成像的主要障碍之一，因此要进行光学成像就要进行组织透明化。那么是什么原因导致组织不够透明？在组织中，生物物质如水、脂类、蛋白质和矿物质通常以不均匀的混合物存在，它们的不均匀分布导致光发生强烈的横向散射，此外，生物物质有时会在细胞内外形成不均匀的结构，包括脂质颗粒和细胞器（如线粒体）、大的蛋白质簇（如胶原纤维）、甚至全细胞体积（如红细胞），当光被分子、膜、细胞器和组织中的细胞反射时，本来应该以直线传播的光线会发生多次偏移，因此光不能直接穿过组织从而形成光的散射(Tuchin, 2015; Wen, Tuchin, Luo, & Zhu, 2009)。组织不透明的另一个原因是光的吸收，血红蛋白、肌红蛋白和黑色素是生物组织中吸收可见光的主要分子，血红蛋白存在于所有脊椎动物（除了鳄鱼、冰鱼）和许多无脊椎动物中，样品内的光吸收可以限制激发光进入组织和荧光发射返回到探测器(Richardson & Lichtman, 2015)。正是由于光的散射和光的吸收，导致光的分布加宽、光的强度衰减，特别是在组织的深层区域，最终导致组织不透明，无法进行全组织三维结构光学成像。因此，组织透明化的目的主要是减少光的散射和吸收，以获得更好的光学成像效果（图1）(Gracie Vargas, 2001)。图1 实现组织透明化的关键步骤 (Susaki & Ueda, 2016)当光穿过组织时，由于脂质、色素的存在，导致光发生散射和吸收，从而组织不透明；组织透明化最主要的目的是通过脱脂、脱色等步骤从而减少光的吸收和光的散射。三种组织透明化方法类型：有机溶剂型、水溶剂型、水凝胶型经科学家的不断研究和突破，多种组织透明化方法相继被提出和优化。组织透明步骤包括：①样本固定；②样本透化（依据组织特性选择脱脂、脱钙、脱色、脱水或水化）；③折射率匹配。有机溶剂型透明化方法还涉及到组织脱水过程，根据组织成像需要还要涉及到样本免疫标记(图2)(Almagro, Messal, Zaw Thin, van Rheenen, & Behrens, 2021)；为了避免组织发生形变以及检测目标丢失，在透明化之前必须进行样本固定，但是固定程度需要控制，如果固定太弱，组织会软榻，如果固定过头，会阻碍免疫标记；一般使用多聚甲醛（PFA）、戊二醛（GA）进行组织固定，PFA可以均匀的固定大于500微米直径的样品，GA比PFA固定效果好，但是速度慢（分子较大，扩散速度慢），SWITCH方法通过改变pH提高GA效率，GA一般适合固定脆弱以及蛋白表达较弱的组织；在组织切片中我们通过抗原修复减少醛固定时造成的抗原表位封闭（二硫键），在水性透明化方法SHIELD采用聚甘油-3-聚缩水甘油醚（P3PE）既能固定组织又能保存蛋白质；透化过程中用到的试剂主要有三种类型：①有机溶剂；②高水化试剂；③脱脂试剂；随后用高折射率的物质替换组织液体进行折射率匹配，实现组织透明。(Park et al., 2018)。图2 组织透明化基本流程(Almagro et al., 2021)(a) 不同来源样本获取。(b) 用不同方式（去垢剂、醇类化学试剂、电泳）增加组织通透性。(c) 组织标记（抗体、染料、凝集素）以及透明化（有机溶剂型透明化方法、水溶剂型透明化方法）。(d) 组织成像（三维数据、定量分析）。依据各透明化方法中使用的溶剂及其作用原理将现有的组织透明化方法主要分为三类：有机溶剂型、水溶剂型、水凝胶型（图3）(Matryba et al., 2020; Ueda et al., 2020b)。基于有机溶剂的组织透明化方法通过使用高折射率（RI）的有机溶剂将不同成分的RI均质，从而获得极好的组织透明度。BABB组织透明化方法可以完全透明胚胎和幼鼠大脑(Dodt et al., 2007)，但该方法中乙醇脱水作用会导致内源性GFP信号淬灭，无法透明有髓组织。通过引入四氢呋喃（THF）和二苄醚（DBE）, 3DISCO能够实现大多数成年啮齿动物器官的良好透明度，并将FPs保存几天，虽然DBE能有效保护内源荧光信号，但是DBE降解产物如过氧化氢、醛类物质会对荧光蛋白产生有害干扰(Erturk et al., 2012)。与3DISCO相比，uDISCO能够实现全身透明化和成像，并在数月内保持内源性FPs(Pan et al., 2016)。a-uDISCO是uDISCO的改良版本，通过调节pH条件提高荧光强度和稳定性(Li, Xu, Wan, Yu, & Zhu, 2018)。然而，uDISCO和a-uDISCO都不能有效的透明化高度着色的器官和硬组织。为了解决这些限制，赵瑚团队开发了聚乙二醇(PEG)相关溶剂系统(PEGASOS)，该系统可以透明所有类型的组织，同时保留内源性荧光(Jing et al., 2018)。朱丹教授团队通过温度和pH值调节开发了一种基于3DISCO，称为FDISCO，FDISCO有效的保存了FPs和化学荧光示踪剂，并允许在几个月内重复拍摄样品(Qi et al., 2019)。最近开发的sDISCO通过添加抗氧化剂稳定DBE，进一步保留了荧光信号。蛋白质也可以通过免疫标记来观察。由Renier等人开发的iDISCO可以对小鼠胚胎和成年器官进行全贴装免疫标记和体积成像(Renier et al., 2014)。vDISCO是一种基于纳米体的全身免疫标记技术。该技术将FPs的信号强度增强了100倍以上，并揭示了Thy1-GFP-M小鼠的全身神经元投射(Cai et al., 2019)。虽然有机溶剂方法表现出出色的透明性能，并实现了亚细胞分辨率的全身成像，但也存在一些不足，例如样品的大幅收缩、大多数有机溶剂的毒性和荧光蛋白的猝灭。