超超级细菌：耐药细菌或许同时具备更强的致病性一项新的研究正表明，对抗生素有耐药性的细菌或许比我们之前想的更顽强。这些细菌不仅难以治疗，而且似乎在一般意义上更“适应”，这意味着他们能在宿主内更好地生存并引起更为致命的感染。这些发现与医学界盛行的观点相悖，传统观点认为，当细菌获得耐药性后，它们在某种程度上变得不那么“适应”了，例如它们的传播能力会减弱。尽管科学家通常假定这一观点属实，但事实上支持这一观点的证据很有限，研究人员说。在新的研究中，研究人员检测了耐药性基因对铜绿假单孢菌（Pseudomonas aeruginosa）的影响。这种细菌可以导致肺部感染。他们发现，在研究阶段，感染耐抗生素铜绿假单胞菌的小鼠比感染无耐药性铜绿假单胞菌的小鼠更容易死亡 (无任何种类的治疗)。耐抗生素菌株也更擅长杀死特定种类的免疫细胞（人体内防御细菌和其他病原体的细胞）。“我们可能忽视了病原体获取耐药性而导致的另一个结果，就是这也可能增强了病原体的适应性和毒力，”来自波士顿市布里格姆女子医院的研究者在《科学 转化医学》（Science Translational Medicine）期刊上撰文指出。这项发现“提出了一个严重的问题，除了会提高抗生素治疗方法的复杂程度，耐药菌株或许适应性更好，因此能地引发严重且更难治愈的感染。”他们说。研究人员也在其他两种细菌中发现了类似的现象：引起住院病人发生感染的鲍氏不动杆菌（Acinetobacter baumannii）和引起腹泻霍乱的霍乱弧菌（Vibriocholera）。例如携带特定的耐抗生素基因的霍乱弧菌比不带这些基因的细菌能更好地在兔子的胃肠道中生长。“我们的结果显示， 应对世界性的抗生素耐药性增长的努力可能会因为耐药细菌的适应性增强而受到阻碍。这种适应性增强了细菌毒力。”研究人员写道。研究发现也“强调了有效控制耐药病原体出现的必要性，以及发展预防和治疗感染的可代替方法的必要性。”他们写道。匹兹堡大学医学及卫生安全中心的传染病专家和高级副院长Amesh Adalja博士说，新发现并非完全出人意料。这是由于使细菌对某些抗生素产生耐药性的变异同时也会产生其他影响，包括增强细菌的生存能力。“这并不是一种简单的利益权衡。”Adalja说，他本人并未参与这项研究。获得耐药性并不一定要牺牲生存能力。Adalja也提到研究人员在洞穴里发现对许多抗生素有耐药性的细菌，即使这些细菌从未和人类接触过，也从未经受抗生素药物处理。细菌可能在很长时间以前就进化产生这些耐药性基因，以保护它们自己免受其他细菌的侵害，或以其他方式帮助它们存活，Adalja说道。“对抗生素的耐药性不是在发现青霉素后产生的某种新特性，”Adalja说道。研究显示或许总会存在某种程度的抗生素耐药性，即使医生改善了他们使用抗生素的方式。“抗生素管理人员能做的有限。”Adalja说道。这意味着，想要阻止抗生素耐药性的扩散，不仅仅是科学使用抗生素这么简单，Adalja说。研究人员需要研究出不同于抗生素的治疗措施和预防方法，如靶向对抗特定细菌毒素的药物或新的疫苗，Adalja说。

Nature：线粒体基因缺陷改造新策略线粒体是细胞的能量工厂。通过氧化磷酸化，能量物质在线粒体内被分解为二氧化碳和水，并生成高能磷酸类物质，驱动着整个细胞的持续生存。线粒体中有13种氧化相关的酶都是由线粒体自身携带的DNA转录翻译得到的，其他的则是由细胞核中的DNA转录翻译得到。针对线粒体DNA（mtDNA）的突变往往会引起线粒体酶的功能异常，进一步导致细胞能量供应出现障碍，体现在生物整体上则是，线粒体缺陷相关的疾病。比如在人类中，这些疾病往往会导致多种系统的功能异常，例如发育迟缓、神经系统问题、肌肉协调性差等等。使问题更麻烦的是，这些线粒体疾病往往并没有很好的治疗策略。一项由美国加州基因表达实验室的Juan Carlos Izpisua Belmonte领导的课题组在《Nature》发文称，线粒体mtDNA突变可以通过遗传方式获得的方式来纠正，正常代谢功能可以利用通过多能干细胞来恢复。利用线粒体DNA突变患者皮肤中的成纤维细胞，通过细胞因子介导的重编程(iPS 细胞)和体细胞核转移(SCNT)这两种方法，科学家可以获得相关的多能干细胞，最后可以恢复这些细胞线粒体的正常代谢功能。在获得来自线粒体DNA突变疾病患者的皮肤样品后，研究人员们使用不同的方法试图“修复”这些皮肤细胞中的线粒体，并使这些细胞得到多能干细胞，未来可能可以利用这些细胞作为线粒体疾病的治疗工具。对于异质性突变引起的最广泛的线粒体疾病类型，通过利用这些携带突变的细胞，产生多个株系的诱导多能干细胞（iPS），能够得到野生无线粒体突变的单克隆细胞系。使用体细胞核转移技术可以通过替换细胞核，使得来自线粒体突变细胞的细胞核获得无突变线粒体的细胞质环境，从而可以解决同质性线粒体突变的细胞的“修复”，并可以获得无线粒体突变的多能干细胞株系，这个株系的细胞具有与胚胎细胞类似的转录、表观遗传环境。尽管这个杂合的细胞线粒体和细胞核来自不同的个体，但是似乎它们能够协调完成正常的代谢功能，这可能意味着细胞核-线粒体相关的代谢有很高的保守性。这个研究利用两种不同的方法，使用来自患者的细胞，最终可以得到无突变的多能干细胞或诱导多能干细胞。利用这些细胞株系，可能最终能够改变线粒体突变疾病的治疗现状。这种针对携带线粒体突变细胞，得到多能干细胞或者诱导多能干细胞，可能可以用于针对下一代的基因改造，使得女性患者的后代免遭这种线粒体突变带来的疾病的困扰。

猪β干扰素(IFN-β)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T3.0pg/ml-80pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中β 干扰素(IFN-β)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪β 干扰素(IFN-β)水平。用纯化的猪β 干扰素(IFN-β)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入β 干扰素(IFN-β)，再与HRP 标记的β 干扰素(IFN-β)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的β 干扰素(IFN-β)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中猪β 干扰素(IFN-β)浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品（160pg/ml） 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。80pg/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液40pg/ml 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液20pg/ml 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液10pg/ml 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液5.0pg/ml 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 个月

PNAS：人工合成小蛋白提示癌症发生新线索近日，来自耶鲁大学的科学家们在国际学术期刊PNAS上发表了一项最新研究进展，他们通过化学合成的方法合成了一些简易蛋白分子，这些蛋白分子几乎不存在化学多样性，但仍然能够在调节细胞功能方面发挥特定作用。 所有的生命都需要依赖蛋白质的功能，蛋白质的作用范围也非常广泛，目前已经知道这种功能多样性主要是由于成百上千的氨基酸形成特定序列，再经过蛋白质的加工和修饰过程形成特定的蛋白质结构实现的。这些氨基酸的侧链使得蛋白质呈现出巨大的化学多样性，更是形成众多蛋白质结构的基础，比如多种多样的酶类以及各种载体蛋白。但除了结构复杂，化学多样性丰富的蛋白质，是否也存在一些结构简单，化学多样性单一的小蛋白分子调节细胞功能呢？ 虽然病毒蛋白都比较短小，但仍然能够跨过细胞膜引发肿瘤，受到这一现象的启发，耶鲁大学的研究人员设计了一系列由26个氨基酸形成的合成膜蛋白。他们构建的这些蛋白只包含两种携带类似侧链的氨基酸，尽管这些蛋白都极其简单，但其中一部分蛋白质仍表现出生物学活性。 研究人员这样说道："我们构建的可能是最简单的蛋白，但这些蛋白不仅十分活跃，还表现出很好的特异性。它们能够在细胞内找到特定靶向目标并将其激活，随后可导致细胞疯长。我们也在想，细胞内是否也存在类似的蛋白，但由于其太过简单一直都被我们忽略掉了，而这些蛋白质可能会引起癌症的发生。" 这项研究为癌症发生机制的研究提供了重要信息。

马免疫球蛋白E(IgE)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T1.5μg/ml -50μg/ml使用目的：本试剂盒用于测定马血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白E(IgE)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中马免疫球蛋白E(IgE)水平。用纯化的马免疫球蛋白E(IgE)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E(IgE)，再与HRP 标记的免疫球蛋白E(IgE)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中马免疫球蛋白E(IgE)浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品（96 μg/ml） 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。48 μg/ml 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液24 μg/ml 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液12 μg/ml 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液6.0μg/ml 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液3.0 μg/ml 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 个月

