蜡蚧轮枝孢菌凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将蜡蚧轮枝孢菌二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蜡蚧轮枝孢菌蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
蜡蚧轮枝孢菌
HZB984Hu 人τ-蛋白激酶1(τPK1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tau-Protein Kinase 1 (tPK1)
HZB985Hu 人上皮型脂肪酸结合蛋白(FABP5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 5, Epidermal (FABP5)
HZB986Hu 人血红素结合蛋白(HPX)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hemopexin (HPX)
HZB872Hu 人CD3d分子(CD3d)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 3d (CD3d)
HZB988Hu 人Toll样受体1(TLR1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Toll Like Receptor 1 (TLR1)
HZB989Hu 人Toll样受体3(TLR3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Toll Like Receptor 3 (TLR3)
HZB990Hu 人Toll样受体5(TLR5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Toll Like Receptor 5 (TLR5)
HZB991Hu 人Toll样受体8(TLR8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Toll Like Receptor 8 (TLR8)
HZB992Hu 人Toll样受体10(TLR10)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Toll Like Receptor 10 (TLR10)
HZB994Hu 人抑制蛋白β2(ARRβ2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Arrestin Beta 2 (ARRb2)
HZB996Hu 人载脂蛋白C2(APOC2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Apolipoprotein C2 (APOC2)
HZB997Hu 人载脂蛋白A5(APOA5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Apolipoprotein A5 (APOA5)
HZB998Hu 人KSP钙黏蛋白(CDH16)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cadherin 16 (CDH16)
HZC000Hu 人触珠蛋白相关蛋白(HPR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Haptoglobin Related Protein (HPR)
HZC002Hu 人肝肠钙黏蛋白(CDH17)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cadherin 17 (CDH17)
HZC008Hu 人白介素35(IL35)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 35 (IL35)
HZC017Hu 人Ⅱ型前胶原(PCⅡ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Procollagen II (PCII)
HZC032Hu 人白介素22(IL22)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 22 (IL22)
HZC033Hu 人热休克蛋白β8(HSPβ8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Heat Shock Protein Beta 8 (HSPb8)
HZC023Hu 人葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glucose Transporter 4 (GLUT4)
HZC024Hu 人线粒体乙醛脱氢酶(ALDM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Aldehyde Dehydrogenase, Mitochondrial (ALDM)
HZC025Hu 人角蛋白8(KRT8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Keratin 8 (KRT8)
HZC034Hu 人生长分化因子15(GDF15)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15)
HZC039Hu 人肥胖抑制素(OB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Obestatin (OB)