由于油性透明化方法存在诸多缺点，水性透明化方法诞生，水性与油性透明化方法最大区别在于水性试剂具有强亲水性，更有利于荧光信号的保存，适用于自带荧光的组织样本进行透明化。水性透明化试剂主要包括：单纯浸泡透明化和高水化脱脂透明。ClearT是基于甲酰胺的浸泡型透明化方法，速度快，但是会导致组织膨胀且荧光信号会淬灭。PEG可以稳定蛋白质构象，继而发展了可保留荧光蛋白的ClearT2透明化技术，但该方法透明度比ClearT低。SeeDB技术以果糖和硫代甘油为主要成分，可以在几天内将组织透明化，但果糖粘度过高导致组织内渗透性低，在此基础上衍生出FRUIT透明化方法，尿素的使用降低了果糖粘度，提高试剂流动性和渗透性。浸泡型透明化方法不能去除脂质，因此样本透明度有限。SDS、Triton X-100可以有效去除脂质，水化法通过在透明化过程中去除脂质，利用水化作用降低样本折射率进而实现组织透明化。Scale技术利用尿素水化作用进行透明化，可保留荧光信号，但该方法操作时间较长，易导致组织破碎。CUBIC在Scale基础上添加了胺基醇，可以去除血红素使组织脱色,也可以保留荧光信号(Tian, Yang, & Li, 2021)。水凝胶解决了高浓度去垢剂导致样本形变的问题，水凝胶与样本中蛋白质和核酸分子形成共价连接便可以固定和保护细胞结构。水凝胶型组织透明化方法是一种基于水凝胶的组织透明化方法，利用丙烯酰胺凝胶将生物分子固定在它本来的位置，用水凝胶来替换组织中的脂类，让溶液中的单体进入组织，然后对其稍微加热，上述单体开始凝聚为长分子链，在组织中形成高分子网络，这一网络能够固定组织的所有结构，但不会结合脂类，随后快速将脂类抽出，便获得了完整透明的立体组织，如脑组织中的神经元、轴突、树突、突触、蛋白、核酸等都完好的维持在原位。这种独特的组织脱脂方法能够最小化结构破坏和生物分子损失。该方法的脱脂方式主要有两种：电泳和简单被动脱脂，均能有效去除脂质，从而大大提高了水凝胶组织的光学透明度和大分子通透性(Chung et al., 2013; Treweek et al., 2015)。CLARITY透明化方法利用凝胶包埋样本，并利用电场力去除脂质使样本快速透明；SHIELD通过环氧化物P3PE固定组织实现蛋白的保护，之后使用SDS进行被动或主动脱脂。水性透明化方法虽然可以部分解决荧光蛋白易淬灭的问题，但是也存在透明时间长，透明能力低的缺点，一般适用于小样本组织透明化。水凝胶透明化方法操作过程复杂，且需要一定的设备。图3 组织透明化方法的主要类型 (Ueda et al., 2020b)(A) 有机溶剂型透明化方法通过使用有机溶剂依次将组织进行脱水、脱脂、折射率匹配，在短时间内可使组织完全透明。然而，有机溶剂会快速漂白荧光蛋白的信号并且使组织皱缩。(B) 水溶剂型透明化方法以水溶性试剂对组织依次进行脱色、脱脂、折射率匹配，从而使组织完全透明。该方法具有更高的生物安全性和兼容性。(C) 水凝胶型透明化方法通过凝胶将生物分子固定在原来的位置，随后对组织进行脱色、脱脂、折射率匹配操作，从而使组织透明。基于水凝胶的方法可以保留足够的RNA用于分析，如荧光原位杂交；由于水凝胶网会固定组织，因此会使组织体积扩大几倍。组织透明化方法的选择（对于不同检测目标、不同组织、含有特定化学成分的组织选择的组织透明化方法以及试剂不同）组织透明化从2014年兴起以来，前期主要在神经科学领域广泛应用，随着透明化方法的不断改进，目前在发育生物学、免疫学、肿瘤学研究中也被广泛应用。检测目标不同，透明化方法中的试剂选择不同，水凝胶适用于不稳定分子如RNA的保存，CLARITY方法中用到的化学试剂单丙烯酰胺或双丙烯酰胺对细胞内部结构进行很好的固定，使得在后期脱脂等处理后组织内部结构依然保持；常用的样本固定试剂是甲醇，在使用过程中可以较好的固定蛋白质（表1）(Almagro et al., 2021)。表1 不同试剂适用于不同检测目标(Almagro et al., 2021)水性试剂蔗糖和尿素对内源性荧光试剂、脂类试剂比较友好；而有机溶剂苄醇-苯甲酸苄酯(BABB)会造成脂质洗脱和蛋白质荧光基团淬灭，所以不能用于脂肪组织的检测；聚乙二醇(PEG)是有机溶剂型透明化方法PEGASOS中用到的试剂，可以有效保护内源性荧光；此外在有机溶剂型透明化方法中可以通过调节pH、温度达到保护荧光的效果，如FDISCO在四氢呋喃(THF)中，维持碱性pH和低温下，EGFP荧光信号可以维持数月（表2）。此外，免疫标记中使用的小分子染料（如细胞核染料DAPI、碘化丙啶、RedDot和SYTO）、凝集素、抗体对目标进行标记，其中抗体被动扩散速度非常慢，免疫染色可以通过优化抗体浓度、温度、孵育时间等提高染色效率；我们也可以通过减小样品体积、用小分子荧光染料代替抗体增强染色效果。也可以通过改变荧光标记的亲和属性如SWITICH方法，让它们在组织中自由扩散再进行结合；通过电泳的方式也可以提高染色效率(Almagro et al., 2021)。 表2不同试剂对于荧光信号的保留(Almagro et al., 2021)此外，某些组织中含有较难去除的成分如色素、脂肪，其中血红素是组织中较难去除的色素，仅仅通过灌注PBS不足以去除肾脏、心脏、肌肉、肝脏中的血红素，可以选择含有漂白剂成分的试剂进行脱色如双氧水，并且能去除自发荧光，但是过氧化物处理会损伤目标荧光蛋白，所以荧光标记一般在漂白之后进行；前列腺和乳腺富含脂肪，会阻碍抗体进入、光线穿透，可以选择含有去垢剂成分的组合如TritonX-100、SDS、CHAPS等进行脱脂，去污剂可以破坏脂质双层使组织形成可以运输出组织的胶束，SHANEL方法中的CHAPS能生成较小的胶束，能更快的从组织中析出，具有有效的去脂效果。