人神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒说明书
产品性状：盒装液体。
人神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒说明书提供免费检测服务，公司将根据实验工作量和难易程度，双方协定实验周期，保质保量完成委托实验，只收取试剂盒的
费用，其他辅助试剂全部免费。
运输条件：2-8℃低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。
待检样本：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到
100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀
浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
人神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒说明书操作步骤：
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取
100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔
中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到
第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/L
，15 ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终
稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
“人神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒说明书 ”的相关介绍与试剂盒：
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人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒 Human intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA试剂盒 96T/48T
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人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA试剂盒 Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA试剂盒 96T/48T
人血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒 Human Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA试剂盒 96T/48T
人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒 Human Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA试剂盒 96T/48T
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人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)ELISA试剂盒 Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 4,TRAIL-R4 ELISA试剂盒 96T/48T
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA试剂盒 Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA试剂盒 96T/48T
人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)ELISA试剂盒 Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1,TRAIL-R1 ELISA试剂盒 96T/48T
人肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒 Human Tumor necrosis factor β,TNF-β ELISA试剂盒 96T/48T
人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 Human Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA试剂盒 96T/48T
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人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒 Human Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-ⅠELISA试剂盒 96T/48T
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