大鼠KI-67ELISA检测试剂盒说明书

　　大鼠KI-67ELISA检测试剂盒说明书
　　产品性状：盒装液体。
　　大鼠KI-67ELISA检测试剂盒说明书提供免费检测服务，公司将根据实验工作量和难易程度，双方协定实验周期，保质保量完成委托实验，只收取试剂盒的费用，其他辅助试剂全部免费。
　　运输条件：2-8℃低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。
　　待检样本：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等。
　　样本处理及要求： 　　1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
　　2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
　　3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
　　4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
　　5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
　　6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
　　7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
　　大鼠KI-67ELISA检测试剂盒说明书操作步骤
　　1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/L，15 ng/L）。
　　2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
　　3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
　　4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
　　5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
　　6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
　　7. 温育：操作同3。
　　8. 洗涤：操作同5。
　　9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
　　10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
　　11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
　　"大鼠KI-67ELISA检测试剂盒说明书"的相关介绍与试剂盒
　　K-(Rat)-No1-01254 大鼠P物质(SP)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Substance P,SP ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-00689 大鼠抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)ELISA试剂盒;英文名称：Rat anti-myelin associated glycoprotein antibody,MAG Ab ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-02229 大鼠叉头框蛋白M1(FOXM1)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Forkhead Box Protein M1(FOXM1)ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-02251 大鼠表面活性物质关联蛋白J(SPJ)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Surfactant Associated Protein J(SPJ)ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-02335 大鼠β-内啡肽(βEP)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Beta-Endorphin(bEP)ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-00515 大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒;英文名称：rat Prostaglandin E1,PG-E1 ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-01727 大鼠生长分化因子5(GDF5)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Growth Differentiation Factor 5(GDF5)ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-01231 大鼠Toll样受体4(TLR4)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Toll-like receptor 4,TLR4 ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-00284 大鼠纤维蛋白原α链(Fga)ELISA试剂盒;英文名称：Rat fibrinogen alpha chain,Fga ELISA kit
　　K-(Rat)-No1-00008 大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Histone Deacetylase,HD ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-00810 大鼠肌酐(Cr)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Creatinine,Cr ELISA kit
　　K-(Rat)-No1-00924 大鼠干扰素诱导蛋白11(IP-11/CXCL11)ELISA试剂盒;英文名称：Rat interferon-inducible protein 11,IP-11 ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-00326 大鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Motilin,MTL ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-00149 大鼠胰岛素样因子3(INSL3)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Insulin-Like 3,INSL3 ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-02476 大鼠10kDa干扰素γ诱导蛋白(IP10)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Interferon Gamma Induced Protein 10kDa(IP10)ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-02094 大鼠肝癌源性生长因子(HDGF)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Hepatoma Derived Growth Factor(HDGF)ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-00003 大鼠组织因子前体(TF)ELISA试剂盒;英文名称： Rat Tissue Factor Precursor (TF) ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-02376 大鼠S100钙结合蛋白A6(S100A6)ELISA试剂盒;英文名称：Rat S100 Calcium Binding Protein A6(S100A6)ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-01699 大鼠酸性磷酸酶1(ACP1)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Acid Phosphatase 1(ACP1)ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-01117 大鼠白介素8(IL－8)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Interleukin8/IL-8 ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-00092 大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)ELISA试剂盒;英文名称：Rat regenerating gene 1a,REG-1a ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-00358 大鼠突触体素/突触素(Syp/SYN)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Synaptophysin,Syp ELISA kit
　　K-(Rat)-No1-01397 大鼠纤维连接蛋白(FN)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Fibronectin ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-00597 大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit
　　K-(Rat)-No1-02074 大鼠睾酮(Testosterone)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Testosterone
　　K-(Rat)-No1-00359 大鼠突触蛋白1(Syn1)ELISA试剂盒;英文名称：Rat Synapsin-1,Syn1 ELISA kit