绿色荧光蛋白标记小鼠子宫颈癌细胞 U14-GFP细胞

绿色荧光蛋白标记小鼠子宫颈癌细胞 U14-GFP细胞凋亡检测技术与方法详解：

细胞凋亡（Apoptosis）,又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.

一、细胞凋亡的形态学检测

根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.

1、光学显微镜和倒置显微镜绿色荧光蛋白标记小鼠子宫颈癌细胞 U14-GFP细胞

（1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.

（2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.

2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜

 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.

常用的DNA特异性染料有：HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.

Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储绿色荧光蛋白标记小鼠子宫颈癌细胞 U14-GFP细胞存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判：细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期：Ⅰ期的细胞核呈波纹状（rippled）或呈折缝样（creased）,部分染色质出现浓缩状态；aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。

胞凋亡检测技术与方法图

绿色荧光蛋白标记小鼠子宫颈癌细胞 U14-GFP细胞

(VEGFR2)

HZB368Hu 人肝配蛋白A受体1(EPHA1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ephrin Type A Receptor 1 (EPHA1)

HZB370Hu 人乳酸脱氢酶A(LDHA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lactate Dehydrogenase A (LDHA)

HZB371Hu 人转醛缩酶(TALDO1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transaldolase (TALDO1)

HZB372Hu 人鳞状细胞癌抗原1(SCCA1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Squamous Cell Carcinoma Antigen 1 (SCCA1)

HZB375Hu 人γ-谷氨酰转移酶1(γGT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Gamma-Glutamyltransferase 1 (gGT1)

HZB376Hu 人乳腺癌易感蛋白1(BRCA1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Breast Cancer Susceptibility Protein 1 (BRCA1)

HZA210Hu 人糖抗原72-4(CA72-4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Carbohydrate Antigen 72-4 (CA72-4)

HZA700Hu 人棕榈酰化膜蛋白6(MPP6)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Membrane Protein, Palmitoylated 6 (MPP6)

HZA929Hu 人视黄醇结合蛋白4(RBP4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Retinol Binding Protein 4, Plasma (RBP4)

HZA653Hu 人骨形成蛋白1(BMP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 1 (BMP1)

HZA211Hu 人基质金属蛋白酶23A(MMP23A)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 23A (MMP23A)

HZA267Hu 人组织蛋白酶K(CTSK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cathepsin K (CTSK)

HZA104Hu 人胆囊收缩素A受体(CCKAR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR)

HZA109Hu 人肌肌酸激酶(CKM)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Creatine Kinase, Muscle (CKM)

HZA113Hu 人核糖核酸酶T2(RNASET2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ribonuclease T2 (RNASET2)

HZA069Hu 人N-乙酰β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)ELISA试剂盒 ELISA Kit for N-Acetyl Beta-D-Glucosaminidase (NAGase)

HZA158Hu 人激活素AB(ACVAB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Activin AB (ACVAB)

HZA160Hu 人α2-纤溶酶抑制因子(α2PI)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI)

HZA164Hu 人泛素(Ub)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ubiquitin (Ub)

HZA196Hu 人半乳糖苷酶β(GLβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galactosidase Beta (GLb)

HZA208Hu 人丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Pyruvate Kinase, Liver And RBC (PK)

HZA235Hu 人补体1抑制因子(C1INH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement 1 Inhibitor (C1INH)

CEA239Hu 人α-黑色素细胞刺激素(αMSH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alpha-Melanocyte Stimulating Hormone (aMSH)

HZA243Hu 人对氧磷酶1(PON1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Paraoxonase 1 (PON1)