如何绘制ELISA标准曲线

应用EXCEL绘制ELISA标准曲线及计算样品浓度

        在ELISA实验结束后，我们得到的是经酶标仪得出的标准品以及样本的OD值。其中，标准品的浓度已知，我们可以利用标准品的OD值及其相对应的浓度，以OD值为横坐标，浓度为纵坐标，做一条标准曲线，并用公式表示出来。这样，我们把样本的OD值以X值代入，便可求出Y值，即样本浓度。          

         下面我们就一步步来实现这个目标：

         1、首先，将数据整理好输入Excel，分别为经酶标仪读出标准品的OD值及其对应的浓度值。  

         2、拖动鼠标选取完成的数据区，并点击图表向导，在图表类型中选“XY散点图”，并选择子图表类型的“散点图”（第一个没有连线的），如下图所示。

          3、点击“下一步”，出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改，如果是纵向列表就改选“列”。

   在做ELISA标准曲线，并通过此曲线求样本浓度时，因样本OD值是已知的，因此我们需要将OD值设为X。根据上图我们可以看到，横坐标X值为OD值，纵坐标Y为标准品浓度，这正是我们想要的。

          有时需要我们手动选择X值，这时可以点击“系列”来更改，如下图。

         如果要对横坐标和纵坐标进行调换，我们可以就点击X值和Y值文本框右边的小图标，结果如下图：

          出现上图后，拖动鼠标选取正确的数据区域以调整X或Y。

          5、调好之后，然后点击“下一步”出现图标选项界面，如下图。

         6、点击“下一步”，在弹出的窗口再点击“完成”，现在一张带标准值的完整散点图就已经完成，如下图。

          7、到了这一步，散点图便完成了。我们可能会问，曲线在哪里啊？

其实很简单，先点击图上的标准值点（记住一定要点选上），然后单击右键，点击“添加趋势线”。弹出趋势线类型选择对话框，有线性，对数，多项等选项，如下图：

           8、在选择之前，我们先对上图做一下肉眼观察，如果那些点能连成一条直线，或接近直线，我们就选择“线性”，意思就是出来的趋势线是一条直线，相应的该直线的方程就是y=ax
+b的形式。不过一般的ELISA都不会是所有的标准点呈完全的线性关系的，也就是说不是一条完全的直线，这时我们可以选择“多项式”，多项式后面还有“阶数”的选择，也就是说求出来的方程是几次方，我们一般选“2阶”，即出来的方程为y=ax2+bx+c. 选择完毕后，弹出以下窗口。

          9、趋势线也就是标准曲线在此便显示出来了。接下来我们需要将公式显示出来，以根据样本的OD值计算其浓度值。在鼠标点选该线（一定要选中，选中后出现下图的样子即线由很多店标识出来），单击鼠标右键，选择趋势线格式。我们在弹出的窗口中选择“选项”选项卡，出现下图，我们选择显示公式，显示R方，即相关系数，这时公式与R方值便都显示出来了。

我们将样本的OD值作为X代入上述方程，求出来的便为浓度值了。

一般ELISA的标准曲线的相关系数要达到0.95以上，本例中为0.9999，非常不错的曲线，这样就保证了由该曲线及其方程求出的样本浓度具有很强的可信性。

兔子脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒     rabbit brain natriuretic peptide,BNP ELISA试剂盒    

兔子内皮抑素(ES)ELISA试剂盒     rabbit Endostatin,ES ELISA试剂盒     

兔子内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒     rabbit Endothelin 1,ET-1 ELISA试剂盒     

兔子免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒      rabbit Immunoglobulin G,IgG ELISA试剂盒    

兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒     rabbit Immunoglobulin E,IgE ELISA试剂盒    

兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒      rabbit Immunoglobulin A,IgA ELISA试剂盒     

兔子可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒     Rabbit soluble Vascuolar cell adhesion molecule 1,sVCAM-1 ELISA试剂盒    

