近平滑假丝酵母

细胞培养基的基本成分

液体培养基保存：液体培养基应于4℃冰箱避光保存，实验前放入37℃预热。未加血清液体培养基有效期为12 个月。液体培养基中的L-谷氨酰胺会随着储存时间的延长而慢慢分解。如果细胞生长不良，可以再添加适量L-谷氨酰胺。

干粉培养基保存：近平滑假丝酵母4℃冰箱避光保存，有效期36 个月。

血清：细胞培养液中添加的血清有牛血清、马血清、人血清等，其中牛血清是最常用的血清，分为胎牛血清和新生小牛血清。胎牛血清是从母牛破腹取出的胎牛中分离出的血清，价格昂贵。新生小牛血清是从刚出生的尚未哺乳的小牛中分离出来的血清，如厂家能做到这一点，新生小牛血清的质量与胎牛血清的质量相差不大。如小牛出生后已哺乳，从这种小牛中取出的血清中可能含有较多的生物活性物质，其质量明显不如前两种。

血清的质量，种类及使用的浓度都有可能影响细胞的生长，而不同批次的血清支持细胞生长的能力也不同，尤其是对克隆细胞的生长，某些批次血清可能含有毒性或抑制细胞生长的物质。因此，在购买大量血清之前，必须对血清支持细胞生长能力进行检测，然后再大量购买质量好的同一批号的血清，并注意以下几点：

（1）需要长期保存的血清必须储存于-20℃ – 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1 个月。由于血清结冰时体积会增加约10％，因此，血清在冻入低温冰箱前，必须预留一定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。近平滑假丝酵母

（2）一般厂商提供的血清为无菌，无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物，则可将血清加入培养液内一起过滤，切勿直接过滤血清。

（3）瓶装血清解冻需采用逐步解冻法：-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1 天。然后移入室温，待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀（小心勿造成气泡），使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。

（4）热灭活是指56℃, 30 分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中須規則搖晃均勻。此热处理的目的是使血清中的补体成分（complement）灭活。除非必须，一般不建议作此热处理，因为热处理会造成血清沉淀物显著增多，而且还会影响血清的质量。补体参与反应有：细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。

（5）切勿将血清在37℃放置太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量。

（6）血清中的沉淀物近平滑假丝酵母

絮状物：主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成，这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm, 5 分钟去除，也可不用处理。

显微镜下“小黑点”：经过热处理过的血清，沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象“小黑点”，常误认为血清受污染。一般情况近平滑假丝酵母下，此小黑点不会影响细胞生长，但如果怀疑血清质量，则应立即停止使用，更换另一批号的血清。

人鼻咽癌细胞 5-8F细胞 

人膀胱移行细胞乳头瘤细胞 RT4细胞 

人膀胱移行细胞癌细 T-24细胞 

人膀胱移行细胞癌 J82细胞 

人膀胱鳞癌 ScaBER细胞 

人膀胱癌细胞 5637细胞 

人瘢痕疙瘩成纤维细胞 HKF细胞 

人XG恶性胶质瘤细胞 SF-295细胞 

人T细胞白血病细胞 6T-CEM细胞 

人T淋巴细胞白血病细胞 A3细胞 

人SV40转染成骨细胞 hFOB 1.19细胞 

人Ph+急淋白血病细胞系 SUP-B15细胞 

人B淋巴母细胞 HMy2.CIR细胞 

人Burkitt's淋巴瘤细胞 Daudi细胞 

前列腺癌 p69细胞 

牛肾细胞 MDBK (NBL-1)细胞 

牛胚气管细胞 EBTr (NBL-4)细胞 

脑胶质瘤 SHG-44细胞 

猫肾细胞 CRFK细胞 

甲状腺癌细胞（未分化） ARO细胞 

急髓白血病细胞 HL60细胞 

鸡胚成纤维细胞 UMNSAH/DF-1细胞 

猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞 RF/6A细胞 

喉表皮样癌 Hep-2细胞 

恒河猴肾细胞 MA-104细胞 

恒河猴胚肾细胞 FRhK-4细胞 

褐鼠胰岛素瘤上皮细胞 RIN-m细胞 

骨髓瘤细胞株 U266细胞