酵母双杂交技术的作用详解

上海钰博

2016/07/08 17:28

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酵母双杂交技术的作用详解

酵母双杂交技术的应用
随着生物科学技术的不断发展，研究蛋白质的相互作用的技术日益完善，各种新技术也不断涌出。目前常见的方法有：酵母双杂交技术、pull down方法、免疫共沉淀方法、荧光共振能量转移技术、BioCore共振光谱学分析技术等。其中酵母双杂交技术作为经典的大规模筛选、发现和验证在活细胞体内的蛋白质与蛋白质之间的相互作用的技术和平台得到了广泛的应用。酵母双杂交技术仅仅需要基本的分子生物学和微生物学实验设备，不需要借助昂贵的大型仪器设备，适合在大多数生物学实验室开展。现在就酵母双杂交技术的应用领域做详细的介绍：

1、利用酵母双杂交技术发现研究新的蛋白质相互作用，并研究其功能细胞由成千上万的蛋白质组成，这些蛋白质之间具有复杂的相互作用，从酵母双杂交技术建立之初，该方法就成为研究蛋白质相互作用的重要手段之一。在研究某个蛋白的功能时，寻找与其相互作用的蛋白可以成为研究该蛋白功能提供重要的线索

2、利用酵母双杂交技术寻找奠定新的基因
酵母双杂交技术也是发现新基因、研究新基因功能的重要途径。在人类基因组计划完成之前，当我们将已知蛋白作为诱饵，在选定的cDNA文库中筛选与诱饵蛋白相互作用的蛋白质时，常常可以得到功能未知甚至未报道过的新基因编码序列，这种思路可以应用到其他动物未知基因的研究上。即使在人类基因组完成的今天，很多新基因也只是完成了序列测定，其功能尚不明确，在进行酵母双杂交筛选时，还是可以筛选到这些功能不明的新基因，从而为这些新基因的功能研究提供重要的线索。

3、利用酵母双杂技术建立蛋白质之间的相互作用的网络
随着蛋白质组学的发展，各个高通量的蛋白质技术日益成熟。酵母双杂交系统也向着这个方向进行改进，产生了“库”筛“库”的双杂交技术。该酵母双杂交技术不再以单个或者几个蛋白为诱饵，筛选特定的文库，而是利用文库直接筛选文库，从而得到文库中所有蛋白的相互作用的全景图。