林可霉素（Lincomycin）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1 使用目的：本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉），鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中林可霉素（Lincomycin）残留的定量检测。2 实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有林可霉素（Lincomycin）偶联抗原，加入林可霉素（Lincomycin）标准品或样品，游离林可霉素（Lincomycin）与微孔条上预包被的林可霉素（Lincomycin）偶联抗原互相竞争抗林可霉素（Lincomycin）抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中林可霉素（Lincomycin）含量成反比，通过标准曲线计算样品中林可霉素（Lincomycin）的含量。  3 试剂盒组成 3.1 预包被的林可霉素（Lincomycin）偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。3.2 林可霉素（Lincomycin）标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0 ppb，0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1 ppb 3.3抗林可霉素（Lincomycin）抗体酶结合物：1瓶（6ml）。3.4显色液A：1瓶（6ml）。3.5显色液B：1瓶（6ml）。3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。3.7样本稀释液：1瓶（10×,  6ml），用于样品稀释用。3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。3.9说明书一份。 4 需要而未提供的材料4.1 设备4.1.1波长450nm酶标仪。 4.1.2粉碎机。4.1.3量筒。4.1.4振荡器。4.1.5漏斗。4.1.6Whatman No 1或相当的滤纸。4.1.7微量移液器。4.2 试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。4.2.2 甲醇。5 贮存5.1 试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻5.2 未用完的微孔板应该密封干燥保存6 注意事项6.1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。6.2 不要使用过期试剂盒。6.3 试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。6.4 标准品中含有林可霉素（Lincomycin），使用时应特别注意，操作时应带手套。6.5 终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6.6 不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。6.7 不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。6.8 稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果6.9 混合试剂时应避免起泡。7 工作液准备7.1 林可霉素（Lincomycin）标准品溶液：0 ppb，0.1ppb,0.3ppb,0.9ppb,2.7ppb,8.1 ppb7.2 浓缩洗涤液：用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用7.3 样本稀释液：用蒸馏水按1:10(1+9)稀释备用7.3 显色剂：已备用，避免光线直照7.4 反应终止液：已备用8 样品处理程序（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存）8.1.1 牛奶脱脂奶：直接分析。全脂奶：13000g离心15分钟，取上清液检测（避免取到乳脂）8.1.2 肝脏： （稀释倍数2）--称取2g已绞碎的样品到试管中。--加入14ml的乙腈，然后均质（用20000rpm均质几分钟）。--振荡15分钟，然后2500g离心15分钟。--取上清液1ml到另一玻璃管中在40-50℃下蒸干（利用氮气吹干仪或者旋转蒸发器）。--加入250μl去离子水并漩涡混合。--溶液待测。8.1.3 鸡蛋： （稀释倍数2）--取2g样品到试管中，加入6mL乙腈。--振荡15分钟，然后3000g离心15分钟。--取上清液1ml到另一玻璃管中蒸干（40-50℃）。--加入500μl去离子水并漩涡混合。--溶液待测。8.1.4 蜂蜜： (稀释倍数2)---取蜂蜜2g，置于离心管中（约15mL），加入4mL水溶解。--加入2ml 乙酸乙脂后，振荡均匀。--然后3000rpm，离心15分钟。--取上清液0.5ml置于萃取管中于水浴60℃下以氮气吹干。--加入0.5ml去离子水混合，振荡约10秒钟。--取100μl 待测。推荐使用的其它样品的前处理方法：8.2.1 组织样： （稀释倍数1）--取3g绞碎样品置入50ml离心管中。--加入6ml乙酸乙酯均质。--以3000g离心10分钟。--取2ml上清液置入10ml塞玻璃管中，于水浴50℃下以氮气吹干。--于此玻璃管中加入2ml正己烷，振荡混合。--再加入1ml去离子水，振荡混合约10秒钟，以离心机3,000g离心10分钟。--利用吸管吸去包含中间乳化层部分的上层液（正己烷层）；--取50μl待测。8.2.2 血清血浆： （稀释倍数1）--移取1ml血清或血浆至试管中，加2ml乙酸乙酯振荡1分钟。--室温3000g离心10分钟。--移取1ml上层的乙酸乙酯至另一试管中，用氮气流60 oC水浴中吹干。--残留物用0.5ml去离子水溶解。--取100ul 待测。8.2.3 饲料样品： （稀释倍数4）--取1g饲料样品(精细粉碎过的，有代表性的)，放入离心管中。--加4ml乙酸乙酯剧烈混合1分钟（用可旋转振荡摇床）--室温3000g离心10分钟。--移取1ml上层的乙酸乙酯至另一试管中，60 oC氮气流下蒸干。 --用1ml异辛烷/氯仿混合物(2:3混合)溶解干燥的残留物。--加入1ml去离子水强烈振荡1分钟。--室温3000g离心10分钟。--取100μl上层水相待测。8.2.4 尿液： （快速处理方法）--尿液不用处理，直接测定。（如果尿液浑浊，一定要过滤或离心）9 酶免分析步骤9.1 实验须知9.1.1 实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温（25±2℃），时间约2小时。回温至室温（25±2℃）后再取出微孔条，多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存注：一定保证回温充分，否则影响检测的精确度和准确度。9.1.2 使用后请立即将试剂放回2~8℃保存9.1.3 请不要改变分析程序9.1.4 请使用精确的微量移液器9.1.5 操作一旦开始，请不要中断任何程序9.1.6 ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序，请严格按照要求操作9.1.7 为避免交叉污染，每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样9.1.8 加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面9.2 分析步骤9.2.1 预先进行编号，标记B0、标准品和样品的位置，推荐进行双孔检测9.2.2 取所需数量的微孔（微孔条可拆），将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存9.2.3 样品稀释液（10×）、浓缩洗涤液（10×）稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)9.2.4 在B0孔中加入50μl0.0 ng/ ml标准品溶液9.2.5 在各标准孔中加入50μl的标准品溶液9.2.6 在各样品孔中加入50μl样品溶液9.2.7 在所有孔中加入50μl的抗林可霉素（Lincomycin）抗体酶结合物9.2.8 轻轻晃动反应板几秒钟。 9.3 37℃温浴30min （温浴过程中不时轻拍反应板，可以减少双孔误差）9.3.1 甩掉孔中液体，用洗液洗涤微孔板5次，最后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。9.4 反应9.4.1 洗涤程序完成后，立即用微量移液器在每个微孔中先加入50μl显色液A，再加 50μl显色液B；轻微晃动反应板使之彻底混匀9.4.2 37℃温浴10min9.4.3 每孔中加入50μl终止液，混匀9.4.4 在450nm下检测吸光度，结果在5min内读取。10 结果计算10.1定量分析10.1.1所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值（B）除以第一个标准（0标准）的吸光度值（B0）再乘以100%，即百分吸光度值。B—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B0—0μg/L标准溶液的平均吸光度值10.1.2以林可霉素（Lincomycin）浓度的对数值为X轴，百分吸光度值为Y轴，绘制标准曲线图。根据样品百分吸光度值，可从曲线上得到对应点的横坐标，即为林可霉素（Lincomycin）浓度的对数值，求得反对数即为测定液中林可霉素（Lincomycin）浓度C（ppb）10.1.3由于样品经过了预先稀释，因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。 10.2 半定量测定10.1.1目测半定量测定：首先选择一个适当的标准液与样品同运行，根据样品与标准品吸光度值的高低比较，判断样品浓度值是小于还是大于标准值。10.1.2仪器半定量测定：首先选择一个适当的标准液与样品同运行，根据样品与标准品颜色深浅比较，判断样品浓度值是小于还是大于标准值。 11 特异性物质 交叉反应林可霉素              100%克林霉素              15%螺旋霉素              替米考星              红霉素                12 试剂盒参数本试剂盒检测下限为0.05ppbB0吸光度最佳值应大于1.0试剂盒吸光度板内误差小于8％，板间误差小于15％。用本说明书提供的组织样本提取方法回收率大于80％。13 标准曲线模式（仅供参考）试剂盒提供的标准曲线范围为0.1ppb~8.ppb。14 分析限制本试剂盒检测为阳性的样品应该用另一种方法如HPLC或GC/MS加以确证。  

免疫检查点阻断抗体副作用的处置免疫检查点阻断抗体通过增强免疫系统功能正成为各类恶性肿瘤患者抗肿瘤治疗的重要组成部分。细胞毒T淋巴细胞抗原-4（CTLA-4）是第一个应用于临床的靶点，CTLA-4靶点抑制剂易普利姆玛（ipilimumab），被美国食品药品监督管理局（FDA）批准用于治疗晚期黑色素瘤。程序性死亡受体-1（PD-1）与其配体之一PD-L1，在治疗恶性肿瘤的新靶标显示了巨大潜力。FDA已批准Nivolumab和Pembrolizumab用于治疗恶性黑色素瘤，这类治疗也有望能得到特殊审批。使用CTLA-4抗体和PD-1 / PD-L1阻断抗体产生的副作用称为免疫相关性不良反应（irAEs）。免疫相关性不良反应会涉及皮肤，胃肠道，肝脏，内分泌和其他器官系统。可使用短效免疫抑制剂如糖皮质激素，TNF-α受体拮抗剂，麦考酚酸酯或其他药物得到有效治疗。本文针对CTLA-4和PD-1 / PD-L1检查点抑制剂副作用做介绍，并就如何处理免疫相关性不良反应提供建议。

