您好,欢迎访问仪器信息网
注册
上海盈公实业有限公司

关注

已关注

已认证

粉丝量 0

当前位置: 上海盈公 > 资料中心 > ELISA试剂盒操作步骤

ELISA试剂盒操作步骤

2015-03-16 16:11

浏览:45

分享:

资料摘要:

方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:   1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。   2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。   3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。   4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。   5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。   6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

下载本篇资料:

资料文件名:
资料大小
下载
新建icrosoftord文档.doc
16KB

相关资料

猴子麻疹病毒抗体(MV Ab)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 96 使用目的: 本试剂盒用于测定猴子血清、血浆及相关液体样本中麻疹病毒抗体(MV Ab)表达。 实验原理 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中猴子麻疹病毒抗体(MV Ab)表达。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中麻疹病毒抗体(MV Ab)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中猴子麻疹病毒抗体(MV Ab)的存在与否。 注意事项 1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。 2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 5.底物请避光保存。 6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm 7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6个月

鸡D-乳酸(D-Lactate)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围:96T 15μg/L -400μg/L 使用目的: 本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中D-乳酸(D-Lactate)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡D-乳酸(D-Lactate)水平。用纯化的鸡D-乳酸(D-Lactate)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入D-乳酸(D-Lactate),再与HRP标记的D-乳酸(D-Lactate)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的D-乳酸(D-Lactate)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡D-乳酸(D-Lactate)浓度。 注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6个月

斑马鱼酰基辅酶A(Acyl-Coa)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围: 96T 12 U/L -550 U/L 使用目的: 本试剂盒用于测定斑马鱼血清、血浆及相关液体样本中酰基辅酶A(Acyl-Coa)活性。 注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6个月

大肠杆菌耐热性肠毒素(ST)酶联免疫分析试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围:96T 3.0pg/ml-80pg/ml 使用目的: 本试剂盒用于测定幼儿食品样本中大肠杆菌耐热性肠毒素(ST)含量。注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6个月

推荐产品
供应产品

上海盈公实业有限公司

沟通底价

提交后,商家将派代表为您专人服务

获取验证码

{{maxedution}}s后重新发送

获取多家报价,选型效率提升30%
提交留言
点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》 且同意关注厂商展位

仪器信息网APP

展位手机站