大鼠白介素2可溶性受体α链,IL-2sRαELISA

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大鼠白介素2可溶性受体α链含量检测,大鼠IL-2sRα/CD25 ELISA检测试剂盒常见问题：

1.加样量不一致？

解决方法：样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴。

2.样品数量多少不一，加样时间有长有短？

解决方法：重复某一样品时，加样时间尽可能与第一次接近。

3.保温时间不一致，洗涤条件不一致，操作人员不一致？

解决方法：重复测定标本，操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致，以排除这些因素造成的不一致的可能性。

ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。

大鼠白介素2可溶性受体α链含量检测,大鼠IL-2sRα/CD25 ELISA检测试剂盒ELISA的血样本在收集、处理和保存方面要考虑的几个问题

(1)标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。

(2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染。一是细菌的生长所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二是一些细菌的内源性酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。

(3)血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2～8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。

(4)冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。

(5)要注意避免出现溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,如血清标本中血红蛋白浓度较高,就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。

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