通用型LAMP试剂盒使用说明书

2015-04-21 16:57

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资料摘要：

1. 在冰上溶解除酶外的各种组份，混匀，稍离心。在反应管中加入以下组份：注：如在反应管中加入本公司PCR级绿如蓝染料1uL（水则少加1 uL），则可直接在荧光定量PCR仪中进行荧光定量检测。 2. 混匀，置于60-65℃保温30-120分钟。注意：如果不使用Loop引物，则最好保温2小时；如果使用Loop引物，则最好保温30分钟。 3. 80℃10分钟灭活Bst DNA聚合酶。 4. 产物置于-20℃备用或立即用于下游检测。扩增产物可选下列方法之一检测: 1）琼脂糖凝胶电泳。取扩增产物5 uL，1-2%的琼脂糖凝胶电泳，可见LAMP特征性电泳图谱； 2）向扩增产物中直接加入本公司PCR级绿如蓝染料（另售）1 uL，混匀，稍离心。将反应管置于紫外透射仪或凝胶成像系统中，紫外灯下可见绿色荧光产生； 3）荧光定量检测。 5. 结果分析： 1）如果没有扩增，则需要用本试剂提供的阳性对照进行扩增。本试剂盒提供5次阳性对照，反应按下表设置：混匀后，置于60℃保温120分钟，其余操作同上。注意：本对照引物中没有Loop引物，所以最好保温2小时。如果阳性对照能够扩增出，则说明试剂盒没有问题，可能是模板或引物的问题。如果阳性对照没有扩增出条带，则是试剂盒的问题，

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