                       Rabbit Anti- P-selectin   Catalog Number :RC-0561R Quantity size : 0.1ml (dilute with pH 7.4 0.01 M PBS or antibody diluent ) Background: SELPLG is the high affinity counter-receptor for P-selectin on myeloid cells and stimulated T lymphocytes. As such, it plays a critical role in the tethering of these cells to activated platelets or endothelia expressing P-selectin. The organization of the SELPG gene closely resembles that of CD43 and the human platelet glycoprotein GpIb-alpha both of which have an intron in the 5-prime-noncoding region, a long second exon containing the complete coding region, and TATA-less promoters. Specificity : · anti- P-selectin is a rabbit polyclonal antibody unconjugated · specific for P-selectin of human, mouse, rat , rabbit · epitope mapping near the amino terminus of P-selectin of human, mouse, rat, Rabbit · human, mouse, rat, Rabbit. · use for western blotting, elisa, immunoprecipitation and immunohistochemistry · Protein A affinity chromatography purification, purity :>95% · Isotype: IgG · mol wt: 84kDa; 66kDa; 54kDa; 91kDa Application : · Western blotting 1:100-500 · Immunohistochemistry 1:100-500 · ELISA 1:500-1000 · Optimal working dilutions must be determined by the end user. Storage: Store at –20 oC for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20oC. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody, the antibody is stable for at least six weeks at 2-4 oC. Important Note: This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.  

Plasma Membrane Protein Extraction KitFor research use onlyPlasma Membrane Protein Extraction Kit(Catalog #K268-50; 50 preparations; Store at –20oC)I. Introduction:The Membrane Protein Extraction Kit provides optimized buffers and reagents for effectiveextraction of membrane proteins from mammalian tissues and cells. Unlike other availableprocedures that can only extract the total cellular membrane proteins (combinations ofplasma and organelle membrane proteins), BioVision’s kit was designed to not only extractthe total cellular membrane proteins, but also purify the plasma membrane proteinsspecifically. The procedure offers consistent yield and high purity (over 90%). Membraneproteins prepared using the kit can be utilized in a variety of applications, such as Westernblotting, 2-D gels, and enzyme analyses, etc. The entire procedure takes less than 1 hour.II. Kit Contents:III. Membrane Protein Extraction Protocol:A. General Consideration and Reagent Preparation:? Read the entire protocol before beginning the procedure. Be sure to keep all buffers andreagents on ice at all times during the experiment.? Reconstitute Protease Inhibitor Cocktail by adding 110 μl of DMSO, mix well.? Before use, aliquot enough Homogenize Buffer, add 1/500 volume of the reconstitutedProtease Inhibitor Cocktail (e.g., Add 10 μl to 5 ml buffer) to make the HomogenizeBuffer Mix. (Note: Some precipitation may occur after adding the Protease InhibitorCocktail. You may continue using the buffer or simply remove the precipitates bycentrifugation).? The following protocol is described for extraction of ~5-10 x 108 cells. If more cells areused, scale up the volume proportionally.B. Extraction of Total Cellular Membrane Proteins:1. Collect cells (5-10 x 108) by centrifugation at 600 x g for 5 minutes at 4oC.For adherent cells, scrape cells in PBS and then spin down (3000 rpm for 5 minutes) topellet cells.2. Wash cells once with 1 ml of ice cold PBS.3. Resuspend cells in 1 ml of the Homogenize Buffer Mix in an ice-cold Dounce homogenizer(Cat.# 1998-1). Homogenize cells on ice for 30-50 times.For tissue samples, homogenize tissues in 2-3 volume of the 1X Homogenize Buffer, until it iscompleted lysed (30-50 times).Note: Efficient homogenization may depend on the cell type. To check the efficiency of thehomogenization, pipette 2-3 μl of the homogenized suspension onto a cover slip and observeunder a microscope. A shiny ring around the nuclei indicates that cells are still intact. If 70-80percent of the nuclei do not have the shiny ring, proceed to the next step. Otherwise, perform10-30 additional passes.4. Transfer the homogenate to a 1.5 ml microcentrifuge tube. Centrifuge in 700 g for 10 minutesat 4oC. Collect supernatant and discard the pellet.5. Transfer the supernatant to a new vial and centrifuge at 10,000g for 30 min at 4oC.6. Collect supernatant (This is Cytosol Fraction). The pellet is the total cellular membraneprotein (containing proteins from both plasma membrane and cellular organelle membrane).Note: You may stop here if you only need the total cellular membrane proteins. If you wouldlike to further isolate the plasma membrane proteins specifically, continue with the followingsteps.C. Purification of Plasma Membrane Proteins:7. Resuspend the total membrane proteins pellet in 200 μl of the Upper Phase Solution. Add200 μl of the Lower Phase Solution. Mix well and incubate on ice for 5 minutes (Mark the tubeas A).8. Prepare a fresh phase tube without samples. Adding 200 μl of Upper Phase Solution and 200μl of Lower Phase Solution (Mark the tube as B).9. Centrifuge both A & B tubes in a microcentrifuge at 3500 rpm (1000 x g) for 5 minutes.10. Carefully transfer the upper phase from tube A to a new tube (tube C), keep on ice.11. To maximize the yield, extract the tube A lower phase again by adding 100 μl of the UpperPhase Solution from tube B. Mix well and centrifuge at 3500 rpm (1000 g) for 5 minutes.12. Carefully collect the upper phase. Combine with the upper phase from Step 10 (tube C).Extract the combined upper phase by adding 100 μl of the Lower Phase Solution from tube B,Mix well and centrifuge at 3500 rpm (1000 g) for 5 minutes.13. Carefully collect the upper phase. Dilute the upper phase in 5 volume of water. Keep on icefor 5 minutes.14. Spin at top speed at a microcentrifuge tube for 10 minutes at 4oC. Remove the supernatant.The pellet is the plasma membrane protein.15. Store the plasma membrane proteins at –70oC for further studies. The membrane fractioncan be dissolved in 0.5% Triton X-100 in PBS or other buffers before use.Generally 1-100 μg plasma membrane proteins can be obtained.FOR RESEARCH USE ONLY! Not to be used in humans

浙江大学、中国疾病预防控制中心、中科院微生物所联合发表脑蛋白质组研究成果浙江大学、中国疾病预防控制中心、中科院微生物所的学者，使用脑组织样本，对朊病毒相关疾病进行了蛋白质组学研究。此研究工作作为编辑推荐论文，发表在今年4月出版的Mol Cell Proteomics (Proteomics analyses for the globalproteins in the brain tissues of different human prion diseases)。实验使用患库贾氏症(sCJD)、致死性家族失眠症(FFI)、 G114V遗传库贾氏症(G114V)三种传染性海绵状脑病人以及正常人的脑皮质组织和小脑组织。人脑顶叶及小脑区域组织与PBS缓冲液 1：10混合后匀浆。研磨产生的组织碎片通过低速离心(2000 g， 10 min)去除，收集上清。蛋白质浓度通过BCA法(bicinchoninic  acid  method)测定。之后蛋白保存在-80°C。实验时，100微克蛋白样品与TEBA溶液混合，使各样品达到相同体积。之后按每100克蛋白样品， 3.3克胰蛋白酶的比例加入胰蛋白酶，以进行酶切。TEAB溶液中的蛋白样品在 37 °C 下酶切 24小时后，按比例再加入1克胰蛋白酶，再在 37 °C下继续酶切12小时。之后使用SpeedVac离心浓缩系统去除溶剂。酶切产生的肽段使用稳定同位素标记。其中，不同的样品来源的肽段使用不同质量的稳定同位素质量标签，以便在样品混合后，通过标签质量差异来区分蛋白信号来源。标记好的肽段进行混合，混合肽段经过高pH反相和强阳离子交换色谱色谱(SCX)分级后，使用Orbitrap型质谱系统进行蛋白的鉴定和各样品间同种蛋白的相对定量分析。 pathies， TSEs)以及正常人的脑皮质组织和小脑组织。人脑顶叶及小脑区域组织与PBS缓冲液 1：10混合后匀浆。研磨产生的组织碎片通过低速离心(2000 g， 10 min)去除，收集上清。蛋白质浓度通过BCA法测定。之后蛋白保存在-80°C。实验时，100微克蛋白样品与TEBA溶液混合，使各样品达到相同体积。之后按每100克蛋白样品， 3.3克胰蛋白酶的比例加入胰蛋白酶，以进行酶切。TEAB溶液中的蛋白样品在 37 °C 下酶切 24小时后，按比例再加入1克胰蛋白酶，再在 37 °C下继续酶切12小时。之后使用SpeedVac离心浓缩系统去除溶剂。酶切产生的肽段使用稳定同位素标记。其中，不同的样品来源的肽段使用不同质量的稳定同位素质量标签，以便在样品混合后，通过标签质量差异来区分蛋白信号来源。标记好的肽段进行混合，混合肽段经过高pH反相和强阳离子交换色谱色谱(SCX)分级后，使用Orbitrap型质谱系统进行蛋白的鉴定和各样品间同种蛋白的相对定量分析。结果中共鉴定到2287种蛋白，与正常脑组织和小脑组织相比，传染性海绵状脑病的小脑组织样本中发生蛋白含量变化的蛋白种类要多于皮质。其中在病变的小脑组织中，分别有161和151种蛋白发生上调和下调，分别占总鉴定蛋白种类的7.0%和6.6% ；在病变的皮质组织中，分别有348和379 种蛋白发生上调和下调，分别占总鉴定蛋白种类的15.2%和16.6% 。合并小脑与皮质结果，共发现了病变组织中727种蛋白上调和312种蛋白下调。研究者对发生表达变化的蛋白，使用基因本体(Gene Ontology， GO) 分类系统进行了分类(GO分类)。在库贾氏症、 致死性家族失眠症、G114V遗传库贾氏症三种传染性海绵状脑病结果中，根据细胞组分分类排名前五的分别是 cell part， cell， membrane-bounded organelle， intracellular和organelle；而根据分子功能分类，前5种功能分别是binding， protein binding， ion binding， catalytic activity 和 adenylnucleotide binding 或cation binding；根据生物过程分类，最多的5种功能是cellular process， metabolic process，  response  to stimulus，  cellular  metabolic process和 macromolecule  metabolic process。

小鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T20pg/ml - 600pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中乙酰胆碱受体抗体(AChRab)含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)水平。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔中依次加入抗体，再与HRP 标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的乙酰胆碱受体抗体(AChRab)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（1200pg/ml） 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。尿液：用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6.组织标本:切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。600 pg/ml 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液300 pg/ml 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液150 pg/ml 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液75 pg/ml 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液37.5pg/ml 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 个月

高效的埃博拉疫苗竟和狂犬病有关，真的还安全吗？四千名受试者在接受埃博拉病毒疫苗后没有受到感染，于是人们得出结论rVSV-ZEBOV非常有效并且安全。那么什么是rVSV-ZEBOV？rVSV-ZEBOV当中含有一种活病毒：水疱性口炎病毒（Vesicular Stomatitis Virus）。这种病毒与狂犬病毒十分接近，都属于弹状病毒科（Rhabdoviridae），有着子弹一样的形状，能够感染哺乳动物。不过与狂犬病毒不同，水疱性口炎病毒远非致死，而狂犬病毒如果不加治疗，致死率接近100%。设计rVSV-ZEBOV疫苗的Heinz Feldmann博士来自美国疾病传染中心，他表示：“这种病毒只会导致非常轻微的疾病。”20世纪90年代，分子病毒学家John Rose曾经采用基因工程手段对水疱性口炎病毒进行改造，让其毒性降低。Feldmann则是在其基础之上将埃博拉病毒的一个基因片段装在了水疱性口炎病毒上。水疱性口炎病毒的基因一共编码五种蛋白，而埃博拉病毒基因编码七种蛋白。两种病毒粒子表面都被一种蛋白包裹，这种蛋白可与宿主细胞粘附，从而帮助病毒入侵宿主细胞。Feldmann 将编码水疱性口炎病毒表面蛋白的一个基因换成了埃博拉病毒基因，最终获得“重组”病毒。由于病毒表面蛋白来自埃博拉Zaire系，于是疫苗最终命名为“rVSV-ZEBOV”。rVSV-ZEBOV如何发挥作用？疫苗通过抗体帮助人体获得特定蛋白的免疫能力。如果抗原在宿主细胞内复制，白细胞将检测、识别其释放出的蛋白。免疫系统接着将会产生适合的抗体中和或是摧毁入侵者。埃博拉患者体内天然存在抗体，但整个免疫反应将持续数日。对抗感染为时过晚，感染得病后第二周往往就已经死亡。疫苗则用来帮助免疫细胞产生抗体。采用基因修饰过的水疱性口炎病毒，刺激人体产生免疫反应。Feldmann解释：“免疫系统通过识别埃博拉病毒的表面蛋白产生免疫反应，整个过程十分迅速，可快速清除或是降低人体感染程度，让人体足以存活。rVSV-ZEBOV安全吗？疫苗是安全的，不过和其它药物一样，一些患者服用后会产生副作用。埃博拉可入侵血细胞和血管，造成严重出血热，90%的易感人群都会死亡。埃博拉生物安全等级为4级，而水疱性口炎病毒生物安全等级仅为1级。 Heinz Feldmann在设计rVSV-ZEBOV疫苗时，最先研究了埃博拉病毒在不太苛刻的实验条件下入侵宿主细胞的行为。与免疫学家Thomas Geisbert合作，Feldmann检测了疫苗在啮齿动物和灵长动物的效果。在发表于2005年Nature Medicine的文章当中，他们已经证实单次给注射疫苗猴子，致死剂量的埃博拉病毒并不会导致发烧或是其它疾病。Feldman称：“这是一种非常强大的疫苗，一针便可起效。”如今NewLink Genetics和默沙东正在研究生产高质量、可供临床使用的rVSV-ZEBOV疫苗。2015年上半年，rVSV-ZEBOV临床I期、II期实验已经通过。rVSV-ZEBOV疗效如何？药效学实验将在临床III期开展，需要进行大规模实验和监管部门的批准。临床III期实验将在几内亚展开，与天花病毒预防类似，采用环状接种的方法。受试者共分为两组：一组埃博拉患者直接接种疫苗，另一组3周后接种。（出于伦理考虑，并未设计空白对照）。7651名受试者随机分为两组，其中4123名立即接种，10天后并未出现病症（埃博拉病毒孵育时间为10天），作为疫苗100%有效。另一种基因工程改造的活疫苗则来自黑猩猩腺病毒，该病毒可导致黑猩猩感冒。国家流行病中心和葛兰素史克联合研究这一项目，疫苗研究同样进入III期。由不会在宿主细胞复制的病毒制成的疫苗更为安全，但效果相对较差。 Feldmann.表示，考虑到情况紧急，这需要找到平衡点。

Cell metabolism：惊！新研究证脂肪可“燃烧”近日，来自美国的科学家在国际学术期刊cell metabolism在线发表了一项最新研究进展，他们首次在人类身上发现储存能量的白色脂肪组织可以变成燃烧能量的棕色脂肪，消耗多余能量。 考虑到肥胖和代谢综合征在全球的流行趋势，在不改变运动水平的情况下消耗能量可能具有重大治疗价值。通过白色脂肪棕色化增加能量消耗给肥胖及相关疾病的治疗带来了许多希望。 早先UTMB的研究人员及其他研究小组的研究人员已经证明成年人体内存在棕色脂肪，虽然棕色脂肪组织的量比较少，但是一旦开启也可以增加代谢率降低血糖水平。在这项最新的研究中，研究人员发现人类体内的白色脂肪组织也可以变成类棕色脂肪组织，但这一过程的发生需要进行长时间大量的肾上腺素释放应激。 烧伤是一种比较特别的长时间严重应激模型，在损伤发生之后的几周内，肾上腺素释放大量增加。研究人员利用这种"应激模型"进行了相关研究，他们找到了72名烧伤面积在50%以上的严重烧伤病人参与研究，同时选取19名健康人作为对照组。研究人员在烧伤之后不同时间点对病人进行了白色脂肪样品采集，随后对样品的代谢情况，脂肪细胞组成以及病人静息状态下的代谢率进行了测量，结果表明与动物模型上的结果类似，人类白色脂肪也可以变成棕色脂肪。 研究人员发现，烧伤病人的白色脂肪组织逐渐在分子和功能特性上向棕色脂肪转变，这表明人类白色脂肪可以发生逐步棕色化应对烧伤损伤。 这项研究为人类白色脂肪的棕色化能力提供了新的证据，表明人类的白色脂肪在特定条件下也可以向棕色脂肪方向转化。研究人员指出，他们的下一步工作就是找出导致这种变化发生的分子机制，并开发出模拟烧伤诱导效应的促棕色化药物，用以治疗肥胖和相关代谢综合征。

小鼠汉坦病毒（HV）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。96T使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中汉坦病毒（HV）表达。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠汉坦病毒（HV）表达。用纯化的小鼠汉坦病毒（HV）抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中汉坦病毒（HV）相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP 标记的汉坦病毒（HV）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），与CUTOFF 值相比较，从而判定标本中小鼠汉坦病毒（HV）的存在与否。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 阳性对照0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 阴性对照0.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结：计算和结果判定：试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定：样品OD 值TEL:021-60526354 www.shjgogo.com Catalog #:95193阳性判定：样品OD 值≥ 临界值（CUT OFF）者为汉坦病毒（HV）阳性。注意事项1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5．底物请避光保存。6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M 的硫酸，使用时必须注意安全。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 个月

