人ELISA试剂盒有着准确性高、灵敏度高、特异性强的诸多优点,在实验室的应用已经相当普及,绝大多数是用于检测未知样本中抗原的浓度。现在市面上的人ELISA试剂盒既有国产也有进口,数量繁多令人目不暇接,而且质量也是参差不齐,那么我们怎样才能选出最适用的产品呢?首先要根据我们所要检测的分子进行检测,除此以外也还有一些需要加以考量的因素。
如果抗体间发生冲突或交叉反应就会影响整个实验的特异性。其中抗体来源所带来的兼容性就是交叉反应的一个因素。尽管现在购买源自指定动物的抗体越来越容易,我们仍有必要确认一下是否会产生交叉反应的问题。在用双抗夹心法进行人ELISA试剂盒检测时,检测用的二抗必须特异性针对检测一抗,而不能与捕获抗体起反应。如果检测用二抗与捕获抗体结合,实验特异性就会大打折扣。通常我们选用源自不同宿主的捕获抗体和检测一抗,来避免上述问题。
与此同时,了解试剂盒中提供的buffer也是有必要的(例如washing buffer和blocking buffer),以免这些buffer含有可能影响抗原抗体相互作用的组分,使检测结果收到影响。
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