ELISA试剂盒制作高效感受态细胞
ELISA试剂盒严格的质量监控检测,从包装到品质,从产品到服务,每个环节,都严控质量关,为科研工作者提供各种不同试验研究用试剂盒,作为国家重点实验室、科研院校指定供应商,致力于发展酶联免疫领域,多年来坚守产品质量的可靠、稳定性。
制作感受态细胞大全方法
A液1M,MnCl2
B液:1M,HEPES,pH=6.2-6.8,用无菌水配,配后不需灭菌;
C液 称取CaCl2 0.10g,KCl 1.18g,全部转入细口试剂瓶,然后加入46ml三蒸水,轻轻振荡使所有组分充分溶解。将瓶塞盖上并用牛皮纸、棉线包扎,然后放入灭菌锅121℃高压灭菌备用。
取1管B液(0.6ml),全部加入C液(46ml)中,混匀后,再用1ml移液器加入3.3ml A液,混匀冰浴即可使用。
ELISA试剂盒挑取2-4个形态饱满的单菌落接种于装有100ml SOB 培养基的三角瓶,37℃剧烈振荡(300 rpms)培养3-4小时,将培养温度调至18℃剧烈振荡(3280 rpms)培养,其余与普通感受态差不多,每管加入4ml TB缓冲液,轻轻振荡,使菌体重新悬浮,加入280ml DMSO(可用国产分析纯),混匀后分装入1.5ml EP管,冰上静置15分钟。用纱布将所有装有感受态的EP管包好,用棉线系好后放入液氮中速冻,在液氮中静置12小时以上。取出感受态放入-70℃超低温冰箱备用。效率非常高,一般可到10*8,好时可到10*9,特别适宜于大片段与文库构建及珍贵材料的连接转化。
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