Nature：解读100%有效保护的埃博拉疫苗研制成功如何重塑临床试验2013年12月西非爆发埃博拉病毒，引发埃博拉有史以来规模最大的流行，并且当时没有安全有效的疫苗或药物。短短20个月后，7月31日柳叶刀杂志刊登了在几内亚进行的初步实验成果，新研发出的疫苗能针对感染给予几乎100%全面的保护。Nature杂志着眼于试验的初步成功，综合分析了新疫苗将会对已经造成超过11000人死亡的疫情产生的影响以及在疫情爆发中如何进行未来的临床试验。该疫苗是怎么来的？被称为rVSV-ZEBOV的疫苗，包含一种被基因工程伪装成埃博拉病毒的牲畜病毒。它由加拿大公共卫生署开发的，授权给默克制药公司并由国际合作下的出资者，科学家，企业，组织和政府，包括世界卫生组织（WHO）进行测试。在几内亚，科学家应用一种“环状”的安排（比如在同一家庭的成员）来给感染接触者接种疫苗。被接种的人被分为两组：一组在接触后即时接种疫苗，另外一组在接触感染者三周后接种。试验发现了什么？在2014位即使接种疫苗的感染接触者中，10天的窗口期后（窗口期给予接种者足够的时间进行自身免疫反应），无一例埃博拉感染病例。相比之下，2380位延迟接种的接触者中有16人在此期间受到感染。因此，该疫苗被认为在本试验中提供对抗病毒的100％保护。100％的保护听起来令人难以置信Marie-Paule Kieny，WHO卫生系统和创新部的助理总干事分析表示，这项研究规模相当小，因此真正的保护率可能比100%略低。另一个独立委员会在评审这个试验时，认为初步的结果很有说服力。7月26日新试验中，原先的对照组被取消，现在所有的接触者都给予即使接种。这将为评价疫苗的保护水平产生更多有用的数据。但是，当前的结果已经足够让大家兴奋了。乔治城大学的一位前美国食品和药物管理局官员Jesse Goodman评价说道：“这个报道相当引人注目，即使研究存在一些问题，可是疫苗看来很可能是有效的。”疫苗有效期？这个问题答案还是未知。该试验的目的是测试环接种是否可以遏制疾病爆发，而目前已知的几周时间的保护足以做到这一点。英国牛津大学詹纳研究所主任，Adrian Hill参与了其他类型的埃博拉疫苗的测试，他评价说道：“这对于解决疾病爆发是一个好的消息，不过是否这种保护能持续下去还有待观察。试验并没有告诉我们疫苗确切的有效保护时间。”提供长期，甚至终身免疫保护的疫苗，才是我们真正需要。其他疫苗试验，其中包括Adrian Hill参与的，正是测试长期保护的有效疫苗。但正在下跌的埃博拉病例数意味着试验可能难以提供明确的结果。rVSV-ZEBOV疫苗能结束埃博拉在西非流行？疫苗将继续在几内亚使用，作为临床试验的一部分。许多研究人员希望在利比里亚和塞拉利昂使用（尽管该地区感染病发数量已经大幅下降，但有发作持续以及蔓延到邻近国家的风险），来结束疾病流行 。然而，一些监管障碍需要首先被清除。WHO的发言人Gregory Hartl说，在这些国家部署安排可能作为扩大临床试验的一部分计划，或通过监管部门紧急授权。当局也正在考虑现有数据是否足以许可疫苗在临床试验外环境的使用，这个过程可能需要几周到几个月时间。在疾病爆发过程中做试验是不寻常的？是。临床试验想要获得监管机构批准，通常需要几年（根据随机对照试验的黄金标准）。这意味着，爆发往往在试验之前就临近结束了。临床试验通常是在设备齐全的研究型医院进行，新疫苗的质量试验被普遍认为不可能在致命爆发的情况下展开。而埃博拉攻坚的紧迫性改变了这一切规则。WHO使出浑身解数，加速对动物实验有效的治疗和疫苗的测试，削减繁文缛节，并提出可以快速提供至少能帮助疫情控制的数据的相关试验设计。该rVSV-ZEBOV试验便是几个相关试验设计之一。这种“快速轨道”办法适用于其他疾病吗？Adrian Hill认为，在许多其他流行病威胁的情况下，疫苗可以被快速研发。他建议，对特殊病原体疫苗的研究进行加速，测试疫苗安全的临床试验便可及时完成。那些通过审核的疫苗将被储存起来，一旦爆发发生，便可用于功效测试。这类对健康威胁被优先考虑的病原体包括马尔堡病毒（Marburg virus，埃博拉病毒同一家族），中东呼吸道综合征（MERS）病毒，拉沙热（Lassa fever）和基孔肯雅热 （chikungunya）。从rVSV-ZEBOV的成功学到什么经验？它的成功给处理未来爆发提供了一个模型。Adrian Hill说：“这表示加速开发疫苗是可行的。”WHO总干事Margaret Chan于7月31日表示，他们正在开发“蓝图”，以加速相关措施的发展，消除潜在的流行病。该计划旨在将识别爆发到相关有效措施实行缩短到四个月以内，并且把试验设计和监管部门的批准提前到位。

诱导干细胞进入全能时代现在科学家们已经可以在体外利用各种类型细胞进行多能干细胞的诱导，来自德国的科学家又将这一技术推进一步，他们在发表在国际学术期刊nature structural  ＆ molecular biology的一项最新研究中，成功获得了与胚胎早期阶段具有相同特性的全能干细胞，这些全能干细胞甚至还具有一些更为有趣的特性。 在受精之后，胚胎处于单细胞或两细胞时期，细胞具有"全能性"，能够形成完整胚胎同时还有胎盘和脐带。在发生几轮细胞分裂之后，细胞快速失去形成胚胎的可塑性，从全能细胞变为多能细胞，处于囊胚期的胚胎干细胞虽然不能再单独形成一个新的胎儿，但可以继续通过细胞分化过程形成组成身体的各种组织。科学家们已经可以成功地诱导分化细胞重编程形成多能干细胞，但一直无法诱导形成全能干细胞。 在这项研究中，研究人员发现在体外培养多能干细胞的过程中，一小部分全能细胞会自然出现，并将其称为2C样细胞（因与两细胞阶段胚胎类似）。随后研究人员将这些细胞与早期胚胎阶段的细胞进行比对以发现一些共同特征以及一些使其能与多能干细胞进行区分的特征。 值得注意的是，研究人员观察到全能干细胞的DNA凝集化程度更低，并且一种负责染色质组装的蛋白质复合物CAF1也消失，研究人员提出，CAF1可能通过保证DNA包绕在组蛋白周围维持干细胞的多能性。基于这一假设，他们通过抑制CAF1复合体表达，导致染色体重编程进入一种凝集化程度更低的状态，成功地诱导出具有全能性的干细胞。 这项研究为深入理解干细胞多能性提供了重要信息，同时也对提高体细胞重编程效率促进再生医学发展具有重要意义。自此，诱导干细胞进入全能时代！

小鼠α半乳糖基抗原（α-gal）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T0.2U/ml -9 U/ml使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中α半乳糖基抗原（α-gal）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠α半乳糖基抗原（α-gal）水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入α半乳糖基抗原（α-gal），再与HRP 标记的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的α半乳糖基抗原（α-gal）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠α半乳糖基抗原（α-gal）浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（16 U/ml） 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。尿液：用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。5.培养细胞:检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6.组织标本:切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融8.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。8U/ml 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液4 U/ml 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液2.0U/ml 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液1.0U/ml 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液0.5U/ml 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 个月

