人转化生长因子Β2(TGFΒ2)ELISA试剂盒操作步骤

中文别名:人转化生长因子Β2(TGFΒ2)ELISA试剂盒
英文名称:Human transforming growth factors β2, TGFβ2 Elisa Kit
特异性：可检测样本中的人转化生长因子β2，且与其类似物无明显交叉反应。
种属： 人
保存温度： 2-8℃
样本类型： 血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清 和 其他生物液体

背景：
转化生长因子β2(TGF-β2)前体蛋白由19个氨基酸的信号肽、283个氨基酸的前区和112个氨基酸的成熟区组成。人TGF-β2成熟区与人TGF-β1和TGF-β3的同源性分别为71%和80%，与小鼠TGF-β2的同源性为97%。它可由各类细胞表达，包括破骨细胞、胸腺上皮细胞、角蛋白细胞、肝细胞、胃的主细胞和卫星细胞等。TGF-β2具有显著的种属交叉生物活性，如人TGF-β2对小鼠细胞具有活性，而猪TGF-β2对兔细胞具有活性等。TGF-β2具有4种基本活性：是大部分类型细胞的生长抑制因子；可增强细胞外基质的沉积；具有免疫抑制作用，抑制抗原递呈细胞表达IL-12和CD40L，上调IL-10分泌；在胚胎发育期表达于离散区域，如上皮、心肌、手足的软骨和骨骼、以及神经系统，提示其具有特异性的功能。

工作原理：本试剂盒采用的是双抗体夹心法酶联免疫吸附检测技术（ELISA）。测定样品中人转化生长因子β2水平。向预先包被了抗人转化生长因子β2抗体的酶标孔中，加入标准品和样本，温育后，加入生物素标记的抗转化生长因子β2抗体。再与HRP标记的链霉亲和素结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入显色底物TMB，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。最后，在450 nm处测定反应孔样品吸光度（OD）值，样本中的人转化生长因子β2浓度与OD值成正比，通过绘制标准曲线计算出样本中人转化生长因子β2的浓度。

产品描述
试剂名称    数量    试剂名称    数量
96孔板(预包被)    1    96孔板覆膜    2
标准品    2    稀释液    1×45mL
检测溶液A    1×120μL    检测溶液B    1×120μL
TMB底物    1×9mL    终止液    1×6mL
浓洗涤液(30×)    1×20mL    使用说明书    1

需自备的设备及试剂
450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
单道或多道微量加液器及吸头
稀释样品的EP管
蒸馏水或去离子水
吸水纸
盛放洗液的容器

试剂盒的储存及有效期
未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液，终止液保存于4℃，其他试剂保存于-20℃。
使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃，避免潮湿。

稳定性
经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

注意：
试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后 1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。