当组织较大时，被动去脂速度就比较慢，这时可以通过电泳的方式加快进程；电泳组织透明设备（ETC）和随机电子迁移（使用旋转电场或在单向电场内旋转样品）可以加速去脂。其它类型组织如硬组织骨骼，其中含有的钙化矿物质阻碍光的穿透，50%-70%的骨骼由遍布蛋白基质的钙化羟基磷灰石（HAP）晶体组成，这时可以选择含有钙螯合剂组合的方法如乙二胺四乙酸（EDTA）中性缓冲液，进行脱钙处理（表3）(Almagro et al., 2021)。表3不同试剂对于细胞组分去除(Almagro et al., 2021)组织透明化方法的应用范围不同组织在透明化方法的选择上都有所不同，根据组织成分、检测目标、组织类型选择不同的透明化方法，下表是不同透明化方法在不同健康以及肿瘤组织上的应用实例，对于组织在选择方法的时候可以借鉴这些实例，从而更好的避开长时间的摸索（表4）。表4 不同透明化方法应用到不同肿瘤组织举例(Almagro et al., 2021)此外，利用组织透明化方法可以实现人类器官三维成像（图4）(Ueda et al., 2020a)。图4 人类胚胎组织以及器官透明化三维结构图(Ueda et al., 2020a)(a) 胚胎周围神经三维图像。(b) 泌尿系统中的肾脏和Wolffian管。(c) 胚胎背部、手臂、头部肌肉。(d)手部脉管系统。(e)手部三种感觉神经。(f)肺上皮小管。参考文献Almagro, J., Messal, H. A., Zaw Thin, M., van Rheenen, J., & Behrens, A. (2021). Tissue clearing to examine tumour complexity in three dimensions. Nat Rev Cancer, 21(11), 718-730. doi:10.1038/s41568-021-00382-wCai, R., Pan, C., Ghasemigharagoz, A., Todorov, M. I., Forstera, B., Zhao, S., . . . Erturk, A. (2019). Panoptic imaging of transparent mice reveals whole-body neuronal projections and skull-meninges connections. Nat Neurosci, 22(2), 317-327. doi:10.1038/s41593-018-0301-3Chung, K., Wallace, J., Kim, S. Y., Kalyanasundaram, S., Andalman, A. S., Davidson, T. J., . . . Deisseroth, K. (2013). Structural and molecular interrogation of intact biological systems. Nature, 497(7449), 332-+.Dodt, H. U., Leischner, U., Schierloh, A., Jahrling, N., Mauch, C. P., Deininger, K., . . . Becker, K. (2007). Ultramicroscopy: three-dimensional visualization of neuronal networks in the whole mouse brain. Nat Methods, 4(4), 331-336. doi:10.1038/nmeth1036Erturk, A., Becker, K., Jahrling, N., Mauch, C. P., Hojer, C. D., Egen, J. G., . . . Dodt, H. U. (2012). Three-dimensional imaging of solvent-cleared organs using 3DISCO. Nat Protoc, 7(11), 1983-1995. doi:10.1038/nprot.2012.119Gracie Vargas, M., Kin F. Chan, PhD, Sharon L. Thomsen, MD, and A.J. Welch, PhD. (2001). Use of Osmotically Active Agents to Alter Optical Properties of Tissue: Effects on the Detected Fluorescence Signal Measured Through Skin.Jing, D., Zhang, S., Luo, W., Gao, X., Men, Y., Ma, C., . . . Zhao, H. (2018). Tissue clearing of both hard and soft tissue organs with the PEGASOS method. Cell Res, 28(8), 803-818. doi:10.1038/s41422-018-0049-zLi, Y., Xu, J., Wan, P., Yu, T., & Zhu, D. (2018). Optimization of GFP Fluorescence Preservation by a Modified uDISCO Clearing Protocol. Front Neuroanat, 12, 67. doi:10.3389/fnana.2018.00067Matryba, P., Sosnowska, A., Wolny, A., Bozycki, L., Greig, A., Grzybowski, J., . . . Golab, J. (2020). Systematic Evaluation of Chemically Distinct Tissue Optical Clearing Techniques in Murine Lymph Nodes. 