兔子可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒     rabbit Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 ELISA试剂盒     

兔子可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒     rabbit soluble E-selectin,sE-selectin ELISA试剂盒    

兔子巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒     rabbit macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISA试剂盒     

兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒      rabbit basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA试剂盒     

 兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒       rabbit Immunoglobulin M,IgM ELISA试剂盒     

兔子甲状腺素(T4)ELISA试剂盒     rabbit thyroxine,T4 ELISA试剂盒     

兔子基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒     rabbit tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA试剂盒    

兔子基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒     rabbit matrix metalloproteinase 9,MMP-9 ELISA试剂盒     

兔子基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒     rabbit matrix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA试剂盒    

兔子基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒     rabbit matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA试剂盒    

兔子睾酮(T)ELISA试剂盒     rabbit Testoterone,T ELISA试剂盒     

兔子肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒     rabbit hepatocyte growth factor,HGF ELISA试剂盒     

兔子γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒      rabbit Interferon γ ,IFN-γ ELISA试剂盒     

兔子端粒酶(TE)ELISA试剂盒     rabbit telomerase,TE ELISA试剂盒     

兔子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒     protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP1/MCAF ELISA试剂盒    

兔子促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒     rabbit adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA试剂盒    

兔子促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒     rabbit follicle-stimulating hormone,FSH ELISA试剂盒     

兔子促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒     rabbit Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA试剂盒     

兔子雌二醇(E2)ELISA试剂盒     rabbit Estradiol,E2 ELISA试剂盒    

兔子肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒     rabbit intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA试剂盒     

兔子表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒      Rabbit Epidermal growth factor,EGF ELISA试剂盒     

兔子白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒     rabbit leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA试剂盒     

兔子白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒     rabbit Leukotriene B4,LT-B4 ELISA试剂盒     

兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒     rabbit Interleukin 8,IL-8 ELISA试剂盒    

兔子白介素6(IL-6)ELISA试剂盒     rabbit Interleukin 6,IL-6 ELISA试剂盒    

兔子白介素4(IL-4)ELISA试剂盒     rabbit Interleukin 4,IL-4 ELISA试剂盒     

兔子白介素3(IL-3)ELISA试剂盒     Rabbit Interleukin 3,IL-3 ELISA试剂盒     

兔子白介素3(IL-3)ELISA试剂盒     Rabbit Interleukin 3,IL-3 ELISA试剂盒     

兔子白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒     Rabbit Interleukin 1β,IL-1β ELISA试剂盒     

兔肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒     Rabbit Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISA试剂盒     

兔子白介素10(IL-10)ELISA试剂盒     Rabbit Interleukin 10,IL-10 ELISA试剂盒    

兔子白介素1(IL-1)ELISA试剂盒     Rabbit Interleukin 1,IL-1 ELISA试剂盒    

兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA试剂盒     rabbit Soluble protein-100B,S-100B ELISA试剂盒    

兔子S100蛋白(S-100)ELISA试剂盒     rabbit Soluble protein-100,S-100 ELISA试剂盒    

兔主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA试剂盒     Rabbit major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/RLAⅡ ELISA试剂盒     

兔子凝血酶受体(TR)ELISA试剂盒     Rabbit thrombin receptor,TR ELISA试剂盒     

兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒     rabbit soluble P-selectin,sP-selectin ELISA试剂盒    

兔子Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒     rabbit Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA试剂盒    

兔子Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒     rabbit Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA试剂盒    

兔子Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒     rabbit Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA试剂盒    

兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒     rabbit N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA试剂盒    

兔子Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)ELISA试剂盒     rabbit procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISA试剂盒     

兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒     Rabbit coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA试剂盒     

兔子C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒     rabbit C-Reactive Protein,CRP ELISA试剂盒    

兔子内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒     Rabbit Endothelial nitric oxide synthase 3,eNOS-3 ELISA试剂盒     