美国华裔首富是如何炼成的？！美国华人超过了400万人，即使是旅居美国多年的华人也未必知道美国最富的华人是哪一位，因为这位首富太低调了，他就是：黄馨祥，英文名字为Patrick Soon-Shiong，笔者开始关注他始于两年前在FierceBiotechnology网站上一个标题为 “Fierce's  10 top biotech  billionaires” 的报道，是有关生物产业界的Top10亿万富翁的，排名第一的就是人人皆知的比尔·盖茨。有人可能会觉得扯，微软的前老总怎么成了生物产业界的了？其实盖茨退下来后，依靠自己的几百亿美元的基金会，不仅大量捐资包括艾滋病、肺结核等涉及全球公共卫生的生物医学领域，也对不少生物制药公司直接进行投资，已被视为在全球生物制药领域最有影响力的人物之一。在上述10人的牛人榜上，排名第五的就是本文的主人公：Patrick Soon-Shiong（黄馨祥）, 他的名字，我刚开始看时，以为是一个韩国人，或者是已经嫁人的女人，网上搜了一把后，真是令我大跌眼镜，不但是纯爷们，还是在美国的华人中，个人身价和比尔·盖茨最接近的。根据美国《福布斯》数据，黄馨祥的个人净资产为125亿美元，而两年前这一数字还只是73亿美元，短短两年时间，身价暴增超过了70%。黄馨祥目前在全球亿万富翁排行榜上已经进入Top100，位列第９６位，美国排名是第３７位。那么，这位富翁是靠什么这么富有？答案先按下不表，先介绍一下此人的基本情况。黄馨祥可谓是正宗的华裔，其父母原籍广东台山，二战期间，移民到南非。据百度百科介绍，“他们一家从中国移民至南非，填写姓名时，依照华人习惯，将姓写在前面。但南非填写英文姓名是名在前、姓在后，因此黄馨祥的「馨祥」（Soon-Shiong）变成了他的姓，阴错阳差下，成为他们整个家族的英文姓氏。黄馨祥1952年出生于南非大城市Port Elizabeth, 16岁就高中毕业入读南非知名大学—University of Witwatersrand, 23岁时即获得该校医学博士学位（189位毕业生中排名第四）。提到Witwatersrand 大学，有必要顺便提一下该校的另外一位杰出校友：Deborah Dunsire（也是医学博士），这是另外一位女强人，她曾经担任千禧药业(Millennium)CEO多年，该公司后被日本最大的制药公司武田收购，Deborah Dunsire也因此被任命为武田的董事会成员，是这家日本公司成立几百年以来历史上首位女董事。Deborah Dunsire曾就职的千禧药业（目前已经改名为武田肿瘤Takeda Oncology）也有多位华人工作于此，Deborah Dunsire还曾应邀出席美中医药开发协会纽英伦分会(SAPA-NE)的年会并发表演讲。据报道，南非的Witwatersrand大学是南非的Top3，中文译为金山大学，尽管大概这所大学创办者也许当初希望自己的毕业生都能毕业后拥有金山银山，但是相信99.99%的该校毕业生做不到，但是至少有一位毕业生做到了，即上述的华人黄馨祥。黄馨祥毕业后，在南非著名白人医院—约翰内斯堡总医院（Johannesburg’s General Hospital）外科实习（即住院医生训练）。据媒体报道，黄馨祥是第一位在该医院工作的华裔。实习结束后，由于其妻子Michele B. Chan（也是华裔，参见文首照片）当时想成为一名演员，然而这个梦想在南非很难实现，两人就决定转战北美（顺便说一下，黄太太后来成为了好莱坞演员，真的实现了其梦想）。这是黄馨祥事业成功之路的一个重要转折点。黄馨祥先后在加拿大和美国做外科医生和从事科研（包括著名的美国加州大学洛杉矶分校UCLA）。尽管在美国, 外科医生是收入很高的职业，但是单靠这个职业成为亿万富翁几乎是不可能的，真正为黄馨祥带来巨额财富的，还是其在商业的天才和成功。黄馨祥现在是以他和妻子的名字命名的家庭基金会的主席（Chan Soon-Shiong Family Foundation），大概就是由于这个基金会，让许多中文媒体误以为黄馨祥名字为Chan Soon-Shiong，即陈颂雄，其实“陈”是其妻子的姓(Chan)。黄馨祥还是多家公司和研究所的老总，其中包括：Chan Soon-Shiong Institute for Advanced Health（也是其与妻子名字命名的），National LambdaRail,   Healthcare Transformation Institute and NantWorks, LLC。当然最重要的就是NantWorks公司了，稍后会更详细介绍。黄馨祥至少是三个不同层次的首富：对于其居住地洛杉矶（LA）而言，他是首富；对于他所在国家美国而言，在其所在族裔－华裔群体，他也是首富；对于全球而言，在他的事业开始的职业－医生群体里，他还是首富（全球医生首富）。所以，毫无疑问，黄是名副其实的美国华裔首富。黄馨祥不仅仅在商业上很成功，他也是一位很杰出的外科医生和科学家。1993年，他在世界上首次采用胰腺细胞移植手术用于治疗糖尿病。另外，他发明了蛋白纳米颗粒转运技术用于治疗转移性乳腺癌，这也是美国食品与药品监督局（FDA）批准的第一个这类的药，目前该药（商品名：Abraxane）已在全球40多个国家批准临床应用，2014年全球销售额近8亿美元。该药目前看，不仅仅可以治疗乳腺癌，对肺癌、黑色素瘤、肝癌和胰腺癌的临床实验也正在进行。这个历时10年才开发成功的药，最初由黄馨祥自己创办的Abraxis BioScience公司生产、销售。2010年，该公司以超过３０亿美元的价格被美国著名生物公司Celgene（新基公司）收购。在此之前，黄还在1997年创办了 American  Pharmaceutical Partners （APP） 公司。2008年７月，他以56亿美元的价格将APP卖给了德国的Fresenius SE 。这两桩大买卖无疑奠定了黄今天的超级富豪的地位。如今已经年过花甲的黄馨祥出售上述两家公司后，并没有退休颐养天年。而是凭借此前的丰富商业经验和雄厚资本实力，在2011年成立了一家新公司，即上述的Nantworks, 这是一个集团性质的公司，涵盖了医药行业的多个细分领域。这些公司均已Nant打头，目前至少有：NantCellNantBioscienceNantCloudNantKwestNantHealthNantMobileNantOmicNantShieldNantStudioNantTronics短短四年时间，这十家公司貌似已经成长为黄馨祥的十大金刚。黄馨祥现在在资本运作方面俨然已是高手，凭借其职业优势和对医疗领域未被满足的需求的独到认识，近几年有策略性的兼并收购了一系列公司，分别整合到上述10家子公司。其中之一，NantKwest已于几天前（7月28日）率先IPO, 大获成功，当日市值高达２６亿美元，一举打破了此前朱诺（Juno）IPO的神话记录，是生物技术公司IPO新的里程碑，创造了历史。关于此次IPO的详情, 可点击药源的另外一篇力作：免疫疗法投资经历细胞因子风暴。NantKwest的成功自然不会让黄馨祥停下奋斗的脚步，据媒体报道，下一个IPO的目标就是NantHealth,，也许在不远的将来上述10家甚至更多的Nant公司都会陆续上市，因此，可以预见，黄馨祥个人资产在未来还会继续大幅增长。

最新研究：地球生命始自化学原始汤据英国《每日邮报》7月29日报道，发表在化学物理学报的一项新的研究显示地球生命最初来源于化学原始汤。科学家已经发现长分子链能够自行复制再生产，其他化学物质通过这些模板成型。这项研究的成果显示，活细胞产生的前提是分子链的形成，他们被称为高分子。几乎所有生物过程都依赖高分子，例如脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA，DNA的一种单链形式)以及蛋白质。短链RNA的结合一些科学家认为早期RNA分子能够复制自身并产生多样化时，其他生物反应才得以出现。然而分子复制机制仍是未解之谜。纽约布鲁克黑文国家实验室制作了一个电脑模型，他们发现当温度出现改变，例如白天转换到黑夜时，一些短链接可以互相结合形成模板。这些模板链可以形成更长链接，产生更多可以自行生产的高分子链，但是该研究仍旧没有回答一个关键问题——形成第一粒RNA分子的化学物质来自哪里。

人乙脑病毒抗原（JEV-Ag）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T2ng/L -60ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中乙脑病毒抗原（JEV-Ag）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人乙脑病毒抗原（JEV-Ag）水平。用纯化的人乙脑病毒抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入乙脑病毒抗原（JEV-Ag），再与HRP 标记的乙脑病毒抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的乙脑病毒抗原（JEV-Ag）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人乙脑病毒抗原（JEV-Ag）浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品（96ng/L） 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。48ng/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液24ng/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液12ng/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液6ng/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液3ng/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 个月

新型转基因水稻既高产又环保水稻是全球超过半数人口的主要能量来源，对于人类的粮食安全有着举足轻重的影响。然而，水稻的生长过程每年会释放超过一亿吨甲烷气体，贡献了全球17%的甲烷（温室气体）的释放量。来自中国福建农科院、中国湖南农业大学、瑞典农业大学和美国太平洋西北国家实验室的联合课题组近期在《Nature》刊文称，通过转基因增加一个基因SUSIBA2，可以让水稻基本上不释放甲烷而更加环保，而且淀粉合成量增加，导致食物含有的能量更多。大气中甲烷是继二氧化碳之后的第二大温室气体，对气候变暖的“贡献”占到20%。而水稻是因为人类活动而导致的第二大甲烷释放源。水稻引起的甲烷释放，是因为水稻是需要大量灌溉水的作物，水稻的根本被淤泥和水覆盖，水稻根部产生了热量和一些营养物质，这为产甲烷的产生提供了非常好的条件，这就导致了水稻会产生了7-17%的甲烷量，每年甲烷的排放量在两千五百万到一亿吨。随着人口增加和粮食需求增加，水稻的扩大栽培会继续恶化这个问题，导致更多的甲烷排放进入大气。而科学家一直试图找到转基因方法使得水稻减少甲烷释放，并且提供淀粉的合成或者聚集量，但是同时有这两个特性非常困难。来自中国、美国和瑞典的联合课题组，首次成功研发出了第一种转基因水稻，可以同时减少甲烷释放量和提高稻谷颗粒淀粉含量。其中的关键基因是大麦中的糖信号分子（Sugar signalling in barley 2，SUSIBA2）。SUSIBA2是一种只存在于植物的转录因子，参与调节糖分子诱导的基因表达，因而可能参与了能量分子从合成到固定下来的信号通路。过量表达SUSIBA2可以导致植物更高的淀粉合成和沉积量，因此，如果在水稻叶子和茎秆中过量表达SUSIBA2，可能会增加植株地上部分的淀粉合成量以及在稻穗中的沉积，并且减少甲烷的释放量。两个稳定的转基因SUSIBA2水稻株被选择出来，分别命名为SUSIBA2-77 和 SUSIBA2-80。其中SUSIBA2-77和其对照组（日本晴水稻）在2012年和2013年夏天在中国福州栽培实验。实验结果发现，水稻开花期前，SUSIBA2-77的甲烷释放量降低到了10%，开花后28天，甲烷释放量降为了0.3%。而且测序分析发现，甲烷释放减少确实与SUSIBA2基因相关，而不是随机插入基因组导致的。2014年秋季在中国福州、广州和南宁三地又栽培了SUSIBA2-77 和 SUSIBA2-80发现，这两种有相似的甲烷释放规律，即在早上甲烷释放量高于全天其他时间，这样正好验证了SUSIBA2可以控制糖代谢，夏天和白天太阳很大的时候SUSIBA2基因活性也很强，这时候甲烷释放量会降低很多。科研人员还将继续分析这个转基因为什么会导致甲烷的释放减少，他们希望得到更加具体的分子机制。在全球变暖的大背景下，温度升高导致整个生态圈（包括水稻）的甲烷释放量都会增加，这又反过来会加剧全球变暖的进程。这个SUSIBA2的转基因水稻，则能够很好地完成碳固定和再分配，导致释放进入大气的碳减少，而富集在种子（稻穗）和地上部分（茎秆和叶子），这对于同时保障粮食产量和减少温室气体排放都有重要意义。水稻地上部分的生物量增加，又可以作为生物质燃料的原料，为人们提供更多的能源选择。因此，SUSIBA2转基因水稻的安全性验证如果能够通过的话，那么对于人类的可持续发展将具有重要意义。

