磷酸化钠钾ATP酶α1多肽抗体

{英文名称}phospho-Na+/K+-ATPase Alpha1(Ser 943) 

{中文名称}磷酸化钠钾ATP酶α1多肽抗体

{规格}：0.1ml  0.2ml  

{研究领域}肿瘤  细胞生物  神经生物学  信号转导  新陈代谢  

{抗体来源}Rabbit

{克隆类型}Polyclonal

{交叉反应}Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, 

{产品应用}WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 （石蜡切片需做抗原修复） 

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

｛分 子 量｝50kDa

｛性    状｝Lyophilized or Liquid

｛浓    度｝1mg/1ml

｛免 疫 原｝KLH conjugated synthetic peptide derived from human ALDH3A1

｛亚    型｝IgG

｛纯化方法｝affinity purified by Protein A

｛储 存 液｝Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

｛保存条件｝Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

PubMedPubMed

免疫荧光技术磷酸化钠钾ATP酶α1多肽抗体的实验步骤

1. 直接免疫荧光法测抗原

⑴基本原理

将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高，非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低；而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。

⑵试剂与仪器

磷酸盐缓冲盐水（PBS）：0.01mol/L，pH7.4

荧光标记的抗体溶液：以0.01mol/L，pH7.4的PBS进行稀释

缓冲甘油：分析纯无荧光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸盐缓冲液1份配制

搪瓷桶三只（内有0.01mol/L，pH7.4的PBS 1500ml）

有盖搪瓷盒一只（内铺一层浸湿的纱布垫）

荧光显微镜

玻片架

滤纸

37℃温箱等。

⑶磷酸化钠钾ATP酶α1多肽抗体实验步骤

① 滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，10min后弃去，使标本保持一定湿度。

② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间（参考：30min）。

③ 取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸3-5 min，不时振荡。

④ 取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度，一般可用“+”表示：

（-）无荧光；（±）极弱的可疑荧光；（+）荧光较弱，但清楚可见；（++）荧光明亮；（+++ --++++）荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上，而各种对照显示为（±）或（-），即可判定为阳性。

⑷注意事项

1）对荧光标记的抗体的稀释，要保证抗体的蛋白有一定的浓度，一般稀释度不应超过1：20，抗体浓度过低，会导致产生的荧光过弱，影响结果的观察。

2）染色的温度和时间需要根据各种不同的标本及抗原而变化，染色时间可以从10 min到数小时，一般30 min已足够。染色温度多采用室温（25℃左右），高于37℃可加强染色效果，但对不耐热的抗原（如流行性乙型脑炎病毒）可采用0-2℃的低温，延长染色时间。低温染色较37℃30 min效果好的多。

3）为了保证荧光染色的正确性，首次试验时需设置下述对照，以排除某些非特异性荧光染色的干扰。

① 标本自发荧光对照：标本加1-2滴0.01mol/L，pH7.4的PBS。

② 特异性对照（抑制试验）：标本加未标记的特异性抗体，再加荧光标记的特异性抗体。

③ 阳性对照：已知的阳性标本加荧光标记的特异性抗体。

如果标本自发荧光对照和特异性对照呈无荧光或弱荧光，阳性对照和待检标本呈强荧光，则为特异性阳性染色。

4）一般标本在高压汞灯下照射超过3min，就有荧光减弱现象，经荧光染色的标本最好在当天观察，随着时间的延长，荧光强度会逐渐下降。

免疫组化问题解答:

