人皮肤癌细胞系 HS-1细胞凋亡检测技术与方法详解:
细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.
一、细胞凋亡的形态学检测
根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.
1、光学显微镜和倒置显微镜人皮肤癌细胞系 HS-1细胞
(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.
(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.
2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜
一般以细胞核染色质的形态学改人皮肤癌细胞系 HS-1细胞变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.
常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.
Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。
胞凋亡检测技术与方法图
人皮肤癌细胞系 HS-1细胞
HZA791Ra 大鼠骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Osteonectin (ON)
HZA611Ra 大鼠血小板反应蛋白(THBS1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thrombospondin 1 (THBS1)
HZA615Ra 大鼠纤溶抑制因子(TAFI)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor (TAFI)
HZA616Ra 大鼠V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for V-Rel Reticuloendotheliosis Viral Oncogene Homolog A (RELA)
HZB859Ra 大鼠凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lectin Like Oxidized Low Density Lipoprotein Receptor 1 (LOX1)
HZA620Ra 大鼠解整合素金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒 ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 8 (ADAM8)
HZA780Ra 大鼠乳铁传递蛋白(LTF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lactoferrin (LTF)
HZA624Ra 大鼠肝癌源性生长因子(HDGF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hepatoma Derived Growth Factor (HDGF)
HZA629Ra 大鼠BH3相互作用域死亡激动剂(Bid)ELISA试剂盒 ELISA Kit for BH3 Interacting Domain Death Agonist (Bid)
HZA771Ra 大鼠趋化因子C-X-C-基元配体16(CXCL16)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16 (CXCL16)
HZA630Ra 大鼠糖原合酶激酶3α(GSK3α)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a)
HZA180Ra 大鼠Ⅳ型胶原(COL4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Collagen Type IV (COL4)
HZA609Ra 大鼠谷胱甘肽S转移酶α1(GSTα1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1)
HZA637Ra 大鼠氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Hexosaminidase B Beta (HEXb)
CEA635Ra 大鼠补体因子H(CFH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement Factor H (CFH)