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讲座背景随着组织透明化技术的快速发展和荧光显微镜的迭代升级,科研工作者可以对结构复杂、高度异质性的生物样本进行整体化的三维成像,并通过搜集和分析荧光信号深入探索生理、病理功能以及机制。part1 应用案例分享锘海于2023年3月中下旬精心推出了组织透明化及三维成像的高校巡讲系列讲座，以帮助同学解决相关实验技术问题、提供新思路和方法。讲座主要从生物组织透明化方法、平铺光片荧光显微镜介绍以及两种技术的应用案例进行分享，很多感兴趣的同学们都积极报名参加，仔细阅读锘海宣传册了解产品信息，以及针对部分有兴趣的师生开展现场实操培训。part2 讲座Q&A环节第二部分是讲座Q&A环节，许多老师进行了提问互动，比如老师自己做透明化遇到的问题，或提出自己的实验需求让我们给些建议等等，现场互动反响热烈。除了理论技术介绍，我们还安排了锘海最新款组织透明化及组织膨胀两款试剂盒Demo，准备100um的脑片样本便于试用，首先针对两款试剂盒给老师进行介绍，然后分发试用装让老师现场操作。100µm脑片透明前后对比图老师们反馈透明化试剂盒操作简单，并惊叹脑片样本透明化仅需2分钟；部分老师对膨胀试剂盒比较感兴趣，我们针对需要的老师做了实验和理论双指导。此外，由于场地限制和时间关系，有些老师将试剂盒带回自己实验室，需要对大组织做透明化。

会议介绍微纳米技术与医疗健康创新大会（2022）将于2023年4月在上海举办。会议将围绕微纳米机器人在医学上的应用；微纳创新诊疗方法；微纳生物医学传感与检测技术；纳米分子医学成像；纳米生物材料；微纳生物医疗器械设计与制造；创新纳米药物；药物递送系统；公共卫生与生物安全；纳米肿瘤学等热门话题展开交流。总结两年来微纳米技术在抗击新冠疫情方面取得的科研成果，搭建微纳米技术与医疗健康应用发展和分享平台，推动医疗健康发展，创造人民美好生活的未来。会议信息会议时间：2023年4月22-24日（21日报到）会议地点：上海嘉定喜来登酒店锘海生命科学展位：A11此次会议锘海将携各类产品技术资料及样机，向您展示纳米药物制备系统及纳米药物制备、检测服务—从处方筛选到制剂表征全线过程。纳米药物制备系统通过微流控芯片技术制造纳米颗粒包裹体，可包裹化药、mRNA、siRNA、DNA等小分子物质，实现该物质的体内递送，从低通量至高通量均可覆盖，适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，并可在纳米颗粒表面添加标记物制造靶向药物。现场更有专业工程师与您探讨交流技术难点及实验步骤，欢迎各位老师莅临咨询！相关产品链接：-END-锘海生命科学产品系列锘海LS18平铺光片显微镜组织透明化/染色、平铺光片显微成像科研服务生物组织透明化试剂盒(水性)生物组织膨胀试剂盒锘海组织透明化底透台(Smart Batch+) 组织透明化及免疫染色系统(VISIKOL) 组织透明化试剂盒铭汰 Microflow ™系列微流控纳米药物制备系统锘海近红外二区活体荧光/荧光寿命成像系统锘海类器官、3D细胞培养系统(Photosound) 小动物3D光声/荧光成像系统(regenHU)生物3D打印机耗材 (纳米标尺•小鼠骨钉•细胞水凝胶)CRO/CMO服务 • 显微镜配件及光学配件锘海生物科学仪器（上海）有限公司86-21-37827858info@nuohailifescience.comwww.nuohailifescience.com13818273779上海市松江区九亭镇云凯路66号科技绿洲二期10号楼

2023年4月3-8日，锘海LS18平铺光片显微镜装机培训在厦门大学翔安校区黄朝阳楼圆满结束。装机现场理论培训锘海工程师在仪器安装完成后，对组织透明化和三维成像进行理论培训，包括组透明化原理和方法、平铺光片显微镜技术介绍、案例展示及应用方向、服务内容等。实操演示工程师对平台老师及主要用户进行LS18仪器操作演示及数据分析演示，从样本准备、上样、图像采集和处理进行了系统的介绍。并进行样本成像测试，仪器的各项参数均顺利验收中。锘海LS18平铺光片显微镜简介锘海LS18光片显微镜是一款具有半自动校准能力的多功能平铺光片显微镜，它能够在同一成像视野大小下，快速平铺多个小而薄的光片（薄度可达1μm）进行分段照明。LS18平铺光片显微镜兼容所有组织透明化方法的样本，可进行多色快速3D成像。并且，结合组织膨胀技术分辨率可达到近70nm。

平铺光片显微镜-成像视频小鼠脑神经成像

锘海产品目录扫描左边二维码查阅或下载锘海LS18平铺光片显微镜扫描左边二维码查阅或下载锘海组织透明化试剂盒扫描左边二维码查阅或下载组织透明化染色、成像科研服务扫描左边二维码查阅或下载visikol动植物组织透明化试剂扫描左边二维码查阅或下载纳米药物制备系列总册扫描左边二维码查阅或下载生物3D打印机扫描左边二维码查阅或下载近红外二区小动物活体成像扫描左边二维码查阅或下载小动物光声活体荧光成像扫描左边二维码查阅或下载高信噪比内窥拉曼系统扫描左边二维码查阅或下载器官、3Ｄ细胞培养系统扫描左边二维码查阅或下载细胞水凝胶扫描左边二维码查阅或下载-END-

