尽管ELISA测定的操作步骤非常简单,人促胰液素(SCT)检测试剂盒但有可能会影响测定结果的因素却较多,分布在测定操作的各步之中,尤以加样、温育和洗板为甚。为帮助大家分析查找测定中出现问题的可能原因,特对常见问题及原因归纳总结于下表。
人促胰液素(SCT)检测试剂盒问题可能的原因(非试剂盒本身的原因)
一.弱阳性质控样本检测不出
温育的时间或温度不够;显色反应时间太短;所用配制缓冲液的蒸馏水有问题
二.测定的重复性差(相同样本两次测定结果不一致)
这是典型的由测定操作引起的问题,包括:(1)加样本及试剂量不准;孔间不一致;(2)加样过快,孔间发生污染;(3)加错样本;(4)加样本及试剂时,加在孔壁上部非包被区;(5)不同批号试剂盒中组分混用;(6)人促胰液素(SCT)检测试剂盒温育时间、洗板、显色时间不一致;(7)孔内污染杂物;(8)酶标仪滤光片不正确;(9)血清标本未完全凝固即加入,反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血细胞,易出现假阳性反应等。
三.白板(阳性对照不显色)
(1)漏加酶结合物;
(2)洗板液配制中出现问题,如量筒不干净,含酶抑制物(如叠氮钠)等。
(3)漏加显色剂A或B;
(4)终止剂当显色剂使用。
四.全部板孔均有显色
(1)洗板不干净;
(2)显色液变质;
(3)加底物的吸光受酶污染;
(4)洗板液受酶等污染。
使用微量加样器加样必须注意的关键点是:人促胰液素(SCT)检测试剂盒加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致.
HZF824Hu ELISA Kit for Translocation Associated Membrane Protein 1 (TRAM1) 人易位关联膜蛋白1(TRAM1)检测试剂盒
HZG301Hu ELISA Kit for Absent In Melanoma 1 (AIM1) 人黑素瘤缺乏因子1(AIM1)检测试剂盒
HZG753Hu ELISA Kit for TNF Receptor Associated Factor 3 (TRAF3) 人TNF受体关联因子3(TRAF3)检测试剂盒
HZG755Hu ELISA Kit for TNF Receptor Associated Factor 5 (TRAF5) 人TNF受体关联因子5(TRAF5)检测试剂盒
HZH022Hu ELISA Kit for Toll Like Receptor Adaptor Molecule 1 (TICAM1) 人Toll样受体衔接分子1(TICAM1)检测试剂盒
HZH061Hu ELISA Kit for TANK Binding Kinase 1 (TBK1) 人TANK结合激酶1(TBK1)检测试剂盒
HZH596Hu ELISA Kit for V-Maf Musculoaponeurotic Fibrosarcoma 人V-Maf肌肉腱膜纤维肉瘤癌基因同源物(MA人促胰液素(SCT)检测试剂盒F)检测试剂盒
Oncogene Homolog (MAF)
HZH751Hu ELISA Kit for V-Ki-Ras2 Kirsten Rat Sarcoma 人V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)检测试剂盒
Viral Oncogene Homolog (KRAS)
HZH821Hu ELISA Kit for Interleukin 18 Binding Protein (IL18BP) 人白介素18结合蛋白(IL18BP)检测试剂盒
HZJ176Hu ELISA Kit for Early Endosome Antigen 1 (EEA1) 人早期内体抗原1(EEA1)检测试剂盒
HZJ239Hu ELISA Kit for Dolichyl Phosphate-N- 人多萜醇磷酸-N-乙酰氨基葡萄糖磷酸转移酶1(DPAGT1)检测试剂盒
Acetylglucosaminephosphotransferase 1 (DPAGT1)
HZJ282Hu ELISA Kit for DNA Damage Inducible Transcript 3 (DDIT3) 人DNA损伤诱导转录因子3(DDIT3)检测试剂盒
HZJ708Hu ELISA Kit for H2A Histone Family, Member V (H2AFV) 人H2A组蛋白家族成员V(H2AFV)检测试剂盒
HZJ822Hu ELISA Kit for Inhibitor Of Kappa-Light 人B-细胞κ-轻肽基因增强子抑制因子激酶β(IκBKβ)检测试剂盒
Polypeptide Gene Enhancer In B-Cells Kinase Beta (IkBKb)
HZK089Hu ELISA Kit for Snail Homolog 1 (SNAI1) 人Snail同源物1(SNAI1)检测试剂盒
HZL639Hu ELISA Kit for Kazal Type Serine Protease 人含Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂域蛋白1(KAZALD1)检测试剂盒
Inhibitor Domain Containing Protein 1 (KAZALD1)
HZG086Hu ELISA Kit for Purinergic Receptor P2Y, G Protein Coupled 12 (P2RY12) 人嘌呤能受体P2Y12(P2RY12)检测试剂盒
HZL701Hu ELISA Kit for Microtubule Associated Protein 1 Light Chain 3 人微管关联蛋白1轻链3α(MAP1LC3α)检测试剂盒
Alpha (MAP1LC3a)