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ELISA试剂盒实验关键步骤
ELISA试剂盒实验关键步骤
1.重要的洗刷：
ELISA试剂盒如果洗刷不充分，会形成一系列的差异和高布景最终导致试验成果偏差大。如果未结合的材料残留在微孔板中，那么它会添加布景噪音。条件答应的情况下，恰当添加洗刷液中的盐浓度，这会阻挠非特异结合反响。如果布景过高，置疑洗刷不行时，能够测验添加洗刷次数。
2.关键的关闭：
关闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。ELISA试剂盒这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的时机。如果布景过高，置疑关闭不充分，那么能够测验运用更高浓度的关闭液，或恰当延长关闭时刻现在主要有两种类型的关闭液：蛋白和非离子型去污剂。运用的类型须取决于多个要素，包含微孔板的外表试剂、吸附的抗原、抗体和检测试剂。好的关闭液应降低非特异性结合，但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。
3.抗体浓度须优化：
如果试剂稍有不同，ELISA试剂盒则可能需求优化抗体的量。非特异的抗体结合会添加布景。为了防止这一点，切勿运用过多的一抗或二抗。
4.、检测试剂要适量：
必定不能够运用过多的检测试剂。如果浓度过高，或许未正确稀释，则会导致高布景。也不要显色过度，如有必要，优化一下何时应加入停止液。
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