小肠结肠炎耶尔森氏菌

培养小肠结肠炎耶尔森氏菌操作

1. 器械和器皿

器械：外科剪、镊子、虹膜剪等、小剪刀、细镊子和虹膜小刀等

各种金属器械如解剖器械，使用后及时刷洗干净，用酒精棉球擦拭后晾干，或经60°C烘干，以防生锈。由于湿热消毒对手术器械容易可用70－80％酒精浸泡1小时以上消毒。

器皿：1) 玻璃瓶及相应的胶塞或胶木螺旋盖

用于分装血清、多聚赖氨酸、小肠结肠炎耶尔森氏菌解剖液、各种盐溶液和培养液等。

2)用培养瓶、盖玻片

培养用的盖玻片必须不含铅、不发霉，可用0.2N盐酸浸泡10分钟，用蒸馏水洗2次，每次10分钟，然后移入丙酮或乙醇浸泡10分钟，再用双蒸水洗2次，每次10分钟，烘干待消毒。凡组织学用过的旧盖玻片一般不用。

3) 移液管、吸管、烧杯、离心管和培养皿。

4) 塑料培养皿（35mm）小肠结肠炎耶尔森氏菌、塑料培养板（6、24、96孔）。

辅助工具：放置试管、吸管和玻璃瓶等的架子。

细胞识别，根据细胞外形及内部结构进行细胞的识别。神经细胞具有显著的特征，培养中的贴壁的神经元突起很明显，特别是树突由粗而细，有分支，突起的末端有膨大的生长锥结构，正在不断变化；细胞体呈圆形、梭形、三角形或多角形不等，胞体较厚，具有空泡状核，有明显的核仁；立体感强，常见“晕”。

培养细胞中可包括几种神经元的类型和非神小肠结肠炎耶尔森氏菌经元的“背景细胞”，即成纤维细胞、室管膜细胞和几种胶质细胞。成纤维细胞贴壁最快，呈扁平状，胞核卵园形，有并列的两粒小核仁，从胞体两端发出细长突起。胶质细胞贴附在胶原上和成纤维细胞形成一层“地毯”。神经细胞贴壁较慢，落在“地毯”上生长迁移和分化。

培养的神经细胞可按一般Nissl法染色或免疫细胞化学特异性染色加以鉴别。

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