T4 DNA连接酶9015-85-4英文名称:T4 DNA Ligase
CAS号:9015-85-4
分子量:55.3kDa,单体
级别:BR
T4 DNA连接酶9015-85-4贮存方法:储存于阴凉、通风的环境。远离火种、热源,库温不宜超过30℃。
郑重承诺:发货时均附上质检报告、使用说明书和用法用量,提供正规的专业发票,为客户提供满意放心产品,绝不生产销售假冒伪劣产品!
来源:含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌
活性定义:是指在ATP-PPi交换反应中,37℃、30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量(weiss单位,1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位:20ul反应体系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量)
抑制剂:当反应体系中NaC1或KC1的浓度超过200 mM时,可强烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加热10分钟或70℃加热5分钟
注意:T4 DNA Ligase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率,为避免此现象,电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下:样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存;转化时,连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%;电转化之前,先用氯方抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase,然后经乙醇沉淀纯化抽提产物
质量控制:测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能检测:粘性末端或平末端DNA的连接能力
性状(以下信息仅供参考):液体。该酶催化双链DNA或RNA中毗邻的5'磷酸基团和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键,还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA复合体中的单链切口,连接DNA的粘性和平末端,但该酶对单链核酸无酶活性。该酶需要辅因子ATP
用途:本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)粘性末端或平末端双链DNA的连接;双链寡核苷酸接头与双链DNA连接;双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复;连接酶介导的RNA检测;位点特异性突变;扩增片段长度多态性
保存: -20°C
T4 DNA连接酶9015-85-4稳定性强、梯度性好、超越ACS标准、低水分、低蒸发残渣、广泛应用于教学、科学研究、分析测试中,是进行化学实验、材料分析和精细化学品合成所必须的,保证不同批次产品的质量稳定低紫外吸收背景。
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主要优级纯、分级纯和化学纯3种:
(1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度最高,杂质含量最低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。
(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。
(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。
(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。
公司提供的T4 DNA连接酶9015-85-4品质保证,货源充足。严格的生产质量控制体系,包括:优级纯,分析纯,化学纯,试剂级,基准试剂,实验纯,教学试剂,高纯试剂,色谱纯,光谱纯,电子纯。各种包装规格,并可提供包装定制,欢迎来电咨询订购。
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