人黑色素瘤细胞株 A375细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变人黑色素瘤细胞株 A375细胞小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染人黑色素瘤细胞株 A375细胞料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
人黑色素瘤细胞株 A375细胞
HZG262Hu 人蛋白酶体亚基α7(PSMα7)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Proteasome Subunit Alpha Type 7 (PSMa7)
HZG260Hu 人蛋白酶体亚基α5(PSMα5)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Proteasome Subunit Alpha Type 5 (PSMa5)
HZB523Hu 人趋化因子C-X3-C-基元受体1(CX3CR1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Chemokine C-X3-C-Motif Receptor 1 (CX3CR1)
HZH430Hu 人丙酮酸羧化酶(PC)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Pyruvate Carboxylase (PC)
HZL148Hu 人Notch同源物2(NOTCH2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Notch Homolog 2 (NOTCH2)
HZE330Hu 人Rho GDP解离抑制因子β(ARHGDIβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Rho GDP Dissociation Inhibitor Beta (ARHGDIb)
HZF134Hu 人泛素特异性肽酶14(USP14)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ubiquitin Specific Peptidase 14 (USP14)
HZE669Hu 人二氢嘧啶酶(DPYS)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Dihydropyrimidinase (DPYS)
HZA949Hu 人信号调节蛋白β1(SIRPβ1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Signal Regulatory Protein Beta 1 (SIRPb1)
HZA953Hu 人信号调节蛋白α(SIRPα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Signal Regulatory Protein Alpha (SIRPa)
HZA947Hu 人信号调节蛋白γ(SIRPγ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Signal Regulatory Protein Gamma (SIRPg)
HZA561Hu 人白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Leukemia Inhibitory Factor Receptor (LIFR)
HZG790Hu 人Mdm2 p53结合蛋白同源物(MDM2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Mdm2 p53 Binding Protein Homolog (MDM2)
HZK111Hu 人DNA修复蛋白RAD50(RAD50)ELISA试剂盒 ELISA Kit for DNA Repair Protein RAD50 (RAD50)
HZB405Hu 人补体成分1q受体(C1qR1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Component 1, Q Receptor (C1qR1)
HZG480Hu 人毛透明蛋白(TCHH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Trichohyalin (TCHH)
AEK505Hu 人抗肝素/血小板因子4抗体(Anti-HPF4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Anti-Heparin/Platelet Factor 4 Antibodies (Anti-HPF4)
HZB324Hu 人钙调结合蛋白(CALD)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Caldesmon (CALD)
HZC223Hu 人辅肌动蛋白α4(ACTN4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Actinin Alpha 4 (ACTN4)
HZG084Hu 人嘌呤能受体P2Y14(P2RY14)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Purinergic Receptor P2Y, G Protein Coupled 14 (P2RY14)
HZG120Hu 人Synerginγ蛋白(SYNRγ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Synergin Gamma (SYNRg)