在完整组织中观察药物靶点相互作用的工具一直是理解体内药物作用的主要障碍。2022年发表在Cell上的题为“Insitu identification of cellular drug targets in mammalian tissue”的文章有突破性进展，作者通过修改和整合点击化学（CC）与组织透明化技术，开发了一种方法——透明辅助组织点击化学（Clearing-Assisted Tissue Click Chemistry，简称CATCH），允许小分子药物-靶点相互作用在亚细胞分辨率下进行标记和成像(图1A)。该技术为组织中小分子的体内相互作用可视化提供了一个有价值的平台，并能够识别药物在哺乳动物组织中的分布和参与。图1 CATCH技术的方法开发1组织透明化极大地改善了哺乳动物组织中的化学标记 作者对小鼠给药脂肪酸酰胺水解酶（FAAH）抑制剂PF7845-yne（末端含炔基），通过CuAAC点击化学反应，炔基与荧光标签的叠氮化物反应形成叠氮炔环，进而引入荧光基团。初始试图直接成像药物结合的FAAH，但由于信噪比较差，未能显示细胞靶标。因而猜测脑组织构成复杂，其致密的脂膜可能影响点击化学反应，作者测试了基于聚丙烯酰胺的水凝胶组织透明化方法CLARITY，结果发现去除脂质后显著提升了成像的信噪比（图1C、D）。作者同时也验证了其他的透明化方法也得到了类似的效果（图1E）。此外，作者还比较了不同的点击化学配体（TBTA，BTTAA，BTTP）及不同的铜离子浓度下的反应效率，发现使用BTTP，150 μM硫酸铜条件下可获得高信噪比且稳定的成像（图1B）。2CATCH实现了药物-靶点接触的全脑、亚细胞原位成像 为了验证CATCH应用的广泛性，作者对三种小分子药物FAAH抑制剂PF7845-yne、BIA10-2474-yne和单胺氧化酶（MAO）抑制剂Pargyline-yne进行CATCH成像，结果清晰展示了药物-靶点在小鼠不同脑区的分布（图2A-E）。另外，还可以展示这些分子主要靶向的细胞类型，FAAH抑制剂主要靶向新皮质和海马中的神经元样结构;而Pargyline-yne主要结合全脑的血管样结构，少量下丘脑和脑桥内稀疏但特异标记的神经元样结构（图2F）。图2 全脑药物结合的可视化3CATCH可与荧光标记复合以识别靶细胞类型作者在给药处理后进行NeuN免疫染色，发现PF7845-yne和BIA10-2474-yne主要与新皮质、海马和杏仁核中的NeuN+神经元共定位。而在脑桥中发现了一小群神经元样结构，它们是NeuN阴性但被 pargyline-yne 靶向的（图3A-D）。随后作者洗脱NeuN并重新孵育TH抗体验证该推测，确定了NeuN-，Pargyline-yne阳性的细胞的确是LC-NA神经元（图3E）。由此证明，CATCH可以和荧光标记结合揭示了药物结合的细胞类型，并且可以区分神经元不同部分的药物靶标参与位点，可以支持多轮的药物靶向细胞类型鉴定。图3 药物靶点的细胞型鉴定锘海团队自主研发的组织透明化试剂盒可以高效地进行脱色脱脂，采用亲水性温和环境的设计，在组织荧光保护、样本形态维持、降低自发荧光等方面表现出比较优异的性能，适用范围广、操作简便、速度快、效率高。

根据《科技型中小企业评价办法》（国科发政〔2017〕115号）和《科技型中小企业评价服务工作指引》（国科火字〔2022〕67号）的有关规定，公示上海市2023年第一批科技型中小企业名单，锘海顺利入选榜单。科技型中小企业：依托一定数量的科技人员从事科学技术研究开发活动，取得自主知识产权并将其转化为高新技术产品或服务，从而实现可持续发展的中小企业。上海市2023年第一批入库科技型中小企业名单：关于锘海：锘海生命科学成立于2017年，2020年获得国家高新技术企业资质，2021年7月被列入上海市标准化试点项目单位，项目名称为《光片照明显微镜研发与应用标准化试点》（项目编号：S21-02-025）。总部位于上海松江区，在北京，广州，成都，沈阳等十余座城市设有办事处, 作为“生命科学的服务者，医疗创新的推动者“，致力于打造完整的生命科学研发、制造、服务生态体系。锘海自主研发LS18平铺光片显微镜可实现小鼠全脑、脊髓、骨骼、肾脏、肝脏、乳腺、胰腺、肺、肌肉及肿瘤等小动物完整器官3D结构呈现。“平铺光片技术”解决了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，满足高通量、准确定位的荧光成像分析需求，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学等各个领域。为方便广大科研工作者，我们亦提供组织透明化、免疫荧光标记、高分辨大组织3D成像、图像分析与存储，一站式科研服务。此外，锘海还有纳米药物制备系统及纳米药物制备、检测服务—从处方筛选到制剂表征全线过程。纳米药物制备系统通过微流控芯片技术制造纳米颗粒包裹体，可包裹化药、mRNA、siRNA、DNA等小分子物质，实现该物质的体内递送，从低通量至高通量均可覆盖，适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，并可在纳米颗粒表面添加标记物制造靶向药物。目前，锘海已服务国内多家知名药企并具备成功申报临床的案例。我们拥有一支专业且经验丰富的研发、销售、技术和本地化服务的团队，团队中大多数人员为高学历专业硕博人才，致力于为生命科学领域的科研及企业客户提供个性化、专业化的产品、服务和整体解决方案，让生命科学更加简单、高效。联系我们：400-860-5168转3698