兔子胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒     Rabbit cholest erolester transfer protein,CETP ELISA试剂盒     

兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒     Rabbit soluble adhesion molecules,Sam ELISA试剂盒     

兔子抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA试剂盒     Rabbit anti-neutrophil granules antibody,ANGA ELISA试剂盒     

兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒     Rabbit Progesterone,PROG ELISA试剂盒     

兔子胶原酶II(Collagenase II)ELISA试剂盒     Rabbit Collagenase Type II ELISA试剂盒    

兔子胶原酶I(Collagenase I)ELISA试剂盒      Rabbit Collagenase I ELISA试剂盒    

兔子肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA试剂盒     Rabbit tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA试剂盒     

兔子肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA试剂盒     Rabbit tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA试剂盒     

兔子巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒     Rabbit Macrophage Inflammatory Protein-1α,MIP-1α ELISA试剂盒    

兔子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒     Rabbit glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA试剂盒     

瓜氨酸     cit    

鱼孕激素/孕酮     PROG ELISA试剂盒     

鲑鱼降钙素(SCT)ELISA试剂盒     Salmon calcitonin,SCT ELISA试剂盒    

鱼类甲状腺素(T4)ELISA试剂盒     Fish Thyroxine,T4 ELISA试剂盒    

鱼雌二醇     E2 ELISA     

鱼促肾上腺皮质激素     ACTH ELISA试剂盒    

鱼雌激素     E ELISA试剂盒     

鱼促卵泡素     FSH ELISA试剂盒    

鱼促黄体激素     LH ELISA试剂盒     

鱼磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶     AMPK ELISA试剂盒     

鱼卵黄高磷蛋白     PV ELISA试剂盒    

鱼类主要组织相容性复合体     MHC ELISA试剂盒    

鲑鱼补体蛋白3     C3 ELISA试剂盒    

鲑鱼补体蛋白4     C4 ELISA试剂盒     

鱼类白介素1α     IL-1α ELISA试剂盒     

鱼类白介素1β     IL-1β ELISA试剂盒    

鲤鱼卵黄蛋白原     VTG ELISA试剂盒    

鱼类促性腺激素释放激素     GnRH ELISA试剂盒     

鱼类三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒     Fish Tri-iodothyronine,T3 ELISA试剂盒    

鱼类皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒     Fish Cortisol ELISA试剂盒    

鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒     Fish high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA试剂盒     

鱼骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒     Fish Oste ocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA试剂盒    

红螯光壳螯虾卵黄脂磷蛋白/卵黄磷蛋白(Lv/Vn)ELISA试剂盒     Cherax quadricarinatus lipovitellin/vitellin,Lv/Vn ELISA试剂盒     

罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)ELISA试剂盒     Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV ELISA试剂盒    

毒蛇因子(CVF) ELISA试剂盒     Cobra venom factor,CVF ELISA试剂盒    

牛蛙生长激素（GH） ELISA试剂盒     bullfrog growth hormone,GH ELISA试剂盒    

家蚕卵黄蛋白(LT) ELISA试剂盒     Bombyx mori Livetin,LT ELISA试剂盒    

蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原（vtg)ELISA试剂盒     Nasoniavitripennis vitellogenin,Vtg ELISA试剂盒    

