大鼠Ⅱ型胶原含量检测,大鼠Col Ⅱ ELISA

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常见问题：

1.加样量不一致？

解决方法：样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴。

2.样品数量多少不一，加样时间有长有短？

解决方法：重复某一样品时，加样时间尽可能与第一次接近。

3.保温时间不一致，洗涤条件不一致，操作人员不一致？

解决方法：重复测定标本，操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致，以排除这些因素造成的不一致的可能性。

ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。 但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。

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ELISA试剂盒的清洗操作注意事项

 (1)试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

(2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

(3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

(4)使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

(5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

(6)洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

(7)底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

(8)加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

(9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

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