人胆固醇-25-羟化酶(CH25H)ELISA试剂盒

人胆固醇-25-羟化酶(CH25H)ELISA试剂盒  加入反应终止液后，没有吸光值或吸光值偏低。
a.原因：未加入酶标记物。
解决办法：请按照操作步骤进行。
b.原因：试剂盒内容物未能充分回。
解决办法：确定试剂盒内容物回温后再进行操作。
c.原因：室温太低。
解决办法：若室温太低(<19℃)，请于操作步骤4，适当延长温育时间。
d.原因：未使用试剂盒的清洗液清洗。
解决办法： 请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。

e.原因：人胆固醇-25-羟化酶(CH25H)ELISA试剂盒已过有效期限。
解决办法：请更换成仍在有效期限内的试剂盒。
2. 标准曲线线性不佳，或是平行性不好。
a.原因：温育位置避光不好或受到气流干扰。人胆固醇-25-羟化酶(CH25H)ELISA试剂盒 技术要点包括三个方面：试剂的制备、反应条件的选择和操作的标准化。

（1）抗体免疫球蛋白用包被缓冲液稀释至蛋白浓度为10、1和0.1μg/ml，分别在ELISA板上进行包被，每一浓度包括三个纵行，洗涤。
　　（2）在一个横行各包被孔中加入强阳性抗原液，另一横行加入弱阳性抗原液，第三横行加入阴性对照液，保温，洗涤。
　　（3）将酶标抗体用稀释液稀释成三个浓度，例如1:1000、1:5000和1:25000。分别加入每一包被浓度的一个纵行中，保温，洗涤。
　　（4）加底物显色。加酸终止反应后，读取A值。
　　（5）以强阳性抗原的A值在0.8左右、阴性参考的A值小于0.1的条件作最适条件，据此选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度。从表15-2可看出包被抗体浓度可选用1μg/ml，酶标抗体的稀释度可选为1:5000。为了进一步节省试剂，可以此浓度为基点，缩小间距再做进一步的棋盘滴定。

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