人葡萄糖氧化酶(GOD)检测试剂盒操作步骤
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在人葡萄糖氧化酶(GOD)检测试剂盒检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
方法二 用于检测未知抗体的间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,
每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。
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加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔
中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)
↓
于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,
37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。
↓
人葡萄糖氧化酶(GOD)检测试剂盒其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
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(VEGF165)
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企业名称
上海沪震实业有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310112001371133
成立日期
2012-05-08
注册资本
100
经营范围
实验室分析仪器、仪器仪表、电子产品、化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用爆炸物品、易制毒化学品)、一类医疗器械的销售,实业投资,投资咨询(除经纪),景观设计,从事生物科技领域内的技术开发、技术转让、技术咨询、技术服务,建筑装修装饰建设工程专业施工(凭许可资质经营),汽车租赁(除融资租赁)。【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】
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