植物磷脂酰甘油(PG)ELISA试剂盒      Plant phosphatidylglycerol,PG ELISA试剂盒    

植物玉米索核苷（ZR ）ELISA试剂盒     Plant zeatin riboside,ZR ELISA试剂盒    

植物赤霉素（GA） ELISA试剂盒     Plant Gibberellic Acid,GA ELISA试剂盒    

植物血凝素（PHA ）ELISA试剂盒     phytohaemagglutinin,PHA ELISA试剂盒    

植物生长激素（GH ）ELISA试剂盒      Plant growth hormone,GH ELISA试剂盒     

植物凝脂酸（PA ）ELISA试剂盒      Plant phosphatidic acid,PA ELISA试剂盒     

植物吲哚乙酸（IAA） ELISA试剂盒     Plant Indole-3-acetic acid ,IAA ELISA试剂盒    

麦胚凝集素/凝集蛋白(WGA)ELISA试剂盒      Wheat germ agglutinin,WGA ELISA试剂盒    

荆豆凝集素(UEA)ELISA试剂盒      Ulex Europaeus agglutinin,UEA ELISA试剂盒    

槐凝集素(SJA)ELISA试剂盒      Sophora japonica agglutinin,SJA ELISA试剂盒    

花生凝集素(PNA)ELISA试剂盒      Peanut agglutinin,PNA ELISA试剂盒    

大豆凝集素(SBA)ELISA试剂盒      Soybean agglutinin,SBA ELISA试剂盒    

菜豆凝集素(PHA)ELISA试剂盒      Phaseolus vulgaris agglutinin,PHA ELISA试剂盒    

扁豆凝集素(LCA)ELISA试剂盒      Lens culinaris agglutinin,LCA ELISA试剂盒    

蓖麻凝集素(RCA)ELISA试剂盒      Ricinus communis agglutinin,RCA ELISA试剂盒    

豌豆凝集素(PSA)ELISA试剂盒      Pisum sativum agglutinin,PSA ELISA试剂盒    

双花扁豆凝集素(DBA)ELISA试剂盒      Dolichos bifows agglutinin,DBA ELISA试剂盒    

植物钙调素(CAM)ELISA试剂盒      Plant calmodulin,CAM ELISA试剂盒     

植物激素脱落酸（ABA ）ELISA试剂盒     Plant hormone abscisic acid,ABA ELISA试剂盒    

植物维生素K1(VK1)ELISA试剂盒      Plant Vitamin K1,VK1 ELISA试剂盒     

植物维生素B12(VB12)ELISA试剂盒      Plant Vitamin B12,VB12 ELISA试剂盒     

植物维生素A(VA)ELISA试剂盒      Plant Vitamin A,VA ELISA试剂盒     

植物维生素E(VE)ELISA试剂盒      Plant Vitamin E,VE EELISA试剂盒     

植物维生素D2(VD2)ELISA试剂盒      Plant Vitamin D2,VD2 ELISA试剂盒     

植物维生素D3(VD3)ELISA试剂盒      Plant Vitamin D3,VD3 ELISA试剂盒     

植物维生素D(VD)ELISA试剂盒      Plant Vitamin D,VD ELISA试剂盒     

植物维生素B6(VB6)ELISA试剂盒      Plant Vitamin B6,VB6 ELISA试剂盒     

植物25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒      Plant 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA试剂盒     

植物维生素C(VC)ELISA试剂盒      Plant Human Vitamin C,VC ELISA试剂盒     

α-银环蛇毒素(α-BGT)ELISA试剂盒      α-bungarotoxin,α-BGT ELISA试剂盒    

大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coli P)ELISA试剂盒      Escherichia coli Protein,E.coli P ELISA试剂盒    

黄曲霉毒素(AFT)ELISA试剂盒      Aflatoxin,AFT ELISA试剂盒    

苏云金芽孢杆菌蛋白(BT)ELISA试剂盒      Bacillus thuringiensis,BT ELISA试剂盒    

牛丙酮检测(acetone)ELISA试剂盒      Bovine acetone ELISA试剂盒    

牛结核病抗体检测试剂盒     Elisa    

荷兰赛迪口蹄疫0型2板     Elisa    

猪瘟病毒抗体检测试剂盒     Elisa    

口蹄疫非结构蛋白抗体检测试剂盒     Elisa    

猪瘟抗原2板检测试剂盒     Elisa    

伪狂犬病毒gE2.0抗体诊断试剂盒     Elisa    

蓝耳病检测试剂盒     Elisa    

圆环病毒IgG 检测试剂盒     Elisa