肺炎克雷伯菌

细胞培养基的基本成分

液体培养基保存：液体培养基应于4℃冰箱避光保存，实验前放入37℃预热。未加血清液体培养基有效期为12 个月。液体培养基中的L-谷氨酰胺会随着储存时间的延长而慢慢分解。如果细胞生长不良，可以再添加适量L-谷氨酰胺。

干粉培养基保存：肺炎克雷伯菌4℃冰箱避光保存，有效期36 个月。

血清：细胞培养液中添加的血清有牛血清、马血清、人血清等，其中牛血清是最常用的血清，分为胎牛血清和新生小牛血清。胎牛血清是从母牛破腹取出的胎牛中分离出的血清，价格昂贵。新生小牛血清是从刚出生的尚未哺乳的小牛中分离出来的血清，如厂家能做到这一点，新生小牛血清的质量与胎牛血清的质量相差不大。如小牛出生后已哺乳，从这种小牛中取出的血清中可能含有较多的生物活性物质，其质量明显不如前两种。

血清的质量，种类及使用的浓度都有可能影响细胞的生长，而不同批肺炎克雷伯菌次的血清支持细胞生长的能力也不同，尤其是对克隆细胞的生长，某些批次血清可能含有毒性或抑制细胞生长的物质。因此，在购买大量血清之前，必须对血清支持细胞生长能力进行检测，然后再大量购买质量好的同一批号的血清，并注意以下几点：

（1）需要长期保存的血清必须储存于-20℃ – 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1 个月。由于血清结冰时体积会增加约10％，因此，血清在冻入低温冰箱前，必须预留一定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。

（2）一般厂商提供的血清为无菌，无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物，则可将血清加入培养液内一起过滤，切勿直接过滤血清。

（3）瓶装血肺炎克雷伯菌清解冻需采用逐步解冻法：-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1 天。然后移入室温，待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀（小心勿造成气泡），使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。

（4）热灭活是指56℃, 30 分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中須規則搖晃均勻。此热处理的目的是使血清中的补体成分（complement）灭活。除非必须，一般不建议作此热处理，因为热处理会造成血清沉淀物显著增多，而且还会影响血清的质量。补体参与反应有：细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。

（5）切勿将血清在37℃放置太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中的有效肺炎克雷伯菌成分会破会而影响血清质量。

（6）血清中的沉淀物

絮状物：主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成，这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm, 5 分钟去除，也可不用处理。

显微镜下“小黑点”：经过热处理过的血清，沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象“小黑点”，常误认为血清受污染。一般情况下，此小黑点不会影响细胞生长，但如果怀疑血清质量，则应立即停止使用，更换另一批号的血清。

HZA080Gu 豚鼠白介素8(IL8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 8 (IL8) 

HZA056Gu 豚鼠白介素10(IL10)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10) 

HZA078Gu 豚鼠白介素5(IL5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 5 (IL5) 

HZA104Gu 豚鼠胆囊收缩素A受体(CCKAR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR) 

HZA103Gu 豚鼠基质金属蛋白酶8(MMP8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 8 (MMP8) 

HZA116Gu 豚鼠调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Regulated On Activation In Normal T-Cell Expressed And Secreted (RANTES) 

HZC011Gu 豚鼠补体因子B(CFB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Factor B (CFB) 

HZA073Gu 豚鼠白介素2(IL2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 2 (IL2) 

HZA033Gu 豚鼠干扰素α(IFNα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interferon Alpha (IFNa) 

HZA051Gu 豚鼠胰岛素样生长因子2(IGF2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 (IGF2) 

HZA128Gu 豚鼠组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2) 

HZB949Gu 豚鼠转化生长因子β3(TGFβ3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 3 (TGFb3) 

HZA058Gu 豚鼠白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 12B (IL12B) 

HZA217Gu 豚鼠α1-微球蛋白(α1M)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alpha-1-Microglobulin/Bikunin Precursor (a1M) 

HZA061Gu 豚鼠白介素15(IL15)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 15 (IL15) 

HZA050Gu 豚鼠胰岛素样生长因子1(IGF1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1) 

HZA225Gu 豚鼠心钠肽(ANP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP) 

HZA178Gu 豚鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alpha-2-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG)