人表皮癌细胞 A-431细胞

人表皮癌细胞 A-431细胞凋亡检测技术与方法详解：

细胞凋亡（Apoptosis）,又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.

一、细胞凋亡的形态学检测

根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.

1、光学显微镜和倒置显微镜

（1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整人表皮癌细胞 A-431细胞但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.

（2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.

2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜

 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.

常用的DNA特异性染料有：HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.

Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞人表皮癌细胞 A-431细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判：细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期：Ⅰ期的细胞核呈波纹状（rippled）或呈折缝样（creased）,部分染色质出现浓缩状态；aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。

胞凋亡检测技术与方法图

人表皮癌细胞 A-431细胞

hz-E11033 人蛋白质二硫键异构酶(PDI)ELISA试剂盒 Human protein disulfide isomerase,PDI ELISAkit

hz-E11034 人胱天蛋白酶激活的脱氧核糖核酸酶(CAD)ELISA试剂盒 Human caspase activated deoxyribonuclease,CAD ELISAkit

hz-E11035 人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)ELISA试剂盒 Humanγ-glutamyl systeine synthetase,γ-ECS ELISAkit

hz-E11036 人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA试剂盒 Human E1/ubiquitin-activating enzyme,E1/UBAE ELISAkit

hz-E11037 人胃蛋白酶(PP)ELISA试剂盒 Human Pepsin,PP ELISAkit

hz-E11038 人己糖激酶(HK)ELISA试剂盒 Human Hexokinase,HK ELISAkit

hz-E11039 人丙酮酸脱氢酶E1(PDH E1)ELISA试剂盒 Human pyruvate dehydrogenase-E1,PDH E1 ELISAkit

hz-E11040 人糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒 Human glycogen synthase kinase,GSK ELISAkit

hz-E11041 人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒 Human Caspase-9,Casp-9 ELISAkit

hz-E11042 人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA试剂盒 Human Caspase 3,Casp-3 ELISAkit

hz-E11043 人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒 Human neutrophil elastase,NE ELISAkit

hz-E11044 人碳酸酐酶2(CA-2)ELISA试剂盒 Human carbonic anhydrase 2,CA-2 ELISAkit 

hz-E11045 人解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒 Human A Disintegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISAkit

hz-E11046 人髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 Human myeloperoxidase,MPO ELISAkit

hz-E11047 人颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒 Human granzymes B,Gzms-B ELISAkit

hz-E11048 人颗粒酶A(Gzms-A)ELISA试剂盒 Human granzymes A,Gzms-A ELISAkit

hz-E11049 人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒 Human Calf intestinal alkaline phosphatase,CIAP ELISAkit

hz-E11050 人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒 Human Super Oxidase Dimutase,SOD ELISAkit

hz-E11051 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA试剂盒 Human dipeptidyl peptldase Ⅳ,DPPⅣ ELISAkit

hz-E11052 人组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒 Human Histone Deacetylase,HD ELISAkit 

hz-E11053 人甲基化酶(Methylase)ELISA试剂盒 Human Methylase ELISAkit

hz-E11054 人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒 Human tartrate-resistant acid phosphatase 5b,TRACP-5b ELISAkit

hz-E11055 人磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒 Human Phosphotylinosital 3 kinase,PI3K ELISAkit