绿色木霉

绿色木霉凋亡检测技术与方法详解：

细胞凋亡（Apoptosis）,又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者绿色木霉区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.

一、细胞凋亡的形态学检测

根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.

1、光学显微镜和倒置显微镜

（1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.

（2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.

2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜

 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.

常用的DNA特异性染料有：HO 3绿色木霉3342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.

Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判：细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期：Ⅰ期的细胞核呈波纹状（rippled）或呈折缝样（creased）,部分染色质出现浓缩状态；aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。

胞凋亡检测技术与方法图

绿色木霉

HZB389Hu 人含血管性血友病因子A域蛋白2(vWA2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Von Willebrand Factor A Domain Containing Protein 2 (vWA2)

HZB390Hu 人腺苷脱氨酶(ADA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Adenosine Deaminase (ADA)

HZB403Hu 人腺苷酸环化酶2(ADCY2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Adenylate Cyclase 2, Brain (ADCY2)

HZB406Hu 人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lipopolysaccharide Binding Protein (LBP)

HZB408Hu 人原卟啉(EPP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Erythrocyte Protoporphyrin (EPP)

CEB409Hu 人血红蛋白(HB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hemoglobin (HB)

HZB429Hu 人多巴胺β羟化酶(DβH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Dopamine Beta Hydroxylase (DbH)

HZB438Hu 人酪氨酸羟化酶(TH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tyrosine Hydroxylase (TH)

HZB524Hu 人神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Neuronal Apoptosis Inhibitory Protein (NAIP)

HZB530Hu 人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Platelet Membrane Glycoprotein IV (GP4)

HZA695Hu 人髓样前体细胞抑制因子2(MPIF2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2 (MPIF2)

HZA957Hu 人Ⅰ型前胶原氨基端原肽(PⅠNP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Procollagen I N-Terminal Propeptide (PINP)

HZA976Hu 人维甲酸受体α(RARα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Retinoic Acid Receptor Alpha (RARa)

HZB737Hu 人信号传导转录激活因子6(STAT6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 6 (STAT6)

HZB738Hu 人信号传导转录激活因子5A(STAT5A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 5A (STAT5A)

HZB739Hu 人信号传导转录激活因子4(STAT4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 4 (STAT4)