人皮肤成纤维细胞 Hs 865.Sk细胞

人皮肤成纤维细胞 Hs 865.Sk细胞凋亡检测技术与方法详解：

细胞凋亡（Apoptosis）,又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程.它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程.细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来.凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法.

一、细胞凋亡的形态学检测

根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法.

1、光学显微镜和倒置显微镜

（1） 未染色细胞：凋亡细胞的体积人皮肤成纤维细胞 Hs 865.Sk细胞变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体.贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落.

（2） 染色细胞：常用姬姆萨染色、瑞氏染色等.凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态.

2、荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜

 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况.

常用的DNA特异性染料有：HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI.三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区.紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光.

Hoechst是与DN人皮肤成纤维细胞 Hs 865.Sk细胞特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml.DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色.储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为0.5 ~1mg/ml. 结果评判：细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期：Ⅰ期的细胞核呈波纹状（rippled）或呈折缝样（creased）,部分染色质出现浓缩状态；aⅡ期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化；bⅡ期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体细。

胞凋亡检测技术与方法图

人皮肤成纤维细胞 Hs 865.Sk细胞

HZA628Ra 大鼠一氧化氮合酶运输因子(NOSTRIN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase Trafficker (NOSTRIN)

HZA928Ra 大鼠肿瘤蛋白p53(TP53)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tumor Protein p53 (TP53)

CEA393Ra 大鼠P物质(SP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Substance P (SP)

HZA160Ra 大鼠α2-纤溶酶抑制因子(α2PI)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI)

HZA588Ra 大鼠M2-型丙酮酸激酶(PKM2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Pyruvate Kinase, Muscle (PKM2)

HZA820Ra 大鼠凝血因子Ⅱ(F2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Coagulation Factor II (F2)

HZA033Ra 大鼠干扰素α(IFNα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interferon Alpha (IFNa)

HZA181Ra 大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Elastase 2, Neutrophil (ELA2)

HZA625Ra 大鼠趋化因子C-X-C-基元受体3(CXCR3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Receptor 3 (CXCR3)

HZA778Ra 大鼠B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2)

HZA626Ra 大鼠胱天蛋白酶3(CASP3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Caspase 3 (CASP3)

HZA627Ra 大鼠胱天蛋白酶9(CASP9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Caspase 9 (CASP9)

HZA896Ra 大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cystatin 3 (CST3)

HZA899Ra 大鼠骨桥素(OPN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Osteopontin (OPN)

CEA898Ra 大鼠α-骨胶原交联(αCTx)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alpha-Crosslaps (aCTx)

CEA892Ra 大鼠β-骨胶原交联(βCTx)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Beta-Crosslaps (bCTx)

HZA589Ra 大鼠血红素氧合酶2(HO2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Heme Oxygenase 2, Decycling (HO2)

HZA641Ra 大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Secretory Immunoglobulin A (sIgA)

HZA478Ra 大鼠心肌肌钙蛋白I(TNNI3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3)

HZA831Ra 大鼠凝血酶/抗凝血酶复合体(TAT)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Thrombin/Antithrombin Complex (TAT)

HZA833Ra 大鼠血管性血友病因子(vWF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Von Willebrand Factor (vWF)

HZA834Ra 大鼠凝血因子Ⅹ(F10)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Coagulation Factor X (F10)