ELISA试剂盒研究与猪肺炎支原体抗体的关系

ELISA试剂盒研究与猪肺炎支原体抗体的关系

实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪肺炎支原体抗体（MP-Ab）水平。ELISA试剂盒用纯化的猪肺炎支原体抗体（MP-Ab）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加肺炎支原体抗体（MP-Ab），再与 HRP 标记的肺炎支原体抗体（MP-Ab）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。ELISA试剂盒TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肺炎支原体抗体（MP-Ab）呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中猪肺炎支原体抗体（MP-Ab）浓度。
猪肺炎支原体抗体ELISA试剂盒注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，ELISA试剂盒试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。