1 染色过强

原因 解决方法

a 抗体浓度过高或孵育时间过长 降低抗体滴度、抗体孵育时间：室温1小时或4度过夜

b 孵育温度过高超过37度 一般在室温20-28度

c DAB显色时间过长或浓度过高 显色时间不超过5-12分钟，以显微镜下观察为准

2 非特异性背景染色

原因 解决方法

a 操作过程中冲洗不充分 每步冲洗3次每次5分钟

b 组织中含过氧化物酶未阻断 可再配置新鲜3%H2O2封闭孵育时间延长

c 组织中含内原性生物素 正常非免疫动物血清再封闭

d 血清蛋白封闭不充分 延长血清蛋白封闭时间

3 染色弱

A0233 拟人参皂苷F11 Pseudoginsenoside- F11 HPLC≥98% 20mg/支 69884-00-0

A0234 人参皂苷Rb1 Ginsenoside Rb1 HPLC≥98% 20mg/支 41753-43-9

A0235 人参皂苷Rb2 Ginsenoside Rb2 HPLC≥98% 20mg/支 11021-13-9

A0236 人参皂苷Rb3 Ginsenoside Rb3 HPLC≥98% 20mg/支 68406-26-8

A0237 人参皂苷Rg1 Ginsenoside Rg1 HPLC≥98% 20mg/支 22427-39-0

A0238 人参皂苷Rg2 Ginsenoside Rg2 HPLC≥98% 20mg/支 52286-74-5

A0239 人参皂苷Rg3 Ginsenoside Rg3 HPLC≥98% 20mg/支 14197-60-5

A0240 人参皂苷Rh1 Ginsenoside Rh1 HPLC≥98% 20mg/支 63223-86-9

A0241 人参皂苷Rh2 Ginsenoside Rh2 HPLC≥98% 20mg/支 78214-33-2

A0904 拟人参皂苷Rh2 Pseudoginsenoside Rh2 HPLC≥98% 5mg/支 1370264-16-6

A0242 人参皂苷Rh3 Ginsenoside Rh3 HPLC≥98% 20mg/支 105558-26-7

A0243 人参皂苷Rc Ginsenoside Rc HPLC≥98% 20mg/支 11021-14-0

A0244 人参皂苷Re Ginsenoside Re HPLC≥98% 20mg/支 52286-59-6

A0245 人参皂苷Rd Ginsenoside Rd HPLC≥98% 20mg/支 52705-93-8

A0246 人参皂苷Rf Ginsenoside- Rf HPLC≥98% 20mg/支 52286-58-5

A0247 拟人参皂苷RT5 Pseudoginsenoside-RT5 HPLC≥98% 20mg/支 98474-78-3

A0249 原人参三醇 Protopanaxatriol HPLC≥98% 20mg/支 34080-08-5

A0313 (R型)人参皂苷Rh1 Ginsenoside Rh1 HPLC≥98% 20mg/支

A0328 (R型)人参皂苷Rh2 Ginsenoside Rh2 HPLC≥98% 20mg/支 112246-15-8

A0350 (R型)人参皂苷Rg2 Ginsenoside Rg2 HPLC≥98% 20mg/支 80952-72-3

A0359 (R型)人参皂苷Rg3 Ginsenoside Rg3 HPLC≥98% 20mg/支 38243-03-7

A0360 (R型)原人参三醇 Protopanaxtriol HPLC≥98% 20mg/支 1453-93-6

A0448 人参皂苷F1 Ginsenoside F1 HPLC≥98% 20mg/支 53963-43-2

磷酸化钠钾ATP酶α1多肽抗体

A0449 人参皂苷F2 Ginsenoside F2 HPLC≥98% 20mg/支 62025-49-4

A0450 人参皂苷CK Compound K HPLC≥98% 20mg/支 39262-14-1

A0460 (R型)原人参二醇 Protopanaxdiol HPLC≥95% 20mg/支 30636-90-9

A0522 人参皂苷Ro Ginsenoside Ro HPLC≥98% 20mg/支 34367-04-9

A0648 人参皂苷F3 Ginsenoside F3 HPLC≥98% 10mg/支 62025-50-7

A0774 人参皂苷Rg6 Ginsenoside Rg6 HPLC≥98% 20mg/支

A0775 人参皂苷Rk1 Ginsenoside Rk1 HPLC≥95% 20mg/支

A0250 人参二醇 Panaxadiol HPLC≥98% 20mg/支 19666-76-3

A0251 人参三醇 Panaxtriol HPLC≥98% 20mg/支 32791-84-7

A0248 原人参二醇 Protopanaxdiol HPLC≥98% 20mg/支 30636-90-9

A0257 柴胡皂苷A Saikosaponin A HPLC≥98% 20mg/支 20736-09-8

A0258 柴胡皂苷C Saikosaponin C HPLC≥98% 20mg/支 20736-08-7

A0259 柴胡皂苷D Saikosaponin D HPLC≥98% 20mg/支 20874-52-6

A0034 柴胡皂苷B Saikosaponin B HPLC≥98% 20mg/支

A0260 柴胡皂苷B1 Saikosaponin B1 HPLC≥98% 20mg/支 58558-08-0

A0261 柴胡皂苷B2 Saikosaponin B2 HPLC≥98% 20mg/支 58316-41-9

A0442 山奈苷 Kaempferitrin;Lespedin; Lespenephryl HPLC≥98% 20mg/支 482-38-2

A0273 三七皂苷R1 Notoginsenoside R1 HPLC≥98% 20mg/支 80418-24-2