锘海LS18平铺光片显微镜简介锘海LS18光片显微镜是一款具有半自动校准能力的多功能平铺光片显微镜，它能够在同一成像视野大小下，快速平铺多个小而薄的光片（薄度可达1μm）进行分段照明。并且锘海LS18光片显微镜适用于对所有组织透明化方法透明的样本组织进行多色快速3D成像，成像的空间分辨率可达横向1μm，纵向3μm。特点1、LS18平铺光片显微镜采用独特的动态平铺光片技术，在与其他光片显微镜获得相同的成像视野下，能够获得更薄的光片厚度，提升空间分辨率(X-Y轴分辨率)和光学层析能力（即Z轴分辨率），同时赋予显微镜自动校准和实时优化的能力。2、成像模式灵活可调，LS18光片显微镜配备不同NA的检测物镜，实现从0.63倍到12.6倍的多级变倍观察，可在几分钟内完成整个大样本组织的完整成像。因此，LS18光片显微镜适用于多种大尺度组织和器官细胞级分辨率的高速3D成像。（15min快速扫描完整鼠脑）3、 LS18光片显微镜与所有的组织透明化方法兼容。适用于各种基于水溶性、有机溶剂、水凝胶等透明化方法处理的样品成像，同时适用于不同形状，不同机械强度的组织成像。4、LS18光片显微镜具有半自动校准功能，成像质量可靠，且易于维护。5、 LS18光片显微镜可以对透明化样本组织进行多分辨率级别、各向同性、多色三维成像；6、 LS18光片显微镜的载物方式简易，便于用户操作。夹持法                                     粘胶法7、 LS18光片显微镜软件界面直观，操作步骤简洁明了。8、样品固定方案多种多样，为完整的成像质量保驾护航。根据样品的形态、大小、软硬程度的不同，LS18光片显微镜设计了不同的样品固定方式，如粘胶法、夹持法，磁针固定，凝胶包埋等方案，不同种类的透明化样品可以选取合适的样品固定式，使得样品固定牢靠，保证样本成像的完整性及流畅化。同时，锘海生命科学搭建了一站式服务平台，为广大客户提供专业的生物组织透明化、免疫染色、平铺光片显微镜3D荧光成像、数据分析、数据存储等一站式科研服务，旨在通过精准、快速、多样化的科研服务为每一位生命科学工作者提供个体化/定制化的解决方案。LS18平铺光片显微镜成像展示* 神经细节展示图片来自西湖大学高亮博士实验室小鼠整脑神经成像 小鼠脑神经成像小鼠整脑血管成像      小鼠肺成像                          小鼠肾脏血管成像   乳腺肿瘤成像                           小鼠骨双色成像        胎鼠卵巢双色成像                   小鼠睾丸血管成像小鼠脾脏神经成像                      小鼠胚胎成像  小鼠肠血管成像                             小鼠胃血管成像 已购客户：已发文章2022Nature CommunicationsvolumeCarbonized paramagnetic complexes of Mn (II) as contrast agents for precise magnetic resonance imaging of sub-millimeter-sized orthotopic tumorsChinese MedicineThree-dimensional visualization of electroacupuncture-induced activation of brown adipose tissue via sympathetic innervation in PCOS ratsResearch SquareThree-Dimentional Visualization of Electroacupuncture Activates Brown Adipose Tissue via Sympathetic Innervation in PCOS Rats2021ScienceProliferation tracing reveals regional hepatocyte generation in liver homeostasis and repairThe Royal Society of ChemistryConcentrated small extracellular vesicles from menstrual blood-derived stromal cells improve intrauterine adhesion, a pre-clinical study in a rat modelbioRxivSpatiotemporal dynamics of molecular expression pattern and intercellular interactions in glial scar responding to spinal cord injury2020Cell ReportsA Versatile Tiling Light Sheet Microscope for Imaging of Cleared Tissues中国光学期刊光片荧光显微成像技术及应用进展