人工改造核糖体可以将细胞变成“化工厂”通过劫持细胞的蛋白质合成系统，合成生物学家们开发出了一个工具，可以用来理解抗生素的合成和作用过程，而且可以改造细胞成为特制的“化学工厂”。美国伊利诺伊大学的生化学家Alexander Mankin领导的一个包括生物工程学家的团队，成功改造了细胞内的重要分子机器核糖体，这个研究可能推动合成生物学的继续发展。几乎所有的生命都非常依赖蛋白质合成机器核糖体（ribosome），这个巨大的蛋白质分子机器日夜不休地进行着蛋白质的合成工作。通过读取信使RNA分子模板来获得信息，指导不同类型氨基酸按照信息来排列组合，最终合成出氨基酸链（多肽），这些氨基酸链会继续被转运、修饰、折叠，并最终形成功能蛋白并到达自己的目的地。蛋白质是细胞的功能单位，其意义自不用赘言，因此功能正常的核糖体对于细胞非常重要。核糖体这个巨大的分子机器的工程改造并不容易，因为改造不能与标准的原型差异太大，否则细胞会死亡达不到预期效果。而且，经过工程改造的核糖体可以做到研究者所期望的事情，但是往往会“忘却”正常核糖体的部分功能。核糖体是非常大的功能单位，是一个包括了很多RNA和蛋白质的复合体。RNA占到核糖体很大的比例，而且也被认为与核糖体功能密不可分，甚至直接参与了蛋白质合成的催化过程。研究者们希望能够分出这个大复合体的一部分，使其单独发挥功能，或者加入一些非自然的部件，使得工程改造的核糖体可以做一些不同的事情，比如在蛋白质合成过程中掺入非自然的氨基酸（人工合成或者修饰后的氨基酸），合成出来的这种非自然的多肽可以在制药行业有一定意义。核糖体实际上由两个差异很大亚基构成，一个大些的亚基，一个是小些的亚基。在核糖体即将开始工作时，两个亚基结合起来，完成工作然后分开，并且不断这样循环。每个亚基下次工作碰到的亚基可能是之前没有遇到的。如果使用蛋白质工程改造一部分亚基，那么一般自然、一般人工改造的亚基就可以合成带有非天然氨基酸的蛋白质，但是正常蛋白质的合成也会受阻。Alexander Mankin的研究组的设想是，同时改造两个亚基，让它们在一起发挥作用。他们用了几个月的时间尝试找合适的RNA分子，可以将两个改造后的大小亚基永久性地连接在一起，并使用大肠杆菌来筛选出能够工作的这些被RNA分子连着的工程改造核糖体。最终他们发现了一种改造后的核糖体可以支持大肠杆菌细胞的生长，虽然生长的很慢，但是起码这些改造核糖体能够与正常核糖体一起发挥效用。这个研究开启了合成生物学的新世界：通过RNA分子连接的两个人工改造亚基的核糖体，能够在大肠杆菌中工作，而且不会损伤细胞的其他功能。利用这个改造的核糖体，可以让大肠杆菌细胞做很多的事情，比如研究深入研究核糖体的机制，研究抗生素和核糖体的相互作用，如果进一步扩展细胞的遗传编码方式，可以用这些工程改造的核糖体来合成新的多聚物或，可能将细胞转化成多用途的“细胞化工厂”。

人重组人表皮生长因子（rh-EGF）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T5IU/L -160 IU/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中重组人表皮生长因子（rh-EGF）活性。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人重组人表皮生长因子（rh-EGF）水平。用纯化的人重组人表皮生长因子（rh-EGF）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入重组人表皮生长因子（rh-EGF），再与HRP 标记的重组人表皮生长因子（rh-EGF）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的重组人表皮生长因子（rh-EGF）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人重组人表皮生长因子（rh-EGF）活性浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品（320IU/L） 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。160IU/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液80IU/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液40IU/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液20IU/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液10IU/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 个月

让科技人员合理合法富起来李克强总理27日在国家科技战略座谈会上说，科技人员是科技创新的核心要素，是创造社会财富不可替代的重要力量，应当是社会的中高收入群体。在基础研究收入保障机制外，还要创新收益分配机制，让科技人员以自己的发明创造合理合法富起来，激发他们持久的创新动力。李克强说，本届政府常务会议题21次与科技创新相关。科技创新成败很大程度上决定我国发展战略成败。历史上我们曾几次与科技革命失之交臂，现在必须要把科技创新摆在国家发展全局的核心位置，重塑我国发展竞争新优势。李克强说，中科院与国务院的通道始终畅通。我经常收到院士们的建议，每一份建议我和国务院相关领导都仔细研读，并请有关部门认真研究。中科院学部和广大院士是引导科技创新的重要力量，国家决策的科学化也有赖你们更多参与。“我听一些科技人员反映，因为许多繁琐规章，他们大量时间没法待在实验室，而是用来搞‘内政外交’。每年填写各种表格就会浪费不少精力。”李克强在座谈会上一席话引发“共鸣”。总理说，科研领域也要简政放权，必须创新项目和经费管理机制。李克强说，创新需要自由空间，没有科研人员的自主意识，创新之树就难以常青。在全社会倡导尊重知识尊重人才，首先要创新政府管理和服务，给科研机构和科技人员一片自主天空，这样换来的一定是国家科技创新的大突破大繁荣。他强调，科技创新要“顶天立地”。“顶天”就是力争在科技关键环节取得原始创新成果；“立地”就是面向大众创业万众创新，促进科技成果转化为现实生产力，解决科技与经济“两张皮”问题。“顶天”与“立地”互为依托、相辅相成。

JAMA Neurology：胰岛素抗性会增加患阿尔兹海默病风险众所周知，肥胖会增加患心血管疾病和某些癌症的风险。但爱荷华州立大学的一项新研究表明，记忆丧失应该是人们首要关心的问题。这项研究发表在《美国医学会神经病学》杂志上，该研究发现胰岛素抗性和记忆功能下降之间存在密切关联，这样就增加了患阿尔茨海默氏症的风险。科学家Auriel Willette说在肥胖患者、前驱糖尿病患者或2型糖尿病患者人群中胰岛素抗性是较常见的。Willette和Barbara Bendlin通过脑部扫描检查了150个处于阿尔茨海默氏症风险中的中老年人，但是还没有迹象显示他们记忆丧失。扫描发现如果人们有较高含量的胰岛素抗性水平时大脑区域使用的少量血糖最容易影响到阿尔茨海默氏症。当这种情况发生时，大脑会用很少的能量去传递信息和功能，Willette说。“如果你没有足够的能量，你不会善于记住某事或做某事，”他说，“这对阿尔茨海默病是很重要的，因为在大脑某些区域中血糖的使用逐步减少。这些区域中血糖使用量最终会越来越少。”Willette的工作主要集中于大脑内侧颞叶，特别是海马区，它是大脑学习新事物和长期记忆的一个关键区域。这也是由于阿尔茨海默氏症大脑首次显示大规模萎缩或收缩的区域，Willette说。认知能力下降有直接影响这是首次研究观察中老年人(平均年龄为60岁)胰岛素抗性情况，研究确定降低血糖使用的模式与阿尔茨海默氏症和记忆衰退的关系，Willette说。胰岛素抗性和阿尔茨海默病之间的关联对预防来说是非常重要的，但风险也非常高。Willette说。血糖调节障碍的问题可能会在任何年龄段出现并影响认知功能。研究人员在肥胖患者中测试胰岛素抗性，建议采取改善营养和适度的运动等方式改善病情。这是至关重要的第一步，他说。“基于将来可能会发生什么再来调整我们的行为是非常糟糕的。”Willette说。“这就是为什么人们需要知道胰岛素抗性或相关问题，这对治疗来说很重要。阿尔茨海默氏症不仅仅是在2型糖尿病的患者身上存在。甚至没有患2型糖尿病的病人也有轻度或中度胰岛素抗性，这些患者患有阿尔茨海默氏症的风险可能会增加，因为他们表现出许多相同类型的大脑区域和记忆的关系。”理解认知能力下降的过程需要我们更进一步的研究。Willette说那些经历过痴呆和阿尔茨海默氏症不同阶段的高危人群将提供在他们的认知功能下降时观察周围所发生的事。

