大鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒

大鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒仅供研究使用

检测范围1μg/L-60μg/L

使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中大鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)含量。

实验原理

大鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)水平。用纯化的大鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入大鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)，再与HRP标记的大鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)浓度。

试剂盒组成

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1.         标准品的稀释：提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.         加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.         温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  

4.         配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.         洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.         温育：操作同3。

8.         洗涤：操作同5。

9.         显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10.     终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.     测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

计算

  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释大鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项

1．从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．  请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1．大鼠血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月

xyB972Bo 牛色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Pigment Epithelium Derived Factor (PEDF) 

xyA037Bo 牛纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Fibronectin (FN) 

xyA543Bo 牛免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Immunoglobulin M (IgM) 

xyB472Bo 牛碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Alkaline Phosphatase (ALP) 

xyB023Bo 牛β-乳球蛋白(βLg)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Beta-Lactoglobulin (bLg) 

xyB081Bo 牛70kDa热休克蛋白1A(HSPA1A)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 1A (HSPA1A) 

xyD523Bo 牛90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Heat Shock Protein 90kDa Alpha A1 (HSP90aA1) 

xyM974Bo 牛顶体后致密板WW域结合蛋白(PAWP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Postacrosomal Sheath WW Domain Binding Protein 

(PAWP)

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xyJ333Bo 牛酪蛋白α(CSN1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Casein Alpha (CSN1) 

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xyH097Bo 牛亚硫酸盐氧化酶(SUOX)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Sulfite Oxidase (SUOX) 

xyA626Bo 牛胱天蛋白酶3(CASP3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Caspase 3 (CASP3) 

xyA778Bo 牛B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2) 

xyA819Bo 牛甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP) 

xyB343Bo 牛Bcl2关联X蛋白(Bax)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Bcl2 Associated X Protein (Bax) 

xyC032Bo 牛白介素22(IL22)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 22 (IL22) 

xyD522Bo 牛90kDa热休克蛋白αB1(HSP90αB1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Heat Shock Protein 90kDa Alpha B1 (HSP90aB1) 

xyA228Bo 牛抗缪勒管激素(AMH)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Anti-Mullerian Hormone (AMH) 

xyA760Bo 牛抑制素B(INHB)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Inhibin B (INHB) 

xyB860Bo 牛胎球蛋白B(FETUB)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Fetuin B (FETUB) 

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xyA301Bo 牛70kDa热休克蛋白1B(HSPA1B)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 1B (HSPA1B) 

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xyB373Bo 牛防御素β1(DEFβ1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Defensin Beta 1 (DEFb1) 

xyE132Bo 牛防御素β103A(DEFβ103A)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Defensin Beta 103A (DEFb103A) 

xyA238Bo 牛酪胺酸酶(TYR)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Tyrosinase (TYR) 

xyA013Bo 牛骨成型蛋白2(BMP2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) 

xyA015Bo 牛骨成型蛋白受体1A(BMPR1A)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein Receptor 1A (BMPR1A) 

xyA553Bo 牛基质金属蛋白酶9(MMP9)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9) 

CEA806Bo 牛β-内啡肽(βEP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Beta-Endorphin (bEP) 

HEA248Ge 牛血清白蛋白(BSA)ELISA试剂盒96t/48t(酶联免疫吸附试验法，高敏) High Sensitive ELISA Kit for Bovine Serum Albumin