昆虫细胞系 SF-9细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控昆虫细胞系 SF-9细胞制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoe昆虫细胞系 SF-9细胞chst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
昆虫细胞系 SF-9细胞
HZA303Hu 人半乳糖凝集素3(GAL3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galectin 3 (GAL3)
HZA131Hu 人转化生长因子β诱导蛋白(TGFβI)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Induced Protein (TGFbI)
HZC047Hu 人Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ki-67 Protein (Ki67P)
HZC130Hu 人头蛋白(NOG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Noggin (NOG)
HZA162Hu 人嗅素4(OLFM4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Olfactomedin 4 (OLFM4)
HZB271Hu 人IgG-Fc片段低亲和力受体Ⅲb(FcγR3B)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fc Fragment Of IgG Low Affinity IIIb Receptor (FcgR3B)
HZC864Hu 人硬骨素(SOST)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Sclerostin (SOST)
HZB978Hu 人补体因子I(CFI)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Factor I (CFI)
HZD024Hu 人心肌型兰尼定受体2(RYR2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ryanodine Receptor 2, Cardiac (RYR2)
HZA203Hu 人前动力蛋白受体1(PKR1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Prokineticin Receptor 1 (PKR1)
HZA307Hu 人半乳糖凝集素7(GAL7)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galectin 7 (GAL7)
HZA309Hu 人半乳糖凝集素9(GAL9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galectin 9 (GAL9)
CEA115Hu 人前动力蛋白2(PK2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Prokineticin 2 (PK2)
HZA117Hu 人胞外超氧化物歧化酶(SOD3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3)
HZA153Hu 人甲胎蛋白(αFP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP)
AEC045Hu 人抗存活素抗体(Anti-Surv)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Anti-Survivin Antibody (Anti-Surv)
CEA242Hu 人摄食抑制因子1(NES1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Nesfatin 1 (NES1)
HZB489Hu 人粘蛋白6(MUC6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mucin 6 (MUC6)
HZC885Hu 人突触足蛋白(SYNPO)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Synaptopodin (SYNPO)
HZA149Hu 人Ⅳ型胶原α1(COL4α1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Collagen Type IV Alpha 1 (COL4a1)
HZC549Hu 人外皮蛋白(EVPL)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Envoplakin (EVPL)
HZA147Hu 人脂联素受体1(ADIPOR1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1)
HZB791Hu 人成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor Receptor 1 (FGFR1)
HZC561Hu 人淋巴细胞胞浆蛋白1(LCP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lymphocyte Cytosolic Protein 1 (LCP1)
HZC030Hu 人脑型肌酸激酶(CKB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Creatine Kinase, Brain (CKB)
HZA523Hu 人血小板衍生生长因子AA(PDGFAA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor AA (PDGFAA)
HZC450Hu 人细胞外基质蛋白1(ECM1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Extracellular Matrix Protein 1 (ECM1)
HZB882Hu 人成纤维细胞生长因子10(FGF10)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 10 (FGF10)