人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 96T5ng/L -160 ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中8 羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人8 羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平。用纯化的人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)，再与HRP 标记的8 羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的8 羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)浓度。试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（320 ng/L） 0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。160 ng/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液80 ng/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液40 ng/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液20 ng/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液10 ng/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7. 温育：操作同3。8. 洗涤：操作同5。9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟.10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6 个月

生化学家启动众包网站抵制错误数据根据7月21日一个国际专家小组发布的报告，寻找设计和测试新药的生化学家经常被海量不合格数据困扰。这个由非营利机构、大学以及生物技术和制药公司等46家机构组成的专家组说，他们正在筹建一个类似旅行顾问网站的众包窗口，以解决他们认为处于问题核心的最新化学探针信息。近年来，错误化学探针发展势头迅猛。这些类似药物的小分子主要用于阻止生物化学中决定特定蛋白角色的活动。在理念上，它可以帮助研究人员设计药物复方，该复方可执行类似功能，但却保留了成功制药的一些特征，比如无毒性和人体内可传输性。今天，已经存在着成千上万的类似化学探针。但是他们中大多数会和非目标蛋白结合，或是具有其他不想要的“非目标”作用。“这已经成为一个真正意义上日益严重的问题。”生化学家、英国伦敦癌症研究所（ICR）执行主任Paul Workman说，他也是上述专家组的成员之一。Workman和其他专家表示，要强调的是，许多化学探针会产生虚假的结果，把研究人员误导向他们研究的蛋白和药物分子的错误结论。生化学家表示，他们希望网络众包窗口可以解决这个问题。在ICR、博德研究院、结构基因组学联盟和惠康基金的帮助下，他们已经设立了一个名为化学探针窗口的网站。研究人员可以在该网站给不同的化学探针加注释，以确保同行获得所需要的最新对比信息。然而，这一工作也会存在挑战，因为即便是利用同样探针的研究也经常会存在不同的使用条件和剂量，美国加州大学生化学家Kevan Shokat说。然而，他补充说，只要研究人员重复利用探针，稳定提高对不同探针的理解，就会对生化学家有所帮助。“我认为，这确实是一个好的服务系统。”Shokat说。

Neurology：偏头痛会增加中风的风险吗？近日，新的研究表明有偏头痛的老年人患中风的几率可能会增加，但前提是他们是吸烟者。这项研究发表在2015年7月22日美国神经病学学会的医学杂志《Neurology》上。“我们的发现可能会提供更多的证据有关为什么戒烟对患偏头痛的人非常重要。”医学博士Teshamae Monteith说，“虽然这项调查是在偏头痛老年人和有血管问题的老年人中发现的，但是只患偏头痛的吸烟者会增加中风的风险。早些时候的研究表明，45岁以下的女性患有先兆偏头痛也会增加中风的风险，不管她们是否吸烟。”在这项研究中，曼哈顿北部研究报告的1292人平均年龄68岁，均患有偏头痛，平均随访时间为11年，目的是观察他们是否有心脏病或中风发作。其中，187人无先兆偏头痛，75人有先兆偏头痛。在研究过程中，共有294人患中风、心脏病以及死亡的发生。这项研究没有发现先兆偏头痛与中风或心脏病发作风险之间有关联。然而，在吸烟者中，偏头痛会增加3倍患中风的风险。而在非吸烟者中，偏头痛与患中风风险无关。“从统计数据来看，我们不能排除吸烟者中偏头痛和中风之间存在关系的可能性，然而该研究与其他研究结果是一致的。“Monteith说。

 Human total oxidant status（TOS）ELISA kit FOR RESEARCH USE ONLY Assay range：4pg/mL - 180pg/mL                96 determinationsPurposeThis kit allows for the determination of TOS concentrations in Human serum, cell culture supernates and other biological fluids Principle of the assayThe kit assay Human TOS level in the sample, use Purified Human TOS antibody to coat microtiter plate wells, make solid-phase antibody, then add TOS to wells, Combined TOS antibody which With HRP labeled, become antibody - antigen - enzyme-antibody complex, after washing Completely, Add TMB substrate solution,TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450 nm. The concentration of Human TOS in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.Materials provided with the kit1   wash  solution   20ml×1bottle   7   Stop Solution   6ml×1 bottle   2   HRP-Conjugate reagent   6ml×1 bottle   8   Standard（320pg/mL）   0.5ml×1 bottle   3   Microelisa stripplate   12well×8strips   9   Human total oxidant status（TOS）ELISA kitStandard diluent   1.5ml×1bottle   4   Sample diluent   6ml×1 bottle   10   Instruction   1   5   Chromogen Solution A   6ml×1 bottle   11   Closure plate membrane   2   6   Chromogen Solution B   6ml×1 bottle   12   Sealed bags   1   Specimen requirements1. extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.2. Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.Assay procedure1. Dilute and add sample:Dilute Original density Standard as follow table:160pg/mL   5 Standard   150μl Original density Standard+150μl Standard diluent   80pg/mL   4 Standard   150μl 5 Standard+150μl Standard diluent   40pg/mL   3 Standard   150μl 4 Standard+150μl Standard diluent   20pg/mL   2 Standard   150μl 3 Standard +150μl Standard diluent   10pg/mL   1 Standard   Human total oxidant status（TOS）ELISA kit   150μl 2 Standard +150μl Standard diluent   2. Add sample: Set blank wells separately (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.3. Incubate:  After closing plate with Closure plate membrane , incubate for 30 min at 37℃.4. Configurate liquid: 30-fold(or 20-fold) wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.5. Washing: Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.6. Add enzyme: Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except  blank well. 7. Incubate: Operation with 3.8. Washing: Operation with 5.9. Color: Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B 50ul to each well, evade the light preservation for 10 min at 37℃10. Stop the reaction: Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).11. Assay: take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.Steps descriptionStandard, Sample diluent     Add Standard, Sample diluent, incubate for 30 min at 37℃.     Wash 5 time,Add HRP-Conjugate reagent, incubate for 30 min at 37℃.     Wash 5 times,Add Chromogen Solution A and B, incubate for 10 min at 37℃.     Add Stop Solution     Read absorbance at 450nm within 15 min     calculate  Human total oxidant status（TOS）ELISA kit   CalculateTake the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor, the result is the sample actual density.Important notes1. The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes in the room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.2. washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolve when dilute . Washing does not affect the result.3. add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids the experimental error. add sample within 5 min, if the number of sample is much , recommend to use Volley .4. if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the first standard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.5. Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.6. The substrate evade the light preservation.7. Please according to use instruction strictly, The test result determination must take the microtiter plate reader as a standard.8. All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective material process.9. Do not mix reagents with those from other lots. Storage and validity1．Storage：  2-8℃.2．validity： six months

电子香烟可替代传统香烟吗？一直以来，电子香烟(e-cigs)被吹捧为一个非常有用的工具，可以帮助吸烟者戒掉传统香烟，大部分人认为传统的香烟被比电子香烟更有害。但是，由于电子香烟也含有尼古丁及可以释放出致癌物，之前提出的观点正确吗？一个研究团队近日在ACS 杂志Chemical Research in Toxicology上发表了一篇文章，报道中称，电子香烟中的大多数尼古丁是可引起成瘾的那种尼古丁。尽管电子香烟并不燃烧烟草，而是加热使液体蒸发，其中包含尼古丁，调味剂及其他物质。出于考虑到吸入这种混合物，可能会对年轻人的健康产生潜在影响，许多国家已经禁止将电子香烟销售给未成年人。一些专家称，尼古丁可能使电子香烟使用者对其上瘾，或者会引导他们投向传统香烟或其他药物。但是并不是所有的尼古丁都是一样的，研究尚未调查清楚，在电子香烟液体中的是哪一种尼古丁。在尼古丁的三种形式中，科学家们认为，"自由基"尼古丁是可以被人体吸收的唯一形式，也是最容易上瘾的一种。Najat Saliba和她的同事们想研究清楚，在电子香烟中是哪种尼古丁。研究人员们测试了售卖的电子香烟中的液体样本，他们发现，大多数的电子香烟中的尼古丁是最容易使人上瘾的那种。他们还发现，电子香烟中尼古丁的含量不定，而且常常与标签上所标明的浓度不吻合。