新品发布NEW为达到更快速高效、高荧光保留、兼容免疫染色、适用各种显微镜和高生物安全性的透明化需求，锘海在前一代透明化试剂的基础上进行迭代优化配方，升级推出全新的生物组织透明化试剂盒（水性）。同时，锘海还推出新型的生物组织膨胀试剂盒以用于进一步提高透明化生物组织三维成像的分辨率。该试剂盒利用水凝胶网络将生物大分子原位固定，并进行各向同性的三维膨胀，从而达到提高成像分辨率的目的。生物组织透明化试剂盒(水性)Tissue Clearing Reagent Kit (Hydrophilic)产品介绍：         该试剂盒主要是通过水化作用增加细胞膜流动性，结合去垢剂对细胞膜的通透作用实现对样品去脂的目的，并通过折射率匹配使样品透明。该方法适用于各种生物组织的透明化处理。 产品特点：1、快速、高效。完整成年小鼠脑的透明化仅需5-7天，200 μm厚度的脑切片仅需2分钟。 2、内源荧光蛋白保留效果好，同时兼容免疫染色。3、样本的形态结构保留程度好。 4、可用于对大尺寸生物组织样品及组织切片的透明化处理，并适用各种类型荧光显微镜，如：光片显微镜、共聚焦显微镜等荧光显微镜。 5、采用亲水性试剂，具有高生物安全性。小鼠CNS透明前后对比图：P7兔脑采用不同透明化⽅法对⽐图：成像案例：Thy1-GFP小鼠脑Anti-TH标记小鼠心脏Anti-TH标记小鼠肝注：以上图像均采集自锘海LS18平铺光片显微镜生物组织膨胀试剂盒Tissue Expansion Reagent Kit产品介绍：           利用水凝胶网络将生物大分子原位固定，并进一步实现各向同性的膨胀，从而达到提高分辨率的目的。产品特点：1、快速、高效。完整成年小鼠脑的透明膨胀仅需9-10天。 2、内源荧光蛋白保留效果好，同时兼容免疫染色。3、样品机械强度高，对生物组织结构保护程度好。4、膨胀系数可以调节 。5、多场景适用，可进行完整组织器官及组织切片透明膨胀 。 6、兼容多类型荧光显微镜，如：光片显微镜、共聚焦显微镜等荧光显微镜。以小鼠脑为例透明膨胀流程：不同器官组织透明膨胀效果：成像案例：Thy1-GFP阳性神经元使用试剂盒膨大4倍采用6.3倍放大倍率即可获得0.5×0.5×1.25 μm分辨率Thy1-GFP阳性神经元使用试剂盒膨大4倍采用20倍放大倍率即可获得0.3×0.3×0.4 μm分辨率绿色: ChAT-GFP紫色: 感觉神经元轴突注：以上图像均采集自锘海LS18平铺光片显微镜

脂质体及聚合物作为纳米药物的常用载体，在药物合成方面已取得了巨大的成功，但在靶向递送方面，仍存在着诸多挑战，纳米药物该如何实现靶向递送呢？在谈论靶向之前，先要了解一个关键的药理学概念，以器官靶向为例：器官靶向药物输送不是将所有给药剂量都输送到目标器官，而是提供足够的剂量以达到所需的生物效果，同时限制脱靶积累的毒性；即使大部分注射剂量没有到达目标器官，也应该足以引起生理效应并为患者提供益处。靶向方式分类纳米药物靶向的方式多种多样，总的来讲，可以分为三大类（如图1）。图1.  靶向方式归类图被动靶向被动靶向依赖于调整纳米颗粒的物理性质，如大小、形状、硬度和表面电荷，使其与解剖学及生理学相结合。例如，调节纳米颗粒的大小可以确定纳米颗粒从不连续的血管（如肝脏和脾脏中的血管）外渗的趋势。主动靶向主动靶向包括用化学或生物的方法修饰纳米颗粒的表面，使其特异性地与靶器官高度表达的受体或其他细胞因子相结合。例如，用单克隆抗体修饰纳米颗粒，以使核酸传递到难以转染的免疫细胞中。内源性靶向内源性靶向包括设计纳米颗粒的组成，使其在注射时与血浆蛋白的一个不同的亚群结合，从而将其引导到目标器官并促进特定细胞的摄取。例如，参与体内胆固醇运输的蛋白质已被证明是脂质纳米颗粒有效的肝细胞传递所必需的。对比而言，被动靶向和内源性靶向的设计度与可控性相对较低，主动靶向自然成为了靶向递送的研究焦点。在肝外靶向的研究中，就涉及了较多的主动性靶向，表1也列出了多种肝外给药的纳米颗粒组合物。表1. 用于肝外给药的纳米颗粒组合物靶向修饰方法药物靶向本质上为官能团之间的相互作用，即纳米药物表面的核心基团与受体部位的基团进行化学结合。以脂质纳米颗粒为例，载体组分中的PEG脂质多位于颗粒表面且本身易于修饰，因此，可以在PEG脂质上加载受体部位的结合基团以实现靶向目的。以下列举了几种常见的PEG脂质修饰方法。马来酰亚胺修饰使用DSPE-PEG2000-马来酰亚胺作为功能化PEG脂质，替换LNP中一定摩尔量的聚乙二醇脂质，通过其取代的羧基端半胱氨酸直接与肽偶联，可以形成肽靶向的纳米粒子。再如SS-31，一种线粒体靶向的四肽，具有巯基，只需与马来酰亚胺标记的脂质纳米颗粒孵育，即可进行硫酰马来酰亚胺偶联。NHS修饰NHS酯通常用于标记胺基生物分子。NHS酯与胺基的反应具有pH依赖性，结合的较佳pH值与生理环境的pH值相同。使用DMG-PEG-COOH-NHS作为功能化PEG脂质，替换LNP中一定摩尔量的聚乙二醇脂质，通过在C端添加赖氨酸修饰MH42，并通过其侧链的伯胺偶联，可以形成肽靶向的纳米粒子。同样，许多具有胺基的抗体和靶向肽也可通过该反应偶联到脂质纳米颗粒上：乳铁蛋白可特异性结合活化的结肠巨噬细胞上的LRP-1，实现细胞靶向抗炎治疗；还有较为熟知的程序性死亡配体1单克隆抗体的应用。氨基修饰氨基有利于醛酮分子的化学选择性附着。甘露聚糖还原端醛基与氨基羧基修饰的脂质之间肟偶联反应的正交特性保证了脂质纳米颗粒表面多糖分子的取向。甘露聚糖受体靶向脂质体既可以作为抗菌药物递送的载体，也可以作为用于免疫治疗的重组疫苗的载体。DBCO修饰DBCO标记可促进巯基-炔反应，并可选择性偶联荧光探针、亲和标记和细胞毒性药物分子。例如，抗体scFv-N3可被有效地偶联到DBCO修饰的脂质纳米颗粒上。研究发现，抗体修饰的脂质纳米颗粒可穿越血脑屏障，并诱导脑特异性积累，以治疗中枢神经系统疾病。结论：人体复杂的生化环境给纳米药物的靶向递送制造了诸多阻力。在实际探索中，被动靶向，主动靶向和内源性靶向，可作为靶向设计的联合工具，在寻找绝对的靶向位点、真实的靶向机理与达到实际的靶向效果之间寻求平衡。在此当中，主动性靶向的尝试值得支持，正如文中所讲PEG脂质的各种修饰方式，大量的设计性尝试定能排除越来越多的靶向干扰因素，朝靶向机理的挖掘处更深一步。