尽管ELISA测定的操作步骤非常简单,人II型前胶原氨基端原肽(PIINP)检测试剂盒但有可能会影响测定结果的因素却较多,分布在测定操作的各步之中,尤以加样、温育和洗板为甚。为帮助大家分析查找测定中出现问题的可能原因,特对常见问题及原因归纳总结于下表。
人II型前胶原氨基端原肽(PIINP)检测试剂盒问题可能的原因(非试剂盒本身的原因)
一.弱阳性质控样本检测不出
温育的时间或温度不够;显色反应时间太短;所用配制缓冲液的蒸馏水有问题
二.测定的重复性差(相同样本两次测定结果不一致)
这是典型的由测定操作引起的问题,包括:(1)加样本及试剂量不准;孔间不一致;(2)加样过快,孔间发生污染;(3)加错样本;(4)加样本及试剂时,加在孔壁上部非包被区;(5)不同批号试剂盒中组分混用;(6)人II型前胶原氨基端原肽(PIINP)检测试剂盒温育时间、洗板、显色时间不一致;(7)孔内污染杂物;(8)酶标仪滤光片不正确;(9)血清标本未完全凝固即加入,反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血细胞,易出现假阳性反应等。
三.白板(阳性对照不显色)
(1)漏加酶结合物;
(2)洗板液配制中出现问题,如量筒不干净,含酶抑制物(如叠氮钠)等。
(3)漏加显色剂A或B;
(4)终止剂当显色剂使用。
四.全部板孔均有显色
(1)洗板不干净;
(2)显色液变质;
(3)加底物的吸光受酶污染;
(4)洗板液受酶等污染。
使用微量加样器加样必须注意的关键点是:人II型前胶原氨基端原肽(PIINP)检测试剂盒加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致.
HZB290Hu ELISA Kit for V-Myc Myelocytomatosis Viral Oncogene 人V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)检测试剂盒
Homolog (MYC)
HZB291Hu ELISA Kit for V-Fos FBJ Murine Osteosarcoma Viral 人V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)检测试剂盒
Oncogene Homolog (FOS) 人II型前胶原氨基端原肽(PIINP)检测试剂盒
HZC921Hu ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor Subunit B (PDGFB) 人血小板衍生生长因子B(PDGFB)检测试剂盒
HZA728Hu ELISA Kit for Prostaglandin Endoperoxide Synthase 1 (PTGS1) 人环加氧酶1(PTGS1)检测试剂盒
HZA646Hu ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 6 (BMP6) 人骨形成蛋白6(BMP6)检测试剂盒
HZA651Hu ELISA Kit for Hyaluronan Binding Protein 1 (HABP1) 人透明质酸结合蛋白1(HABP1)检测试剂盒
HZA687Hu ELISA Kit for Calretinin (CR) 人钙结合蛋白(CR)检测试剂盒
HZB298Hu ELISA Kit for Adrenergic Receptor Alpha 1A (ADRa1A) 人肾上腺素能受体α1A(ADRα1A)检测试剂盒
HZB299Hu ELISA Kit for Dopamine Receptor D1 (DRD1) 人多巴胺受体D1(DRD1)检测试剂盒
CEB301Ge ELISA Kit for Asymmetrical Dimethylarginine (ADMA) 人不对称二甲基精氨酸(ADMA)检测试剂盒
HZB302Hu ELISA Kit for Agouti Related Protein (AGRP) 人野鼠色基因相关蛋白(AGRP)检测试剂盒
HZB303Hu ELISA Kit for Agrin (AGRN) 人集聚蛋白(AGRN)检测试剂盒
HZB304Hu ELISA Kit for Complement C5 Convertase (C5c) 人补体C5转化酶(C5c)检测试剂盒
HZB305Hu ELISA Kit for Complement Component 4b (C4b) 人补体成分4b(C4b)检测试剂盒
HZB309Hu ELISA Kit for Pleiotrophin (PTN) 人多效生长因子(PTN)检测试剂盒
HZB310Hu ELISA Kit for Elastase 4 (ELA4) 人弹性蛋白酶4(ELA4)检测试剂盒
CEB311Hu ELISA Kit for Proopiomelanocortin (POMC) 人阿黑皮素原(POMC)检测试剂盒
HZB312Hu ELISA Kit for Secretory Leukocyte Peptidase Inhibitor (SLPI) 人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)检测试剂盒
HZB314Hu ELISA Kit for Glutathione Reductase (GR) 人谷胱甘肽还原酶(GR)检测试剂盒
HZB316Hu ELISA Kit for Procollagen C Proteinase Enhancer 1 (PCPE1) 人前胶原C端蛋白酶增强子1(PCPE1)检测试剂盒
HZB317Hu ELISA Kit for Perforin 1 (PRF1) 人穿孔素1(PRF1)检测试剂盒
HZB319Hu ELISA Kit for Microtubule Associated Protein 4 (MAP4) 人微管关联蛋白4(MAP4)检测试剂盒