人乳腺导管瘤细胞;BT-474
培养条件
RPMI1640(w/oHepes);20%FBS
基本特性
细胞生长:贴壁生长
细胞形态:上皮样;圆形、成团
细胞数量:1×106个细胞数
细胞传代:1:3传代
细胞特性:该细胞系由LasfarguesE和CoutinhoWG建立;源于一名60岁患有浸润性乳腺导管癌的白人女性的实体瘤
细胞纯度:94%
细胞活力:90%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
人乳腺导管瘤细胞;BT-474产品注明
细胞冻存:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1Vial)或活细胞运输(T-25flasks)
细胞用途:只可用于科研;不可用于临床诊断和治疗
细胞中的黑点,是经常有的事情,并不是细胞不够好,也不是灭菌技术部过关,有些是细胞本身带的,环境有的,还有人身上带进细胞间的,还有就是血清和培养基,主要分以下几种情况:
第一种情况:如果人乳腺导管瘤细胞;BT-474小黑点有增殖趋势,则有可能是细菌、真菌或支原体污染,需要处理。
第二种情况:如果小黑点没有增殖趋势,且不影响细胞生长,也不影响实验的话,则可能有以下情况:
1)是“黑胶虫”,2)是核糖体,也可能是杂质3)是细胞碎片,或血清中的里德沉淀析出,在做布朗运动。
处理细胞黑点的一些好的意见:
换好一点的血清(我觉着和血清的关系不大);如果是贴壁细胞的话,可用无菌的PBS洗几次,可一定程度上缓解。若是悬浮的话,就不太好处理,可以向其中少加一点滋养细胞(从小鼠腹腔内取的巨噬细胞,这种细胞不分裂,过一阵就死掉了,做抗体杂交瘤融合的同志肯定知道)。加滋养细胞对有黑胶虫的刚复苏的细胞很有效!还有就是实验环境要注意好,保持细胞间整个环境的洁净度;换用进口的一次性塑料培养瓶;建议清理无菌室所有物品,人乳腺导管瘤细胞;BT-474重新灭菌,用KMnO4熏蒸,按首次使用无菌室做,细胞重新复苏;在换液前先加入生理盐水并轻轻拍打,冲洗干净后再加入培养液,坚持天天洗,传代时加生理盐水再离心一次,接种密度稍大一些,一段时间后,虫子就会大大减少,对细胞的生长也不会有大的影响;有材料称minocycline具有一定的作用,可以和换液结合起来使用。
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