在小鼠肽聚糖识别蛋白1(PGLYRP1)ELISA试剂盒中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在ELISA中似不恰当。
ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。
温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立小鼠肽聚糖识别蛋白1(PGLYRP1)ELISA试剂盒方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时,产物的生成可达顶峰。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成最多的沉淀。但因所需时间太长,在小鼠肽聚糖识别蛋白1(PGLYRP1)ELISA试剂盒中一般不予采用。
保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外,一般均采用水浴,可将ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度迅速平衡。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱,ELISA板应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,最后将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应,操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指20-25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时,ELISA板只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板同时测定。
小鼠肽聚糖识别蛋白1(PGLYRP1)ELISA试剂盒检测方法简单,灵敏度高,我个人觉得ELISA最适合检测血清或者培养上清的细胞因子、胰岛素、激素等分泌型的小分子蛋白的定量检测;病原体抗原的定性与定量;评估自己制备的血清抗体的效价等。好多客户有个误区,拿来一个指标就想当然地尝试用ELISA去检测,我还是建议多动脑,该检测活性的检测活性,该做western的做western。
xyB492Ra 大鼠鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Ornithine Carbamoyl TransferaHZ (OCT)
xyB542Ra 大鼠甘露糖受体C1(MRC1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for MannoHZ ReHZptor C Type 1 (MRC1)
xyB266Ra 大鼠胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Glucagon (GC)
xyB686Ra 大鼠B-细胞激活因子(BAFF)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for B-HZll Activating Factor (BAFF)
xyB974Ra 大鼠血小板反应蛋白解整合素金属肽酶7(ADAMTS7)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for A Disintegrin And MetalloproteinaHZ With Thrombospondin 7 (ADAMTS7)
xyF415Ra 大鼠内皮素2(EDN2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Endothelin 2 (EDN2)
xyH515Ra 大鼠神经疾病靶标酯酶(NTE)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Neuropathy Target EsteraHZ (NTE)
xyH757Ra 大鼠Klotho蛋白(KL)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Klotho (KL)
xyC109Ra 大鼠生长分化因子3(GDF3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3)
xyA596Ra 大鼠铜伴侣超氧化物歧化酶(SOD4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Superoxide DismutaHZ, Copper Chaperone (SOD4)
xyE045Ra 大鼠大麻素受体2(CNR2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Cannabinoid ReHZptor 2, Macrophage (CNR2)
xyB831Ra 大鼠音猬因子(SHH)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Hedgehog Homolog, Sonic (SHH)
xyD116Ra 大鼠印度刺猬因子(IHH)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Hedgehog Homolog, Indian (IHH)
xyC585Ra 大鼠尿皮质素2(UCN2)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Urocortin 2 (UCN2)
xyD140Ra 大鼠尿皮质素3(UCN3)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Urocortin 3 (UCN3)
xyJ292Ra 大鼠白蛋白启动子D位点结合蛋白(DBP)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for D Site Of Albumin Promoter Binding Protein (DBP)
xyD963Ra 大鼠神经生长因子诱导蛋白B(NGFIB)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Nerve Growth Factor IB (NGFIB)
xyF589Ra 大鼠微纤丝关联蛋白4(MFAP4)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Microfibrillar Associated Protein 4 (MFAP4)
xyC781Ra 大鼠转胶蛋白(TAGLN)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Transgelin (TAGLN)
xyC675Ra 大鼠神经元衍生孤儿受体1(NOR1)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Neuron Derived Orphan ReHZptor 1 (NOR1)
xyH922Ra 大鼠亨廷顿蛋白(HTT)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Huntingtin (HTT)
xyD067Ra 大鼠Apelin受体(APLNR)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Apelin ReHZptor (APLNR)
xyG439Ra 大鼠小白蛋白(PVALB)ELISA试剂盒原理 ELISA Kit for Parvalbumin (PVALB)