乳鼠心肌细胞的培养

心肌细胞刚接种时形状为圆形或椭圆形，大约在 24 h左右基本贴壁，此时细胞伸出伪足，伪足在镜下为纤维状条索，细胞胞体则呈现不规则形状，如多角形，部分细胞有聚集倾向，细胞搏动效果较好， DMEM培养基在初始培养时为深红色，两天后变为淡黄色，应该是营养成分下降的表现，也说明细胞生长状况良好。我们也参考了一些国外文献的培养方法加以补充。鉴定的最简单的办法就是搏动与否，注意：当搏动比较微弱的时候，在 10 倍物镜下可能看不到搏动，换成20 或40倍的物镜可能能观察到。检验操作是否合格的最好的办法就是看心肌细胞的纯度和搏动能力。另外，心肌细胞表达肌动蛋白，可以作为鉴定，但不是唯一的特征性指标，因为平滑肌细胞也表达。
    乳鼠心肌细胞属于原代生长细胞，培养过程较为繁琐。文献上有多种浓度胰酶消化方法，0.06%浓度的胰酶对细胞损害较小，但这个浓度消化所需时间较长。采取多次反复低浓度消化的方法，每次消化一些后，用吸管抽取出上清液，离心所得即为心肌细胞。利用心肌细胞和成纤维细胞贴壁时间的不同，采用差速贴壁 1.5h，充分去除成纤维类细胞，达到纯化的目的。成纤维细胞胞体呈梭型或不规则三角形，中央有卵圆形核，胞质突起，生长时呈放射状，并且会增殖，不搏动，很好和心肌细胞鉴别。消化和吹打一定不要过度，是保证心肌细胞活力最重要的一个原则。而接种密度(一般不低于 10⁵/ml)，也将影响到心肌细胞的搏动及同步化搏动。

升麻Cimicifuga foetida Cimiside B 升麻苷B 152685-91-1 C40H64O13 ≥97%

升麻Cimicifuga foetida Khellin 凯林 82-02-0 C14H12O5 ≥96%

升麻Cimicifuga foetida Norkhellol 4-羟基-7-(羟基甲基)-5H-呋喃并[3,2-G][1]苯并吡喃-5-酮 4439-68-3 C12H8O5 ≥97%

升麻Cimicifuga foetida prim-O-Glucosylangelicain (S)7-[(BETA-D-吡喃葡萄糖氧基)甲基]-2,3-二氢-4-羟基-2-(1-羟基-1-甲基乙基)-5H-呋喃并[3,2-G][1]苯并吡喃-5-酮 85889-15-2 C21H26O11 ≥95%

升麻Cimicifuga foetida Visnagin 甲氧呋豆素 82-57-5 C13H10O4 ≥95%

升麻 Cimicifuga foetida L. Isoferulic acid 异阿魏酸 537-73-5 C10H10O4 ≥98%

升麻 Cimicfuga goetida L. Cimifugin 升麻素 37921-38-3 C16H18O6 ≥98%

深山紫堇 Corydalis pallida(Thunb.)Pers. Cryptopine 隐品碱 482-74-6 C21H23NO5 ≥98%