DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极移动。
制备琼脂糖凝胶DNAzol 基因组DNA快速提取试剂
1 .称 1. 2g 琼脂糖,加 100ml 电泳缓冲液( 1×TAE )加热熔化,取出摇匀,即为 1. 2% 的凝胶。
2. 当胶液冷至 60℃ 时,加 EB10μl ,小心混匀,缓慢倒入制胶模具中,在胶一端插上梳子。
3 .待胶凝固后,拨出梳子,将模具置于电泳槽中,加入 1×TAE ,让液面高于胶面 2 -3mm 。
4 .取 4ul 质粒,加 2ul lodaing buffer , 6ulddH 2 O ,混匀,用加样器吸取样品。加入点样孔中,注意加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中,不可刺穿凝胶,也要防止将样品溢出孔外。
5 .接通电源, 1-5V/cm 电压,开始电泳。DNAzol 基因组DNA快速提取试剂
6 .当溴酚兰染料移动到距离胶前沿 1 -50px 处,停止电泳。
7. 切断电源后,取出凝胶,在紫外灯( 360nm 、 312nm 或 254nm )下或经凝胶成像系统观察或拍照。
y-E10889 人T细胞特异性鸟苷三磷酸酶(Tgtp)ELISA试剂盒96t/48t Human T-cell specific GTPase,Tgtp ELISAkit
xy-E10890 人法尼基二磷酸法尼基转移酶1(FDFT1)ELISA试剂盒96t/48t Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1,FDFT1
ELISAkit
xy-E10891 人D-乳酸脱氢酶(D-LDH) ELISA试剂盒96t/48t Human D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISAkit
xy-E10892 人α1抗胰蛋白酶(α1-AT)ELISA试剂盒96t/48t Human α1-Antitrypsin,α1-AT ELISAkit
xy-E10893 人激肽释放酶1(KLK 1)ELISA试剂盒96t/48t Human Kallikrein 1,KLK 1 ELISAkit
xy-E10894 人磷酸化乙酰辅酶A(PaCoA)ELISA试剂盒96t/48t Human Phosphorylated acetyl CoA,PaCoA ELISAkit
xy-E10895 人磷酸甘油酸变位酶2(PGAM2)ELISA试剂盒96t/48t Human phosphoglycerate mutase 2,PGAM2 ELISAkit
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xy-E10897 人肽酰脯氨酰异构酶(亲环蛋白)样1(PPIL1)ELISA试剂盒96t/48t Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like
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DNAzol 基因组DNA快速提取试剂
activated protein kinase 3,MAPKAPK3 ELISAkit
xy-E10899 人血管紧张素Ⅰ转化酶(ACEⅠ)ELISA试剂盒96t/48t Human Angiotensin Ⅰ Converting Enzyme,ACEⅠ ELISAkit
xy-E10900 人抑肽酶(AP)ELISA试剂盒96t/48t Human Aprotinin,AP ELISAkit
xy-E10901 人胱天蛋白酶12(Casp-12)ELISA试剂盒96t/48t Human Caspase 12,Casp-12 ELISAkit
xy-E10902 人蛋白激酶A(PKA)ELISA试剂盒96t/48t Human Protein kinase A,PKA ELISAkit
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xy-E10904 人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒96t/48t Human matrix metalloproteinase 11,MMP11 ELISAkit
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xy-E10906 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA试剂盒96t/48t Human thymidinephosphorylase,TP ELISAkit
xy-E10907 人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA试剂盒96t/48t Human Poly ADP ribose polymerase,PARP ELISAkit
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 这个狭窄的范围内,线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入 Ph4. 8 的乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时,共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕成网状结构,通过离心,染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA 、蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。
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