参考文献：1.    Menon, Ipshita et al. “Fabrication of active targeting lipid nanoparticles: Challenges and perspectives.” Materials Today Advances (2022): n. pag.2.    Dilliard, S.A., Siegwart, D.J. Passive, active and endogenous organ-targeted lipid and polymer nanoparticles for delivery of genetic drugs. Nat Rev Mater (2023).3.    Herrera-Barrera, Marco et al. “Peptide-guided lipid nanoparticles deliver mRNA to the neural retina of rodents and nonhuman primates.” Science Advances 9 (2023): n. pag.应用范围:纳米药物制备系统:

会议简介3月16-17日，将在西湖大学E7-315开展生物组织透明化样品制备、整体3D成像及大数据分析实操培训班，本次培训由锘海生命科学与赛默飞工程师联合主讲。报名成功的师生，由工程师现场指导上机操作，欢迎广大师生踊跃报名。01报告时间2023.3.16-3.17培训天数按照报名老师人数而定,如参会人数大于30人,则增加3月17日的培训,培训内容与第一天相同。报告地点西湖大学E7-315培训主题1、生物组织透明化技术介绍、样本制备技术2、生物组织三维成像-光片显微镜应用3、3D成像上机实操4、Amira-3D数据分析实操练习参会报名（线上/线下）线下报名，扫码报名腾讯会议：111-668-914宣传海报：

近日，上海市经济和信息化委员会对2022年上海市第二批“专精特新”中小企业名单进行公示。 “专精特新”中小企业是指专业化、精细化、特色化、新颖化突出的中小企业，评选主要聚焦重点优势产业、聚焦企业的专业化能力提升和自主创新能力。“专精特新”企业是补链强链的重要力量，属于产业链供应链关键环节或关键领域。 锘海生命科学拥有专业且经验丰富的本土研发、技术及服务团队，致力于打造完整的生命科学仪器研发、制造和服务体系，凭借多项自主创新专利技术及产品成功入选2022上海市第二批“专精特新”中小企业榜单。临港松江科技2022年上海市第二批“专精特新”中小企业名单：关于锘海：锘海生命科学成立于2017年，2020年获得国家高新技术企业资质，2021年7月被列入上海市标准化试点项目单位，项目名称为《光片照明显微镜研发与应用标准化试点》（项目编号：S21-02-025）。总部位于上海松江区，在北京，广州，成都，沈阳等十余座城市设有办事处, 作为“生命科学的服务者，医疗创新的推动者“，致力于打造完整的生命科学研发、制造、服务生态体系。  锘海自主研发LS18平铺光片显微镜可实现小鼠全脑、脊髓、骨骼、肾脏、肝脏、乳腺、胰腺、肺、肌肉及肿瘤等小动物完整器官3D结构呈现。“平铺光片技术”解决了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，满足高通量、准确定位的荧光成像分析需求，广泛应用于脑科学、肿瘤学、药物研发、干细胞研究、组织胚胎学等各个领域。为方便广大科研工作者，我们亦提供组织透明化、免疫荧光标记、高分辨大组织3D成像、图像分析与存储，一站式科研服务。  此外，锘海还有纳米药物制备系统及纳米药物制备、检测服务—从处方筛选到制剂表征全线过程。纳米药物制备系统通过微流控芯片技术制造纳米颗粒包裹体，可包裹化药、mRNA、siRNA、DNA等小分子物质，实现该物质的体内递送，从低通量至高通量均可覆盖，适用于临床前研究和符合GMP的临床生产，并可在纳米颗粒表面添加标记物制造靶向药物。目前，锘海已服务国内多家知名药企并具备成功申报临床的案例。 我们拥有一支专业且经验丰富的研发、销售、技术和本地化服务的团队，团队中大多数人员为高学历专业硕博人才，致力于为生命科学领域的科研及企业客户提供个性化、专业化的产品、服务和整体解决方案，让生命科学更加简单、高效。

锘海本着“一锘千金”客户至上的原则为客户提供高质量的LS18平铺光片显微镜仪器和定制化的一站式服务。在平铺光片专利的基础上，不断完善平铺光片显微镜性能，提升用户使用感受，并且凭借研发部门的潜心探索、砥志研思，自主搭建从“透明化样品制备”到“光片显微镜成像”及“3D大数据重构和分析”一站式技术服务平台。良好的仪器使用反馈和高质量的数据结果赢得了众多科研工作者的信赖与支持。为感谢广大用户对锘海的支持，并鼓励使用国货仪器进行课题研究，特此推出“开学促销，买赠钜惠”活动，欢迎广大科研工作者踊跃参与。活动时间：2023年2月21日—4月31日 活动内容：科研服务满5赠1，赠送相同服务内容；科研服务返礼物服务费≥15000元，送500元京东卡服务费≥25000元，送华为WATCH服务费≥50000元，送iPAD锘海透明化试剂盒，单次购买2盒，赠送同型号试剂1盒； 活动申明：1、本次活动适用中国大陆地区所有客户；2、本次活动仅针对科研服务和试剂盒，仪器不参与此次活动；3、活动最终解释权归锘海生物科学仪器（上海）有限公司所有。联系方式：电话：13818273779(同微信)邮箱：info@nuohailifescience.com官网：www.nuohailifescience.com