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Elisa实验中牛奶样本收集方法

上海邦景

2015/05/04 09:06

阅读:47

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(a)牛奶前处理方法


┅┅取牛奶样本,3000g以上,10℃离心10min,吸除上层脂肪;


┅┅取5ml去除脂肪牛奶样本至10ml聚苯乙烯离心管中,加入150ulC液(见配液1)出现沉淀,振荡15s,再加入150ulD液(见配液2),振荡1min充分混合;


┅┅3000g以上,15℃离心10min,移取上层液;


┅┅用复溶工作液(见配液6)以等体积稀释上层液(1份上层液+1份复溶工作液);


┅┅取50ul用于分析。


注:如果离心后仍然浑浊,再重复脱脂过程。   


(b)牛奶前处理方法


┅┅取牛奶样本,3000g以上,10℃离心10min,吸除上层脂肪;


┅┅取5ml去除脂肪牛奶样本至10ml聚苯乙烯离心管中,加入250ulC液(见配液1)和250ulD液(见配液2)充分混合,3000g以上,4~12℃离心10min。(如没有冷冻离心机,请预先将样本冷却到8℃再进行离心);


┅┅移取2.2ml上层液(相当于2ml奶样)至另一个10ml聚苯乙烯离心管中,加入4ml乙酸乙酯上下振荡10min;


┅┅3000g以上,室温(20-25℃)离心10min ;


┅┅移取2ml乙酸乙酯上层有机相(相当于1ml奶样),至10ml干净的玻璃试管中,于50~60℃水浴氮气流下吹干;


┅┅加入0.5ml复溶工作液(见配液6),涡动2min溶解干燥的残留物;


┅┅取50ul用于分析。


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