MonoMac6人急性单核细胞白血病细胞
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生长特性 悬浮细胞
细胞形态 悬浮的单个、圆形/多形性细胞或小细胞群,有时松散粘附
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养方案A(默认)
生长培养基:
RPMI-1640+10% FBS+10μg/ml Insulin +1% P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%, 温度:37℃
推荐传代比例 1:3-1:5
推荐换液频率 2-3次/周
参考资料(来源文献)
背景描述 established from the peripheral blood of a 64-year-old man with relapsed acute monocytic leukemia (AML FAB M5) in 1985 following myeloid metaplasia; carries t(9;11)(p22;q23) leading to KMT2A-MLLT3 (MLL-MLLT3; MLL-AF9) fusion gene。
年龄(性别) 男性;64岁
组织来源 外周血
细胞类型 肿瘤细胞
肿瘤类型 白血病细胞
生物安全等级 BSL-1
倍增时间 ~60 hours (DSMZ=ACC-124)
保藏机构 DSMZ; ACC-124
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细胞培养的步骤:
![8.png 8.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/46a269ba-5661-41ba-bac0-6d728f0c3c6c.jpg)
细胞培养前的准备:
细胞变质的征象包括核周出现颗粒、细胞与基质解离以及细胞质空泡形成。
这些变质征象可能为多种原因所致,例如:培养物污染、细胞系衰老或培养基中存在毒性物质,或者这些征象仅表明培养物需要更换培养基。
变质严重时将会成为不可逆的变化。
细胞培养通风橱的消毒及布局
保持细胞培养通风橱内的整洁有序,将所有物品置于直视范围内。
向放入通风橱内的所有物品喷洒70%乙醇,擦拭清洁进行消毒。
在通风橱中部开阔处放置细胞培养容器;移液器置于右前方易于取用;试剂和培养基置于右后方便于吸取;试管架置于中后部;小型容器置于左后部用于盛放废液。
培养瓶/皿等物品的无菌操作
细胞培养污染物主要分为两类:
化学污染物,如培养基、血清和水中的杂质、内毒素、增塑剂和去污剂。
生物污染物,如细菌、霉菌、酵母、病毒、支原体以及其他细胞系的交叉污染。
可通过充分了解污染源以及采用良好的无菌技术,降低污染发生的频率和严重程度。
细胞系要求及注意事项:
![8.png 8.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/de39b95c-4e86-48b6-8f9b-09d336247936.jpg)
![QQ20240815-155746.png QQ20240815-155746.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/26393656-7935-41a9-b4d2-90fdda0d6928.jpg)
实验中建立细胞系有以下要求:
1、组织来源:
细胞供体所属物种,来自人体或者动物;
个体性别、年龄;取材的器官或组织。
如系肿瘤组织,应说明临床和病理诊断,以及病li号等。
2、细胞生物学检测:
了解细胞一般和特殊的生物学性状,如细胞一般形态,特异结构,细胞生长曲线和分裂指数,倍增时间,接种率等。
如为肿瘤细胞,为说明来源于原肿瘤组织并保持恶性,须做软琼脂培养,异体接种致瘤和对正常组织侵润力等实验。
3、培养条件和方法:
应说明细胞系(或株)适应的生存环境,即指明使用的培养基、血清种类、用量以及适宜PH值。
实验中建立细胞系需要注意事项:
1. 细胞的来源和健康程度需要保证,不能使用受到污染或者有疾病的细胞。
2. 实验室需要保持清洁和卫生,定期进行消毒,以避免细胞受到感染。
3. 细胞需要充足的营养和生长因子,以促进其生长和繁殖。
4. 温度和湿度的控制对于细胞的生长也非常重要,实验室需要有恒温恒湿设备。
5. 实验室需要配备各种安全设备,例如防火设备、急救箱等,保证实验的顺利进行和人员的安全。
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