ELISA试剂盒挑选有办法

上海邦景

2015/05/11 09:02

阅读：71

ELISA这个方法的原理，大家都很明白，网上的资料很多。可真正用起来的时候，偶然间就会有点犯糊涂，我谈一下自己的理解。

1、有些客户会用OVA（卵清卵白）做一些哮喘，过敏性肠炎的模型，然后会检测粘膜特异性的sIgA以及血清内里IgG，IgE等指标。当客户向我咨询购置这几个指标的试剂盒的时候，我很肯定地说这些指标的检测要你自己特制，不会有商品化的试剂盒出售的。当你百度一下时，页面出来大量的商品化的试剂盒，千篇一律的明书时候，我真的是蒙了，我怀疑自己跟不上时代了。我不去评论这些试剂盒的真假，我仍旧建议做这些检测指标的朋友，选择sigma公司V级别的OVA，然后用这个来造模，自己包板摸条件，用OD值来比较抗体含量的变化。

2、NO的检测，一般都是采用经典的Greiss法，如今市场上竟然有NO ELISA试剂盒，真是彻夜未眠也搞不明白。另外还有做氧化应激指标MDA的检测，我还是推荐各位用碧云天或者进口的检测试剂盒，而不是ELISA试剂盒。

3、ELISA检测方法简单，灵敏度高，我个人认为ELISA最适合检测血清或者培养上清的细胞因子、胰岛素、激素等排泄型的小分子卵白的定量检测；病原体抗原的定性与定量；评估自己制备的血清抗体的效价等。很多客户有个误区，拿来一个指标就想当然地尝试用ELISA去检测，我还是建议多动脑，该检测活性的检测活性，该做western的做western。

4、对付一些小分子的检测，例如：前线腺素、糖皮质激素的检测，我的理解是要用竞争法ELISA去检测，也要购买采用这个方法的盒试剂盒。ELISA试剂盒一般细胞因子的检测，都是采用常规的夹心法ELISA检测，由于因子分子量比力大，一般10几个KD左右，很容易找到两个或多个抗原表位。而小分子很难找到两个不通的表位，也就决定了包被抗体和检测抗体无法同时结合小分子并固相化。解决方案便是酶标板上包被二抗，每个孔加入一定量的酶标的小分子，然后加样品，再加不带标志的检测抗体，显色底物。样品的目标小分子的含量越高，吸光度越低。