大鼠可溶性血管内皮生长因子受体, ELISA

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ELISA实验操作注意事项：

大部分实验室在使用酶标仪之前是通过目测判断结果，操作过程随意性较大，在使用酶标仪后操作必须规范：

A. 使用移液器加液，移液枪头不能混用。

B. 洗板要干净，避免交叉污染。

C. 严格按照试剂盒的说明书操作，反应时间准确。

D. 请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部，操作完成注意做好清洁工作。

E. 不要在测量过程中关闭电源。

F. 对于因试剂盒问题造成的测量结果的偏差，应根据实际情况及时修改参数，以达到最佳效果。

G. 使用后盖好防尘罩。

H. 出现技术故障时应及时与厂家联系，切勿擅自拆卸酶标仪。

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试剂盒操作中出现的问题：现象、可能原因和解决办法：

1、 不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同，务必按照所用试剂盒严格操作，否则容易产生检测结果的不确定性.

2、 若不同批号试剂的不同组分（A液或酶工作液），或不同试剂的不同组分进行交叉使用，有可能出现显色浅或本底高，花板等情形。

3、 加样时样品量误差，对于阴或很阳的标本影响不大，但对阈值附近的标本影响极大，建议校对加样器。

4、 反应时间的误差，做大量标本时，第一孔和最后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。

5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加样器，不排除不同滴头滴量的误差。另外滴加过程中是否产生气泡、速度是否均匀，是否颤动等影响液量的因素均可导致以上情况。高标准要求时应使用加样器。

6、 阈值附近实际上是个灰区（gray scale）,不能截然分为阴性、阳性，国外厂家均要求对这部分可疑标本进行奇数次复检，以次数多者为准，如一次阳两次阴最后判为阴，但实际上是否为阴不好说，只有判为可疑，临床上可以让患者过一段时间后再测。

7、 肉眼观察稍显色，酶标仪打印为阴性的标本在实际工作中是难以避免的，肉眼目测结果不可靠，应以酶标仪判读为准。

8、 由阴性变为强阳性原因多为操作过程中漏加试剂等有关。

9、 临界值附近标本波动为正常现象，任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。

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