人正常肝细胞；L-02

人正常肝细胞；L-02

培养条件

RPMI-1640；20%胎牛血清

基本特性

细胞生长：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

细胞数量：1×106个细胞数

细胞传代：1:2传代

细胞特性：L-02细胞株是人正常肝细胞。细胞群体倍增时间约为20小时。细胞形态呈上皮样细胞。在电子显微镜下亦显示上皮细胞所具有的桥粒和张力原纤维；L-02肝细胞增殖迅速；AFP与CK-19表达阴性；ALB表达在10μg／ml水平；部分细胞多次传代后发生形态变异；ALB表达缺失

细胞纯度：95％

细胞活力：93％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）

细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

人正常肝细胞；L-02产品注明

细胞冻存：液氮冻存（基础培养基+10%DMSO+20%FBS）

细胞运输：干冰运输（1Vial）或活细胞运输（T-25flasks）

细胞用途：只可用于科研；不可用于临床诊断和治疗

细胞中的黑点，是经常有的事情，并不是细胞不够好，也不是灭菌技术部过关，有些是细胞本身带的，环境有的，还有人身上带进细胞间的，还有就是血清和培养基，主要分以下几种情况：

第一种情况：如果人正常肝细胞；L-02小黑点有增殖趋势，则有可能是细菌、真菌或支原体污染，需要处理。

第二种情况：如果小黑点没有增殖趋势，且不影响细胞生长，也不影响实验的话，则可能有以下情况：

1）是“黑胶虫”，2）是核糖体，也可能是杂质3）是细胞碎片，或血清中的里德沉淀析出，在做布朗运动。

处理细胞黑点的一些好的意见：

换好一点的血清(我觉着和血清的关系不大)；如果是贴壁细胞的话，可用无菌的PBS洗几次，可一定程度上缓解。若是悬浮的话，就不太好处理，可以向其中少加一点滋养细胞(从小鼠腹腔内取的巨噬细胞，这种细胞不分裂，过一阵就死掉了，做抗体杂交瘤融合的同志肯定知道)。加滋养细胞对有黑胶虫的刚复苏的细胞很有效！还有就是实验环境要注意好，保持细胞间整个环境的洁净度；换用进口的一次性塑料培养瓶；建议清理无菌室所有物品，人正常肝细胞；L-02重新灭菌，用KMnO4熏蒸，按首次使用无菌室做，细胞重新复苏；在换液前先加入生理盐水并轻轻拍打，冲洗干净后再加入培养液，坚持天天洗，传代时加生理盐水再离心一次，接种密度稍大一些，一段时间后，虫子就会大大减少，对细胞的生长也不会有大的影响；有材料称minocycline具有一定的作用，可以和换液结合起来使用。

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